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- EMDB-12214: human complex II-BATS bound to membrane-attached Rab5a-GTP -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-12214
タイトルhuman complex II-BATS bound to membrane-attached Rab5a-GTP
マップデータSubtomogram averaging reconstruction of human complex II-BATS bound to membrane-attached Rab5a-GTP at 9.8A with the membrane masked out after local-denoising with the LAFTER algorithm
試料
  • 複合体: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human Rab5a
    • 複合体: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG)
      • タンパク質・ペプチド: UV radiation resistance-associated gene protein
      • タンパク質・ペプチド: Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3
      • タンパク質・ペプチド: Phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit 4
      • タンパク質・ペプチド: Beclin-1
      • タンパク質・ペプチド: unknown peptide
    • 複合体: Ras-related protein Rab-5A
      • タンパク質・ペプチド: Ras-related protein Rab-5A
  • リガンド: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
  • リガンド: MAGNESIUM ION
キーワードRab GTPase / Phosphatidylinositol 3-kinase / ENDOCYTOSIS
機能・相同性
機能・相同性情報


regulation of protein serine/threonine kinase activity / lytic vacuole / maintenance of Golgi location / regulation of endosome size / nucleus-vacuole junction / cellular response to aluminum ion / cytoplasmic side of early endosome membrane / Toll Like Receptor 9 (TLR9) Cascade / postsynaptic endosome / Synthesis of PIPs at the late endosome membrane ...regulation of protein serine/threonine kinase activity / lytic vacuole / maintenance of Golgi location / regulation of endosome size / nucleus-vacuole junction / cellular response to aluminum ion / cytoplasmic side of early endosome membrane / Toll Like Receptor 9 (TLR9) Cascade / postsynaptic endosome / Synthesis of PIPs at the late endosome membrane / phosphatidylinositol 3-kinase complex, class III / engulfment of apoptotic cell / cellular response to oxygen-glucose deprivation / Synthesis of PIPs at the early endosome membrane / phosphatidylinositol 3-kinase complex, class III, type II / phosphatidylinositol 3-kinase complex, class III, type I / synaptic vesicle recycling / presynaptic endosome / positive regulation of stress granule assembly / response to mitochondrial depolarisation / amyloid-beta clearance by transcytosis / SARS-CoV-2 modulates autophagy / positive regulation of protein lipidation / host-mediated activation of viral genome replication / positive regulation of attachment of mitotic spindle microtubules to kinetochore / negative regulation of lysosome organization / Synthesis of PIPs at the Golgi membrane / phosphatidylinositol kinase activity / host-mediated perturbation of viral process / positive regulation of autophagosome assembly / regulation of filopodium assembly / negative regulation of autophagosome assembly / cytoplasmic side of mitochondrial outer membrane / protein localization to phagophore assembly site / multivesicular body sorting pathway / receptor catabolic process / protein targeting to vacuole / RAB geranylgeranylation / SMAD protein signal transduction / protein targeting to lysosome / regulation of autophagosome assembly / early endosome to late endosome transport / late endosome to vacuole transport / pexophagy / RAB GEFs exchange GTP for GDP on RABs / retrograde vesicle-mediated transport, Golgi to endoplasmic reticulum / early phagosome / double-strand break repair via classical nonhomologous end joining / phagophore assembly site / Translation of Replicase and Assembly of the Replication Transcription Complex / centrosome cycle / positive regulation of autophagosome maturation / phosphatidylinositol-3-phosphate biosynthetic process / TBC/RABGAPs / cellular response to nitrogen starvation / negative regulation of programmed cell death / response to iron(II) ion / phosphatidylinositol 3-kinase / spindle organization / SNARE complex assembly / lysosome organization / 1-phosphatidylinositol-3-kinase activity / mitotic metaphase chromosome alignment / cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway / Macroautophagy / regulation of synaptic vesicle exocytosis / phosphatidylinositol-mediated signaling / RSV-host interactions / positive regulation of cardiac muscle hypertrophy / p38MAPK cascade / phosphatidylinositol phosphate biosynthetic process / Synthesis of PIPs at the plasma membrane / autolysosome / positive regulation of exocytosis / Respiratory syncytial virus (RSV) attachment and entry / autophagosome membrane / synaptic vesicle endocytosis / PI3K Cascade / chromosome, centromeric region / axoneme / endocytic vesicle / autophagosome assembly / RHO GTPases Activate NADPH Oxidases / response to vitamin E / autophagosome maturation / amyloid-beta metabolic process / regulation of macroautophagy / canonical Wnt signaling pathway / phagocytosis / neuron development / phosphatidylinositol 3-kinase binding / cellular defense response / cellular response to glucose starvation / mitophagy / positive regulation of intrinsic apoptotic signaling pathway / phagocytic vesicle / ruffle / JNK cascade / cellular response to copper ion / somatodendritic compartment
類似検索 - 分子機能
UV radiation resistance protein/autophagy-related protein 14 / Vacuolar sorting 38 and autophagy-related subunit 14 / Serine/threonine-protein kinase Vps15-like / : / VPS15-like, helical domain / Beclin-1, BH3 domain / Beclin-1 BH3 domain, Bcl-2-interacting / Atg6/Beclin / Atg6/Beclin C-terminal domain superfamily / Atg6, BARA domain ...UV radiation resistance protein/autophagy-related protein 14 / Vacuolar sorting 38 and autophagy-related subunit 14 / Serine/threonine-protein kinase Vps15-like / : / VPS15-like, helical domain / Beclin-1, BH3 domain / Beclin-1 BH3 domain, Bcl-2-interacting / Atg6/Beclin / Atg6/Beclin C-terminal domain superfamily / Atg6, BARA domain / Atg6/beclin, coiled-coil domain / Apg6 BARA domain / Apg6 coiled-coil region / Phosphatidylinositol 3-kinase, Vps34 type / HEAT repeat profile. / HEAT, type 2 / Small GTPase Rab domain profile. / C2 phosphatidylinositol 3-kinase-type domain / Phosphoinositide 3-kinase C2 / C2 phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)-type domain profile. / Phosphoinositide 3-kinase, region postulated to contain C2 domain / Phosphoinositide 3-kinase family, accessory domain (PIK domain) / Phosphoinositide 3-kinase family, accessory domain (PIK domain) / Phosphoinositide 3-kinase, accessory (PIK) domain superfamily / Phosphoinositide 3-kinase, accessory (PIK) domain / Phosphatidylinositol kinase / PIK helical domain profile. / Protein kinase C conserved region 2 (CalB) / C2 domain / C2 domain / C2 domain profile. / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinases signature 1. / Phosphatidylinositol 3/4-kinase, conserved site / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinases signature 2. / Phosphatidylinositol 3-/4-kinase, catalytic domain superfamily / Phosphoinositide 3-kinase, catalytic domain / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinase / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinases catalytic domain profile. / Phosphatidylinositol 3-/4-kinase, catalytic domain / Ran (Ras-related nuclear proteins) /TC4 subfamily of small GTPases / C2 domain superfamily / Rho (Ras homology) subfamily of Ras-like small GTPases / Ras subfamily of RAS small GTPases / Small GTPase / Ras family / Rab subfamily of small GTPases / Armadillo-like helical / Small GTP-binding protein domain / Armadillo-type fold / Trp-Asp (WD) repeats signature. / WD domain, G-beta repeat / Trp-Asp (WD) repeats profile. / Trp-Asp (WD) repeats circular profile. / WD40 repeats / Serine/threonine-protein kinase, active site / Serine/Threonine protein kinases active-site signature. / WD40 repeat / WD40-repeat-containing domain superfamily / Protein kinase domain / Serine/Threonine protein kinases, catalytic domain / WD40/YVTN repeat-like-containing domain superfamily / Protein kinase domain profile. / Protein kinase domain / Protein kinase-like domain superfamily / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
