+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4v6k | |||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Structural insights into cognate vs. near-cognate discrimination during decoding. | |||||||||||||||
要素 |
| |||||||||||||||
キーワード | RIBOSOME / translation / ternary complex / tRNA incorporation / cryoEM / near-cognate | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 guanyl-nucleotide exchange factor complex / negative regulation of cytoplasmic translational initiation / guanosine tetraphosphate binding / stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / translational elongation / RNA folding ...guanyl-nucleotide exchange factor complex / negative regulation of cytoplasmic translational initiation / guanosine tetraphosphate binding / stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / translational elongation / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / translation elongation factor activity / translational termination / four-way junction DNA binding / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / positive regulation of RNA splicing / transcription elongation factor complex / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA endonuclease activity / response to reactive oxygen species / transcription antitermination / regulation of cell growth / translational initiation / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome biogenesis / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / molecular adaptor activity / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) Escherichia coli DH1 (大腸菌) Escherichia coli K-12 (大腸菌) Escherichia coli O157:H7 (大腸菌) | |||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.25 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Agirrezabala, X. / Schreiner, E. / Trabuco, L.G. / Lei, J. / Ortiz-Meoz, R.F. / Schulten, K. / Green, R. / Frank, J. | |||||||||||||||
引用 | ジャーナル: EMBO J / 年: 2011 タイトル: Structural insights into cognate versus near-cognate discrimination during decoding. 著者: Xabier Agirrezabala / Eduard Schreiner / Leonardo G Trabuco / Jianlin Lei / Rodrigo F Ortiz-Meoz / Klaus Schulten / Rachel Green / Joachim Frank / 要旨: The structural basis of the tRNA selection process is investigated by cryo-electron microscopy of ribosomes programmed with UGA codons and incubated with ternary complex (TC) containing the near- ...The structural basis of the tRNA selection process is investigated by cryo-electron microscopy of ribosomes programmed with UGA codons and incubated with ternary complex (TC) containing the near-cognate Trp-tRNA(Trp) in the presence of kirromycin. Going through more than 350 000 images and employing image classification procedures, we find ∼8% in which the TC is bound to the ribosome. The reconstructed 3D map provides a means to characterize the arrangement of the near-cognate aa-tRNA with respect to elongation factor Tu (EF-Tu) and the ribosome, as well as the domain movements of the ribosome. One of the interesting findings is that near-cognate tRNA's acceptor stem region is flexible and CCA end becomes disordered. The data bring direct structural insights into the induced-fit mechanism of decoding by the ribosome, as the analysis of the interactions between small and large ribosomal subunit, aa-tRNA and EF-Tu and comparison with the cognate case (UGG codon) offers clues on how the conformational signals conveyed to the GTPase differ in the two cases. | |||||||||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 4v6k.cif.gz | 3.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | pdb4v6k.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 4v6k.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 4v6k_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | 4v6k_full_validation.pdf.gz | 1.8 MB | 表示 | |
XML形式データ | 4v6k_validation.xml.gz | 251.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 4v6k_validation.cif.gz | 436.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v6/4v6k ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v6/4v6k | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
|
---|---|
1 |
|
-要素
-Ribosomal RNA ... , 2種, 2分子 AAAB
#1: RNA鎖 | 分子量: 38790.090 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 株: K12 / 参照: GenBank: AP012030.1 |
---|---|
#2: RNA鎖 | 分子量: 941813.562 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) / 株: K12 / 参照: GenBank: AP012030.1 |
+50S ribosomal protein ... , 31種, 31分子 ACADAEAFAGAHAIAJAKALAMANAOAPAQARASATAUAVAWAXAYAZAaAbAcAdAeAfAg
-RNA鎖 , 3種, 4分子 BABBBEBD
#34: RNA鎖 | 分子量: 499874.406 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli DH1 (大腸菌) / 参照: GenBank: AP012030.1 | ||
---|---|---|---|
#35: RNA鎖 | 分子量: 24751.018 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli DH1 (大腸菌) / 参照: GenBank: AP012030.1 #37: RNA鎖 | | 分子量: 7487.294 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli (大腸菌) |
-タンパク質 , 1種, 1分子 BC
#36: タンパク質 | 分子量: 43239.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0CE48 |
---|
-30S ribosomal protein ... , 20種, 20分子 BFBGBHBIBJBKBLBMBNBOBPBQBRBSBTBUBVBWBXBY
#38: タンパク質 | 分子量: 26781.670 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7V0 |
---|---|
#39: タンパク質 | 分子量: 26031.316 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7V3 |
#40: タンパク質 | 分子量: 23514.199 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7V8 |
#41: タンパク質 | 分子量: 17629.398 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7W1 |
#42: タンパク質 | 分子量: 15727.512 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P02358 |
#43: タンパク質 | 分子量: 20055.156 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P02359 |
#44: タンパク質 | 分子量: 14146.557 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7W7 |
#45: タンパク質 | 分子量: 14886.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7X3 |
#46: タンパク質 | 分子量: 11755.597 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7R5 |
#47: タンパク質 | 分子量: 13870.975 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7R9 |
#48: タンパク質 | 分子量: 13768.157 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7S3 |
#49: タンパク質 | 分子量: 13128.467 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7S9 |
#50: タンパク質 | 分子量: 11606.560 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0AG59 |
#51: タンパク質 | 分子量: 10319.882 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli O157:H7 (大腸菌) / 参照: UniProt: Q8X9M2 |
#52: タンパク質 | 分子量: 9207.572 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7T3 |
#53: タンパク質 | 分子量: 9724.491 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0AG63 |
#54: タンパク質 | 分子量: 9005.472 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7T7 |
#55: タンパク質 | 分子量: 10455.355 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7U3 |
#56: タンパク質 | 分子量: 9708.464 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P0A7U7 |
#57: タンパク質 | 分子量: 8524.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 株: K12 / 参照: UniProt: P68679 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
| ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK I / 凍結剤: NITROGEN |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Tecnai F30 / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI F30 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 59000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 4000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm |
撮影 | 電子線照射量: 20 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F415 (4k x 4k) |
放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 相対比: 1 |
-解析
EMソフトウェア |
| ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 8.25 Å / 粒子像の数: 359223 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / Target criteria: RMSD < 0.1 A/ns / 詳細: METHOD--flexible fitting, MDFF | ||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 2I2V 2i2v Accession code: 2I2V / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST
|