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Yorodumi- PDB-6gkt: X-ray structure of a non-autocrystallizing galectin-10 variant, G... -
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Open data
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Basic information
| Entry | Database: PDB / ID: 6gkt | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Title | X-ray structure of a non-autocrystallizing galectin-10 variant, Gal10-Tyr69Glu | ||||||
Components | Galectin-10 | ||||||
Keywords | SUGAR BINDING PROTEIN / Non-autocrystallizing / mutant / galectin-10 | ||||||
| Function / homology | Function and homology informationregulation of activated T cell proliferation / regulation of T cell cytokine production / T cell apoptotic process / regulation of T cell anergy / : / carbohydrate binding / identical protein binding / cytosol Similarity search - Function | ||||||
| Biological species | Homo sapiens (human) | ||||||
| Method | X-RAY DIFFRACTION / SYNCHROTRON / MOLECULAR REPLACEMENT / Resolution: 2.1 Å | ||||||
Authors | Verstraete, K. / Verschueren, K. / Savvides, S.N. | ||||||
| Funding support | Belgium, 1items
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Citation | Journal: Science / Year: 2019Title: Protein crystallization promotes type 2 immunity and is reversible by antibody treatment. Authors: Emma K Persson / Kenneth Verstraete / Ines Heyndrickx / Elien Gevaert / Helena Aegerter / Jean-Michel Percier / Kim Deswarte / Koen H G Verschueren / Ann Dansercoer / Delphine Gras / Pascal ...Authors: Emma K Persson / Kenneth Verstraete / Ines Heyndrickx / Elien Gevaert / Helena Aegerter / Jean-Michel Percier / Kim Deswarte / Koen H G Verschueren / Ann Dansercoer / Delphine Gras / Pascal Chanez / Claus Bachert / Amanda Gonçalves / Hanne Van Gorp / Hans De Haard / Christophe Blanchetot / Michael Saunders / Hamida Hammad / Savvas N Savvides / Bart N Lambrecht / ![]() Abstract: Although spontaneous protein crystallization is a rare event in vivo, Charcot-Leyden crystals (CLCs) consisting of galectin-10 (Gal10) protein are frequently observed in eosinophilic diseases, such ...Although spontaneous protein crystallization is a rare event in vivo, Charcot-Leyden crystals (CLCs) consisting of galectin-10 (Gal10) protein are frequently observed in eosinophilic diseases, such as asthma. We found that CLCs derived from patients showed crystal packing and Gal10 structure identical to those of Gal10 crystals grown in vitro. When administered to the airways, crystalline Gal10 stimulated innate and adaptive immunity and acted as a type 2 adjuvant. By contrast, a soluble Gal10 mutein was inert. Antibodies directed against key epitopes of the CLC crystallization interface dissolved preexisting CLCs in patient-derived mucus within hours and reversed crystal-driven inflammation, goblet-cell metaplasia, immunoglobulin E (IgE) synthesis, and bronchial hyperreactivity (BHR) in a humanized mouse model of asthma. Thus, protein crystals may promote hallmark features of asthma and are targetable by crystal-dissolving antibodies. | ||||||
| History |
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Structure visualization
| Structure viewer | Molecule: Molmil Jmol/JSmol |
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Downloads & links
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Download
| PDBx/mmCIF format | 6gkt.cif.gz | 368.9 KB | Display | PDBx/mmCIF format |
|---|---|---|---|---|
| PDB format | pdb6gkt.ent.gz | 304.2 KB | Display | PDB format |
| PDBx/mmJSON format | 6gkt.json.gz | Tree view | PDBx/mmJSON format | |
| Others | Other downloads |
-Validation report
| Arichive directory | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/gk/6gkt ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/gk/6gkt | HTTPS FTP |
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-Related structure data
| Related structure data | ![]() 6gkqC ![]() 6gksC ![]() 6gkuC ![]() 6glwC ![]() 6glxC ![]() 6qrnC ![]() 1lclS C: citing same article ( S: Starting model for refinement |
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| Similar structure data |
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Links
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Assembly
| Deposited unit | ![]()
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| 3 | ![]()
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| Unit cell |
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Components
| #1: Protein | Mass: 16632.971 Da / Num. of mol.: 6 Source method: isolated from a genetically manipulated source Details: Recombinant human galectin-10-Tyr69Glu was produced with an N-terminal cleavable His-tag (MASTTHHHHHHDTDIPTTGGGSRPDDDDKENLYFQG). The His-tag was removed by TEV-cleavage before crystallization. Source: (gene. exp.) Homo sapiens (human) / Gene: CLC, LGALS10, LGALS10A / Plasmid: pET28 / Production host: ![]() #2: Chemical | ChemComp-PGE / #3: Chemical | ChemComp-PG4 / | #4: Chemical | ChemComp-P6G / | #5: Water | ChemComp-HOH / | |
|---|
-Experimental details
-Experiment
| Experiment | Method: X-RAY DIFFRACTION / Number of used crystals: 1 |
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Sample preparation
| Crystal | Density Matthews: 3 Å3/Da / Density % sol: 58.95 % |
|---|---|
| Crystal grow | Temperature: 298 K / Method: vapor diffusion, sitting drop / Details: 0.2 M ammonium citrate pH 5.1 20% PEG 3350 |
-Data collection
| Diffraction | Mean temperature: 100 K |
|---|---|
| Diffraction source | Source: SYNCHROTRON / Site: SLS / Beamline: X06SA / Wavelength: 0.99998 Å |
| Detector | Type: DECTRIS EIGER X 16M / Detector: PIXEL / Date: Dec 10, 2017 |
| Radiation | Protocol: SINGLE WAVELENGTH / Monochromatic (M) / Laue (L): M / Scattering type: x-ray |
| Radiation wavelength | Wavelength: 0.99998 Å / Relative weight: 1 |
| Reflection | Resolution: 2.1→50 Å / Num. obs: 68207 / % possible obs: 99 % / Redundancy: 6.9 % / Biso Wilson estimate: 39.7 Å2 / CC1/2: 0.99 / Rrim(I) all: 0.15 / Net I/σ(I): 9.33 |
| Reflection shell | Resolution: 2.1→2.23 Å / Redundancy: 6.7 % / Mean I/σ(I) obs: 0.7 / Num. unique obs: 10924 / CC1/2: 0.36 / Rrim(I) all: 2.27 / % possible all: 98.6 |
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Processing
| Software |
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| Refinement | Method to determine structure: MOLECULAR REPLACEMENTStarting model: 1LCL Resolution: 2.1→42 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.957 / Cor.coef. Fo:Fc free: 0.947 / Rfactor Rfree error: 0 / SU R Cruickshank DPI: 0.161 / Cross valid method: THROUGHOUT / σ(F): 0 / SU R Blow DPI: 0.166 / SU Rfree Blow DPI: 0.144 / SU Rfree Cruickshank DPI: 0.142
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| Displacement parameters | Biso mean: 51.83 Å2
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| Refine analyze | Luzzati coordinate error obs: 0.26 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Refinement step | Cycle: 1 / Resolution: 2.1→42 Å
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| Refine LS restraints |
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| LS refinement shell | Resolution: 2.1→2.15 Å / Rfactor Rfree error: 0 / Total num. of bins used: 20
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| Refinement TLS params. | Method: refined / Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION
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| Refinement TLS group |
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