Ras-related protein Rab-5A / Beclin-1 / Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3 / Phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit 4 / UV radiation resistance-associated gene protein
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 9.8 Å
データ登録者Tremel S / Morado DR
資金援助 英国, 7件
OrganizationGrant number国
Medical Research Council (MRC, United Kingdom)MC_U105184308 英国
Medical Research Council (MRC, United Kingdom)MC_U10517878 英国
Medical Research Council (MRC, United Kingdom)MC_UP_1201/16 英国
Cancer Research UKC14801/A21211
European Research Council (ERC)ERC-CoG-648432 MEMBRANEFUSION 英国
Wellcome TrustNo. 103139 英国
Wellcome TrustNo. 203149 英国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021
タイトル: Structural basis for VPS34 kinase activation by Rab1 and Rab5 on membranes.
著者: Shirley Tremel / Yohei Ohashi / Dustin R Morado / Jessie Bertram / Olga Perisic / Laura T L Brandt / Marie-Kristin von Wrisberg / Zhuo A Chen / Sarah L Maslen / Oleksiy Kovtun / Mark Skehel / ...著者: Shirley Tremel / Yohei Ohashi / Dustin R Morado / Jessie Bertram / Olga Perisic / Laura T L Brandt / Marie-Kristin von Wrisberg / Zhuo A Chen / Sarah L Maslen / Oleksiy Kovtun / Mark Skehel / Juri Rappsilber / Kathrin Lang / Sean Munro / John A G Briggs / Roger L Williams /
要旨: The lipid phosphatidylinositol-3-phosphate (PI3P) is a regulator of two fundamental but distinct cellular processes, endocytosis and autophagy, so its generation needs to be under precise temporal ...The lipid phosphatidylinositol-3-phosphate (PI3P) is a regulator of two fundamental but distinct cellular processes, endocytosis and autophagy, so its generation needs to be under precise temporal and spatial control. PI3P is generated by two complexes that both contain the lipid kinase VPS34: complex II on endosomes (VPS34/VPS15/Beclin 1/UVRAG), and complex I on autophagosomes (VPS34/VPS15/Beclin 1/ATG14L). The endosomal GTPase Rab5 binds complex II, but the mechanism of VPS34 activation by Rab5 has remained elusive, and no GTPase is known to bind complex I. Here we show that Rab5a-GTP recruits endocytic complex II to membranes and activates it by binding between the VPS34 C2 and VPS15 WD40 domains. Electron cryotomography of complex II on Rab5a-decorated vesicles shows that the VPS34 kinase domain is released from inhibition by VPS15 and hovers over the lipid bilayer, poised for catalysis. We also show that the GTPase Rab1a, which is known to be involved in autophagy, recruits and activates the autophagy-specific complex I, but not complex II. Both Rabs bind to the same VPS34 interface but in a manner unique for each. These findings reveal how VPS34 complexes are activated on membranes by specific Rab GTPases and how they are recruited to unique cellular locations.
履歴
登録2021年1月17日-
ヘッダ(付随情報) 公開2021年3月3日-
マップ公開2021年3月3日-
更新2024年5月1日-
現状2024年5月1日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.008
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.008
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-7bl1
  • 表面レベル: 0.01
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_12214.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_12214.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Subtomogram averaging reconstruction of human complex II-BATS bound to membrane-attached Rab5a-GTP at 9.8A with the membrane masked out after local-denoising with the LAFTER algorithm
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.07 Å/pix.
x 320 pix.
= 341.28 Å		1.07 Å/pix.
x 320 pix.
= 341.28 Å		1.07 Å/pix.
x 320 pix.
= 341.28 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.0665 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.008 / ムービー #1: 0.008
最小 - 最大-0.045468677 - 0.06802449
平均 (標準偏差)0.00014741789 (±0.002034834)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ320320320
Spacing320320320
セルA=B=C: 341.27997 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.06651.06651.0665
M x/y/z320320320
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z341.280341.280341.280
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS320320320
D min/max/mean-0.0450.0680.000

