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- EMDB-10618: The human core BBSome complex (BBS 1,4,5,8,9,18) -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-10618
タイトルThe human core BBSome complex (BBS 1,4,5,8,9,18)
マップデータ
試料
  • 複合体: Human BBSome core complex
    • タンパク質・ペプチド: Bardet-Biedl syndrome 5 protein
キーワードciliary transport / Arl6 effector / adaptor protein / complex / PROTEIN TRANSPORT
機能・相同性
機能・相同性情報


BBSome / melanosome transport / motile cilium assembly / BBSome-mediated cargo-targeting to cilium / phosphatidylinositol-3-phosphate binding / ciliary membrane / heart looping / axoneme / centriolar satellite / cilium assembly ...BBSome / melanosome transport / motile cilium assembly / BBSome-mediated cargo-targeting to cilium / phosphatidylinositol-3-phosphate binding / ciliary membrane / heart looping / axoneme / centriolar satellite / cilium assembly / intracellular transport / visual perception / ciliary basal body / protein transport / RNA polymerase II-specific DNA-binding transcription factor binding / cytosol
類似検索 - 分子機能
Bardet-Biedl syndrome 5 protein / DM16 repeat / Bardet-Biedl syndrome 5 protein/sex-determination protein fem-3 / Bardet-Biedl syndrome 5 protein / Repeats in sea squirt COS41.4, worm R01H10.6, fly CG1126 etc. / PH-like domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
BBSome complex member BBS5
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.3 Å
データ登録者Klink BU / Raunser S
資金援助 ドイツ, 1件
OrganizationGrant number
Max Planck Society ドイツ
引用ジャーナル: Elife / : 2020
タイトル: Structure of the human BBSome core complex.
著者: Björn Udo Klink / Christos Gatsogiannis / Oliver Hofnagel / Alfred Wittinghofer / Stefan Raunser /
要旨: The BBSome is a heterooctameric protein complex that plays a central role in primary cilia homeostasis. Its malfunction causes the severe ciliopathy Bardet-Biedl syndrome (BBS). The complex acts as a ...The BBSome is a heterooctameric protein complex that plays a central role in primary cilia homeostasis. Its malfunction causes the severe ciliopathy Bardet-Biedl syndrome (BBS). The complex acts as a cargo adapter that recognizes signaling proteins such as GPCRs and links them to the intraflagellar transport machinery. The underlying mechanism is poorly understood. Here we present a high-resolution cryo-EM structure of a human heterohexameric core subcomplex of the BBSome. The structure reveals the architecture of the complex in atomic detail. It explains how the subunits interact with each other and how disease-causing mutations hamper this interaction. The complex adopts a conformation that is open for binding to membrane-associated GTPase Arl6 and a large positively charged patch likely strengthens the interaction with the membrane. A prominent negatively charged cleft at the center of the complex is likely involved in binding of positively charged signaling sequences of cargo proteins.
履歴
登録2020年1月15日-
ヘッダ(付随情報) 公開2020年2月19日-
マップ公開2020年2月19日-
更新2024年5月22日-
現状2024年5月22日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図(断面を密度値に従い着色)
  • 表面レベル: 0.0175
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図(半径に従い着色)
  • 表面レベル: 0.0175
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6xtb
  • 表面レベル: 0.0175
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-6xtb
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_10618.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.07 Å/pix.
x 280 pix.
= 299.6 Å
1.07 Å/pix.
x 280 pix.
= 299.6 Å
1.07 Å/pix.
x 280 pix.
= 299.6 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.07 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.0175 / ムービー #1: 0.0175
最小 - 最大-0.033580124 - 0.06300068
平均 (標準偏差)0.00022122166 (±0.002166431)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ280280280
Spacing280280280
セルA=B=C: 299.6 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.071.071.07
M x/y/z280280280
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z299.600299.600299.600
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS280280280
D min/max/mean-0.0340.0630.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Human BBSome core complex

全体名称: Human BBSome core complex
要素
  • 複合体: Human BBSome core complex
    • タンパク質・ペプチド: Bardet-Biedl syndrome 5 protein

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超分子 #1: Human BBSome core complex

超分子名称: Human BBSome core complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
詳細: BBSome core complex containing BBS1,4,5,8,9 and 18. Only BBS5 was modelled into this map since we obtained another map with higher resolution for the other subunits (see related entry)
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

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分子 #1: Bardet-Biedl syndrome 5 protein

分子名称: Bardet-Biedl syndrome 5 protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 38.797926 KDa
組換発現生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
配列文字列: MSVLDALWED RDVRFDLSAQ QMKTRPGEVL IDCLDSIEDT KGNNGDRGRL LVTNLRILWH SLALSRVNVS VGYNCILNIT TRTANSKLR GQTEALYILT KCNSTRFEFI FTNLVPGSPR LFTSVMAVHR AYETSKMYRD FKLRSALIQN KQLRLLPQEH V YDKINGVW ...文字列:
MSVLDALWED RDVRFDLSAQ QMKTRPGEVL IDCLDSIEDT KGNNGDRGRL LVTNLRILWH SLALSRVNVS VGYNCILNIT TRTANSKLR GQTEALYILT KCNSTRFEFI FTNLVPGSPR LFTSVMAVHR AYETSKMYRD FKLRSALIQN KQLRLLPQEH V YDKINGVW NLSSDQGNLG TFFITNVRIV WHANMNDSFN VSIPYLQIRS IKIRDSKFGL ALVIESSQQS GGYVLGFKID PV EKLQESV KEINSLHKVY SASPIFGVDY EMEEKPQPLE ALTVEQIQDD VEIDSDGHTD AFVAYFADGN KQQDREPVFS EEL GLAIEK LKDGFTLQGL WEVMS

UniProtKB: BBSome complex member BBS5

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.08 mg/mL
緩衝液pH: 7.5
構成要素:
濃度名称
20.0 mMTRIS-HCL
150.0 mMNaCl
0.1 mMTCEP
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 286 K / 装置: FEI VITROBOT MARK III
詳細: double blot with 2 minutes incubation after first sample application.
詳細The sample was cross linked with 0.5% glutaraldehyde

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-50 / 実像数: 15266 / 平均露光時間: 15.0 sec. / 平均電子線量: 67.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系最大 デフォーカス(補正後): 1.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 0.3 µm / 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 2831329
初期モデルモデルのタイプ: INSILICO MODEL
In silico モデル: An initial model for BBS5 was generated de novo using RaptorX.
詳細: The model was changed to polyalanine
最終 再構成使用したクラス数: 1 / 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPHIRE (ver. 1.2-1.3) / ソフトウェア - 詳細: Meridien / 使用した粒子像数: 180654
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: SPHIRE (ver. 1.2-1.3)
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: SPHIRE (ver. 1.2-1.3) / ソフトウェア - 詳細: Meridien
最終 3次元分類クラス数: 4 / ソフトウェア - 名称: SPHIRE (ver. 1.2-1.3) / ソフトウェア - 詳細: Sort3D
詳細: The subunit BBS5 was located in a subset of 180654 particles identified by 3D sorting.

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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