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- PDB-6xis: Cryo-EM structure of the G protein-gated inward rectifier K+ chan... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 6xis
タイトルCryo-EM structure of the G protein-gated inward rectifier K+ channel GIRK2 (Kir3.2) in apo form
要素G protein-activated inward rectifier potassium channel 2
キーワードMEMBRANE PROTEIN / G protein-coupled inwardly rectifying potassium channels / PIP2
機能・相同性
機能・相同性情報


G-protein activated inward rectifier potassium channel activity / Activation of G protein gated Potassium channels / Inhibition of voltage gated Ca2+ channels via Gbeta/gamma subunits / voltage-gated monoatomic ion channel activity involved in regulation of presynaptic membrane potential / inward rectifier potassium channel activity / regulation of monoatomic ion transmembrane transport / parallel fiber to Purkinje cell synapse / monoatomic ion channel complex / neuronal cell body membrane / potassium ion import across plasma membrane ...G-protein activated inward rectifier potassium channel activity / Activation of G protein gated Potassium channels / Inhibition of voltage gated Ca2+ channels via Gbeta/gamma subunits / voltage-gated monoatomic ion channel activity involved in regulation of presynaptic membrane potential / inward rectifier potassium channel activity / regulation of monoatomic ion transmembrane transport / parallel fiber to Purkinje cell synapse / monoatomic ion channel complex / neuronal cell body membrane / potassium ion import across plasma membrane / potassium channel activity / G-protein alpha-subunit binding / negative regulation of insulin secretion / presynapse / presynaptic membrane / postsynapse / axon / dendrite / cell surface / plasma membrane
類似検索 - 分子機能
Potassium channel, inwardly rectifying, Kir3.2 / Potassium channel, inwardly rectifying, transmembrane domain / Inward rectifier potassium channel transmembrane domain / Potassium channel, inwardly rectifying, Kir, cytoplasmic / Potassium channel, inwardly rectifying, Kir / Inward rectifier potassium channel, C-terminal / Inward rectifier potassium channel C-terminal domain / Immunoglobulin E-set
類似検索 - ドメイン・相同性
G protein-activated inward rectifier potassium channel 2 / G protein-activated inward rectifier potassium channel 2
類似検索 - 構成要素
生物種Mus musculus (ハツカネズミ)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å
データ登録者Niu, Y. / Tao, X. / MacKinnon, R.
資金援助 米国, 1件
組織認可番号
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM43949 米国
引用ジャーナル: Elife / : 2020
タイトル: Cryo-EM analysis of PIP regulation in mammalian GIRK channels.
著者: Yiming Niu / Xiao Tao / Kouki K Touhara / Roderick MacKinnon /
要旨: G-protein-gated inward rectifier potassium (GIRK) channels are regulated by G proteins and PIP. Here, using cryo-EM single particle analysis we describe the equilibrium ensemble of structures of ...G-protein-gated inward rectifier potassium (GIRK) channels are regulated by G proteins and PIP. Here, using cryo-EM single particle analysis we describe the equilibrium ensemble of structures of neuronal GIRK2 as a function of the C8-PIP concentration. We find that PIP shifts the equilibrium between two distinguishable structures of neuronal GIRK (GIRK2), extended and docked, towards the docked form. In the docked form the cytoplasmic domain, to which G binds, becomes accessible to the cytoplasmic membrane surface where G resides. Furthermore, PIP binding reshapes the G binding surface on the cytoplasmic domain, preparing it to receive G. We find that cardiac GIRK (GIRK1/4) can also exist in both extended and docked conformations. These findings lead us to conclude that PIP influences GIRK channels in a structurally similar manner to Kir2.2 channels. In Kir2.2 channels, the PIP-induced conformational changes open the pore. In GIRK channels, they prepare the channel for activation by G.
履歴
登録2020年6月21日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02020年10月7日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年10月16日Group: Data collection / Database references ...Data collection / Database references / Refinement description / Structure summary
カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond ...chem_comp_atom / chem_comp_bond / database_2 / em_3d_fitting_list / em_admin / pdbx_entry_details / pdbx_initial_refinement_model / pdbx_modification_feature
Item: _database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession ..._database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession / _em_3d_fitting_list.accession_code / _em_3d_fitting_list.initial_refinement_model_id / _em_3d_fitting_list.source_name / _em_3d_fitting_list.type / _em_admin.last_update

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-22199
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: G protein-activated inward rectifier potassium channel 2
B: G protein-activated inward rectifier potassium channel 2
C: G protein-activated inward rectifier potassium channel 2
D: G protein-activated inward rectifier potassium channel 2


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)156,2484
ポリマ-156,2484
非ポリマー00
00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: gel filtration, Elution volume roughly equals to ~200 kDa molecular weight complex
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質
G protein-activated inward rectifier potassium channel 2


分子量: 39061.957 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Mus musculus (ハツカネズミ) / 遺伝子: Kcnj6 / 発現宿主: Komagataella pastoris (菌類) / 参照: UniProt: A0A338P6L0, UniProt: P48542*PLUS
Has protein modificationY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Homo-tetrameric assembly of G protein-activated inward rectifier potassium channel 2
タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT
分子量実験値: NO
由来(天然)生物種: Mus musculus (ハツカネズミ)
由来(組換発現)生物種: Komagataella pastoris (菌類)
緩衝液pH: 7.5
詳細: 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 150 mM KCl, 10 mM DTT, 1 mM DETA, 0.05% DDM and 0.01% CHS
試料濃度: 6 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 298 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: DARK FIELD / C2レンズ絞り径: 100 µm
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影平均露光時間: 3 sec. / 電子線照射量: 103.254 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1

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解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
2SerialEM画像取得
4Gctf1.0.6CTF補正
7UCSF Chimera1.14モデルフィッティング
8Coot0.9モデルフィッティング
9PHENIX1.151.2モデルフィッティング
11RELION3初期オイラー角割当
12cryoSPARC2.9.0初期オイラー角割当
13RELION3最終オイラー角割当
14RELION3分類
15cryoSPARC2.9.03次元再構成
16PHENIX1.151.2モデル精密化
CTF補正タイプ: NONE
対称性点対称性: C4 (4回回転対称)
3次元再構成解像度: 3.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 112571 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築

3D fitting-ID: 1 / Accession code: 3SYO / Initial refinement model-ID: 1 / PDB chain-ID: A / PDB-ID: 3SYO

/ Source name: PDB / タイプ: experimental model

IDPdb chain residue range
153-200
2208-380

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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