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添付データ

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ハーフマップ: Odd Half-map masked to remove density from the membrane.

ファイルemd_12214_half_map_1.map
注釈Odd Half-map masked to remove density from the membrane.
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
ハーフマップ: Even Half-map masked to remove density from the membrane.

ファイルemd_12214_half_map_2.map
注釈Even Half-map masked to remove density from the membrane.
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human...

全体名称: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human Rab5a
要素
  • 複合体: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human Rab5a
    • 複合体: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG)
      • タンパク質・ペプチド: UV radiation resistance-associated gene protein
      • タンパク質・ペプチド: Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3
      • タンパク質・ペプチド: Phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit 4
      • タンパク質・ペプチド: Beclin-1
      • タンパク質・ペプチド: unknown peptide
    • 複合体: Ras-related protein Rab-5A
      • タンパク質・ペプチド: Ras-related protein Rab-5A
  • リガンド: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
  • リガンド: MAGNESIUM ION

+
超分子 #1: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human...

超分子名称: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) bound to human Rab5a
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#6
詳細: The subunits were expressed using transient transfection in HEK293T cells. Cells were transfected with three plasmids: pYO1025 (encoding VPS34 and VPS15 in a pCAG backbone), pYO1124 (encoding ...詳細: The subunits were expressed using transient transfection in HEK293T cells. Cells were transfected with three plasmids: pYO1025 (encoding VPS34 and VPS15 in a pCAG backbone), pYO1124 (encoding UVGRAG 1-464 fused to the BATS of ATG14, residues 413-492 in pVAG) and pYO1006 (Beclin1 in pCAG)
分子量理論値: 392615 kDa/nm

+
超分子 #2: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG)

超分子名称: human VPS34 complex II (VPS34-VPS15-Beclin1-UVRAG) / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#5
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

+
超分子 #3: Ras-related protein Rab-5A

超分子名称: Ras-related protein Rab-5A / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #6
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)

+
分子 #1: UV radiation resistance-associated gene protein

分子名称: UV radiation resistance-associated gene protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 78.258836 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MSASASVGGP VPQPPPGPAA ALPPGSAARA LHVELPSQQR RLRHLRNIAA RNIVNRNGHQ LLDTYFTLHL CSTEKIYKEF YRSEVIKNS LNPTWRSLDF GIMPDRLDTS VSCFVVKIWG GKENIYQLLI EWKVCLDGLK YLGQQIHARN QNEIIFGLND G YYGAPFEH ...文字列:
MSASASVGGP VPQPPPGPAA ALPPGSAARA LHVELPSQQR RLRHLRNIAA RNIVNRNGHQ LLDTYFTLHL CSTEKIYKEF YRSEVIKNS LNPTWRSLDF GIMPDRLDTS VSCFVVKIWG GKENIYQLLI EWKVCLDGLK YLGQQIHARN QNEIIFGLND G YYGAPFEH KGYSNAQKTI LLQVDQNCVR NSYDVFSLLR LHRAQCAIKQ TQVTVQKIGK EIEEKLRLTS TSNELKKKSE CL QLKILVL QNELERQKKA LGREVALLHK QQIALQDKGS AFSAEHLKLQ LQKESLNELR KECTAKRELF LKTNAQLTIR CRQ LLSELS YIYPIDLNEH KDYFVCGVKL PNSEDFQAKD DGSIAVALGY TAHLVSMISF FLQVPLRYPI IHKGSRSTIK DNIN DKLTE KEREFPLYPK GGEKLQFDYG VYLLNKNIAQ LRYQHGLGTP DLRQTLPNLK NFMEHGLMVR CDRHHTSSAI PVPKR QSSI FGGADVGFSG GIPSPDKGHR KRASSENERL QYKTPPPSYN SALAQPVTTV PSMGETERKI TSLSSSLDTS LDFSKE NKK KGEDLVGSLN GGHANVHPSQ EQGEALSGHR ATVNGTLLPS EQAGSASVQL PGEFHPVSEA ELCCTVEQAE EIIGLEA TG FASGDQLEAF NCIPVDSAVA VECDEQVLGE FEEFSRRIYA LNENVSSFRR PRRSSDK

UniProtKB: UV radiation resistance-associated gene protein

+
分子 #2: Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3

分子名称: Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3
タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: phosphatidylinositol 3-kinase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 101.680328 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MGEAEKFHYI YSCDLDINVQ LKIGSLEGKR EQKSYKAVLE DPMLKFSGLY QETCSDLYVT CQVFAEGKPL ALPVRTSYKA FSTRWNWNE WLKLPVKYPD LPRNAQVALT IWDVYGPGKA VPVGGTTVSL FGKYGMFRQG MHDLKVWPNV EADGSEPTKT P GRTSSTLS ...文字列:
MGEAEKFHYI YSCDLDINVQ LKIGSLEGKR EQKSYKAVLE DPMLKFSGLY QETCSDLYVT CQVFAEGKPL ALPVRTSYKA FSTRWNWNE WLKLPVKYPD LPRNAQVALT IWDVYGPGKA VPVGGTTVSL FGKYGMFRQG MHDLKVWPNV EADGSEPTKT P GRTSSTLS EDQMSRLAKL TKAHRQGHMV KVDWLDRLTF REIEMINESE KRSSNFMYLM VEFRCVKCDD KEYGIVYYEK DG DESSPIL TSFELVKVPD PQMSMENLVE SKHHKLARSL RSGPSDHDLK PNAATRDQLN IIVSYPPTKQ LTYEEQDLVW KFR YYLTNQ EKALTKFLKC VNWDLPQEAK QALELLGKWK PMDVEDSLEL LSSHYTNPTV RRYAVARLRQ ADDEDLLMYL LQLV QALKY ENFDDIKNGL EPTKKDSQSS VSENVSNSGI NSAEIDSSQI ITSPLPSVSS PPPASKTKEV PDGENLEQDL CTFLI SRAC KNSTLANYLY WYVIVECEDQ DTQQRDPKTH EMYLNVMRRF SQALLKGDKS VRVMRSLLAA QQTFVDRLVH LMKAVQ RES GNRKKKNERL QALLGDNEKM NLSDVELIPL PLEPQVKIRG IIPETATLFK SALMPAQLFF KTEDGGKYPV IFKHGDD LR QDQLILQIIS LMDKLLRKEN LDLKLTPYKV LATSTKHGFM QFIQSVPVAE VLDTEGSIQN FFRKYAPSEN GPNGISAE V MDTYVKSCAG YCVITYILGV GDRHLDNLLL TKTGKLFHID FGYILGRDPK PLPPPMKLNK EMVEGMGGTQ SEQYQEFRK QCYTAFLHLR RYSNLILNLF SLMVDANIPD IALEPDKTVK KVQDKFRLDL SDEEAVHYMQ SLIDESVHAL FAAVVEQIHK FAQYWRK

UniProtKB: Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3

+
分子 #3: Phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit 4

分子名称: Phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit 4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: non-specific serine/threonine protein kinase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 154.790391 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MGNQLAGIAP SQILSVESYF SDIHDFEYDK SLGSTRFFKV ARAKHREGLV VVKVFAIQDP TLPLTSYKQE LEELKIRLNS AQNCLPFQK ASEKASEKAA MLFRQYVRDN LYDRISTRPF LNNIEKRWIA FQILTAVDQA HKSGVRHGDI KTENVMVTSW N WVLLTDFA ...文字列:
MGNQLAGIAP SQILSVESYF SDIHDFEYDK SLGSTRFFKV ARAKHREGLV VVKVFAIQDP TLPLTSYKQE LEELKIRLNS AQNCLPFQK ASEKASEKAA MLFRQYVRDN LYDRISTRPF LNNIEKRWIA FQILTAVDQA HKSGVRHGDI KTENVMVTSW N WVLLTDFA SFKPTYLPED NPADFNYFFD TSRRRTCYIA PERFVDGGMF ATELEYMRDP STPLVDLNSN QRTRGELKRA MD IFSAGCV IAELFTEGVP LFDLSQLLAY RNGHFFPEQV LNKIEDHSIR ELVTQMIHRE PDKRLEAEDY LKQQRGNAFP EIF YTFLQP YMAQFAKETF LSADERILVI RKDLGNIIHN LCGHDLPEKA EGEPKENGLV ILVSVITSCL QTLKYCDSKL AALE LILHL APRLSVEILL DRITPYLLHF SNDSVPRVRA EALRTLTKVL ALVKEVPRND INIYPEYILP GIAHLAQDDA TIVRL AYAE NIALLAETAL RFLELVQLKN LNMENDPNNE EIDEVTHPNG NYDTELQALH EMVQQKVVTL LSDPENIVKQ TLMENG ITR LCVFFGRQKA NDVLLSHMIT FLNDKNDWHL RGAFFDSIVG VAAYVGWQSS SILKPLLQQG LSDAEEFVIV KALYALT CM CQLGLLQKPH VYEFASDIAP FLCHPNLWIR YGAVGFITVV ARQISTADVY CKLMPYLDPY ITQPIIQIER KLVLLSVL K EPVSRSIFDY ALRSKDITSL FRHLHMRQKK RNGSLPDCPP PEDPAIAQLL KKLLSQGMTE EEEDKLLALK DFMMKSNKA KANIVDQSHL HDSSQKGVID LAALGITGRQ VDLVKTKQEP DDKRARKHVK QDSNVNEEWK SMFGSLDPPN MPQALPKGSD QEVIQTGKP PRSESSAGIC VPLSTSSQVP EVTTVQNKKP VIPVLSSTIL PSTYQIRITT CKTELQQLIQ QKREQCNAER I AKQMMENA EWESKPPPPG WRPKGLLVAH LHEHKSAVNR IRVSDEHSLF ATCSNDGTVK IWNSQKMEGK TTTTRSILTY SR IGGRVKT LTFCQGSHYL AIASDNGAVQ LLGIEASKLP KSPKIHPLQS RILDQKEDGC VVDMHHFNSG AQSVLAYATV NGS LVGWDL RSSSNAWTLK HDLKSGLITS FAVDIHQCWL CIGTSSGTMA CWDMRFQLPI SSHCHPSRAR IRRLSMHPLY QSWV IAAVQ GNNEVSMWDM ETGDRRFTLW ASSAPPLSEL QPSPHSVHGI YCSPADGNPI LLTAGSDMKI RFWDLAYPER SYVVA GSTS SPSVSYYRKI IEGTEVVQEI QNKQKVGPSD DTPRRGPESL PVGHHDIITD VATFQTTQGF IVTASRDGIV KVWKSR PTT ASENLYFQ

UniProtKB: Phosphoinositide 3-kinase regulatory subunit 4

+
分子 #4: Beclin-1

分子名称: Beclin-1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 51.953102 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MEGSKTSNNS TMQVSFVCQR CSQPLKLDTS FKILDRVTIQ ELTAPLLTTA QAKPGETQEE ETNSGEEPFI ETPRQDGVSR RFIPPARMM STESANSFTL IGEASDGGTM ENLSRRLKVT GDLFDIMSGQ TDVDHPLCEE CTDTLLDQLD TQLNVTENEC Q NYKRCLEI ...文字列:
MEGSKTSNNS TMQVSFVCQR CSQPLKLDTS FKILDRVTIQ ELTAPLLTTA QAKPGETQEE ETNSGEEPFI ETPRQDGVSR RFIPPARMM STESANSFTL IGEASDGGTM ENLSRRLKVT GDLFDIMSGQ TDVDHPLCEE CTDTLLDQLD TQLNVTENEC Q NYKRCLEI LEQMNEDDSE QLQMELKELA LEEERLIQEL EDVEKNRKIV AENLEKVQAE AERLDQEEAQ YQREYSEFKR QQ LELDDEL KSVENQMRYA QTQLDKLKKT NVFNATFHIW HSGQFGTINN FRLGRLPSVP VEWNEINAAW GQTVLLLHAL ANK MGLKFQ RYRLVPYGNH SYLESLTDKS KELPLYCSGG LRFFWDNKFD HAMVAFLDCV QQFKEEVEKG ETRFCLPYRM DVEK GKIED TGGSGGSYSI KTQFNSEEQW TKALKFMLTN LKWGLAWVSS QFYNK

UniProtKB: Beclin-1

+
分子 #5: unknown peptide

分子名称: unknown peptide / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 1.581727 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列:
AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AA

+
分子 #6: Ras-related protein Rab-5A

分子名称: Ras-related protein Rab-5A / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: small monomeric GTPase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 18.769314 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli str. K-12 substr. DH10B (大腸菌)
配列文字列:
NKISQFKLVL LGESAVGKSS LVLRFVKGQF HEFQESTIGA AFLTQTVSLD DTTVKFEIWD TAGLERYHSL APMYYRGAQA AIVVYDITN EESFARAKNW VKELQRQASP NIVIALSGNK ADLANKRAVD FQEAQSYADD NSLLFMETSA KTSMNVNEIF M AIAKKLPK

UniProtKB: Ras-related protein Rab-5A

+
分子 #7: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE

分子名称: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 1 / 式: GTP
分子量理論値: 523.18 Da
Chemical component information

ChemComp-GTP:
GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / GTP / GTP, エネルギー貯蔵分子*YM

+
分子 #8: MAGNESIUM ION

分子名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 8 / コピー数: 1 / 式: MG
分子量理論値: 24.305 Da

-
実験情報

-
構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析サブトモグラム平均法
試料の集合状態3D array

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試料調製

濃度6.2 mg/mL
緩衝液pH: 8
構成要素:
濃度式名称
50.0 mMHEPESHEPES
200.0 mMNaClNaCl
0.5 mMTCEPTCEP
グリッドモデル: Quantifoil / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 詳細: Quorum SC7620
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 316 K / 装置: FEI VITROBOT MARK I / 詳細: Blot force 20, blot time 6 s.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
デジタル化 - サイズ - 横: 6000 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4000 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 0.55 sec. / 平均電子線量: 2.99 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 5.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 倍率（公称値）: 81000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 9.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) / 使用したサブトモグラム数: 26979
抽出トモグラム数: 105 / 使用した粒子像数: 191196 / 参照モデル: two Gaussian filtered elipsoids / ソフトウェア - 名称: MATLAB (ver. R2016b) / ソフトウェア - 詳細: The locally written subTOM
最終 3次元分類クラス数: 20 / 平均メンバー数/クラス: 9600 / ソフトウェア - 名称: MATLAB (ver. R2016b) / ソフトウェア - 詳細: locally written subTOM
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING
Projection matching processing - Merit function: correlation coefficient
ソフトウェア - 名称: MATLAB (ver. R2016b) / ソフトウェア - 詳細: locally written subTOM
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデル
PDB IDChain

5dfz

source_name: PDB, initial_model_type: experimental model

3mjh

chain_id: A, source_name: PDB, initial_model_type: experimental model

4ddp

chain_id: A, source_name: PDB, initial_model_type: experimental model

3ihy

chain_id: A, source_name: PDB, initial_model_type: experimental model
詳細An initial model was build with SWISSMODEL. using 5DFZ, 4DDP and 3IHY. This was then fit manually to density while running restrained MD with ISOLDE. The model was refined in REFMAC with self-restraints (4.3) and restraints to 3MJH, 4DDP and 3IHY.
精密化空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 320 / 当てはまり具合の基準: correlation
得られたモデル

PDB-7bl1:
human complex II-BATS bound to membrane-attached Rab5a-GTP

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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