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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-24314 | ||||||||||||
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タイトル | The structure of human ABCG5/ABCG8 supplemented with cholesterol | ||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||
試料 |
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キーワード | sterol / lipids / ABC transporter / LIPID TRANSPORT | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of intestinal phytosterol absorption / negative regulation of intestinal cholesterol absorption / Defective ABCG8 causes GBD4 and sitosterolemia / Defective ABCG5 causes sitosterolemia / bile acid signaling pathway / sterol transport / ABC transporters in lipid homeostasis / intestinal cholesterol absorption / phospholipid transport / cholesterol transfer activity ...negative regulation of intestinal phytosterol absorption / negative regulation of intestinal cholesterol absorption / Defective ABCG8 causes GBD4 and sitosterolemia / Defective ABCG5 causes sitosterolemia / bile acid signaling pathway / sterol transport / ABC transporters in lipid homeostasis / intestinal cholesterol absorption / phospholipid transport / cholesterol transfer activity / トランスロカーゼ; 他の化合物の輸送を触媒; ヌクレオシド三リン酸の加水分解に伴う / triglyceride homeostasis / response to muscle activity / cholesterol efflux / response to ionizing radiation / ATPase-coupled transmembrane transporter activity / ABC-type transporter activity / NR1H3 & NR1H2 regulate gene expression linked to cholesterol transport and efflux / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / response to nutrient / cholesterol homeostasis / transmembrane transport / receptor complex / response to xenobiotic stimulus / protein heterodimerization activity / apical plasma membrane / ATP hydrolysis activity / ATP binding / metal ion binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) / Mus musculus (ハツカネズミ) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Sun Y / Li X | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2021 タイトル: Molecular basis of cholesterol efflux via ABCG subfamily transporters. 著者: Yingyuan Sun / Jin Wang / Tao Long / Xiaofeng Qi / Linda Donnelly / Nadia Elghobashi-Meinhardt / Leticia Esparza / Jonathan C Cohen / Xiao-Song Xie / Helen H Hobbs / Xiaochun Li / 要旨: The ABCG1 homodimer (G1) and ABCG5-ABCG8 heterodimer (G5G8), two members of the adenosine triphosphate (ATP)-binding cassette (ABC) transporter G family, are required for maintenance of cellular ...The ABCG1 homodimer (G1) and ABCG5-ABCG8 heterodimer (G5G8), two members of the adenosine triphosphate (ATP)-binding cassette (ABC) transporter G family, are required for maintenance of cellular cholesterol levels. G5G8 mediates secretion of neutral sterols into bile and the gut lumen, whereas G1 transports cholesterol from macrophages to high-density lipoproteins (HDLs). The mechanisms used by G5G8 and G1 to recognize and export sterols remain unclear. Here, we report cryoelectron microscopy (cryo-EM) structures of human G5G8 in sterol-bound and human G1 in cholesterol- and ATP-bound states. Both transporters have a sterol-binding site that is accessible from the cytosolic leaflet. A second site is present midway through the transmembrane domains of G5G8. The Walker A motif of G8 adopts a unique conformation that accounts for the marked asymmetry in ATPase activities between the two nucleotide-binding sites of G5G8. These structures, along with functional validation studies, provide a mechanistic framework for understanding cholesterol efflux via ABC transporters. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_24314.map.gz | 51 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-24314-v30.xml emd-24314.xml | 16.6 KB 16.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_24314_fsc.xml | 13.6 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_24314.png | 43.7 KB | ||
Filedesc metadata | emd-24314.cif.gz | 6.7 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24314 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-24314 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_24314_validation.pdf.gz | 518.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_24314_full_validation.pdf.gz | 518.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_24314_validation.xml.gz | 12 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_24314_validation.cif.gz | 15.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-24314 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-24314 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_24314.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 98.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.833 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : ABCG1 transporter with cholesterol and Fab 2C7 bound
全体 | 名称: ABCG1 transporter with cholesterol and Fab 2C7 bound |
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要素 |
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-超分子 #1: ABCG1 transporter with cholesterol and Fab 2C7 bound
超分子 | 名称: ABCG1 transporter with cholesterol and Fab 2C7 bound タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#4 |
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分子量 | 理論値: 150 KDa |
-超分子 #2: ABCG1 transporter with cholesterol bound
超分子 | 名称: ABCG1 transporter with cholesterol bound / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#2 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-超分子 #3: Fab 2C7
超分子 | 名称: Fab 2C7 / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3-#4 |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) |
-分子 #1: ATP-binding cassette sub-family G member 5
分子 | 名称: ATP-binding cassette sub-family G member 5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO EC番号: トランスロカーゼ; 他の化合物の輸送を触媒; ヌクレオシド三リン酸の加水分解に伴う |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 74.437383 KDa |
組換発現 | 生物種: Komagataella pastoris (菌類) |
配列 | 文字列: MGDLSSLTPG GSMGLQVNRG SQSSLEGAPA TAPEPHSLGI LHASYSVSHR VRPWWDITSC RQQWTRQILK DVSLYVESGQ IMCILGSSG SGKTTLLDAM SGRLGRAGTF LGEVYVNGRA LRREQFQDCF SYVLQSDTLL SSLTVRETLH YTALLAIRRG N PGSFQKKV ...文字列: MGDLSSLTPG GSMGLQVNRG SQSSLEGAPA TAPEPHSLGI LHASYSVSHR VRPWWDITSC RQQWTRQILK DVSLYVESGQ IMCILGSSG SGKTTLLDAM SGRLGRAGTF LGEVYVNGRA LRREQFQDCF SYVLQSDTLL SSLTVRETLH YTALLAIRRG N PGSFQKKV EAVMAELSLS HVADRLIGNY SLGGISTGER RRVSIAAQLL QDPKVMLFDE PTTGLDCMTA NQIVVLLVEL AR RNRIVVL TIHQPRSELF QLFDKIAILS FGELIFCGTP AEMLDFFNDC GYPCPEHSNP FDFYMDLTSV DTQSKEREIE TSK RVQMIE SAYKKSAICH KTLKNIERMK HLKTLPMVPF KTKDSPGVFS KLGVLLRRVT RNLVRNKLAV ITRLLQNLIM GLFL LFFVL RVRSNVLKGA IQDRVGLLYQ FVGATPYTGM LNAVNLFPVL RAVSDQESQD GLYQKWQMML AYALHVLPFS VVATM IFSS VCYWTLGLHP EVARFGYFSA ALLAPHLIGE FLTLVLLGIV QNPNIVNSVV ALLSIAGVLV GSGFLRNIQE MPIPFK IIS YFTFQKYCSE ILVVNEFYGL NFTCGSSNVS VTTNPMCAFT QGIQFIEKTC PGATSRFTMN FLILYSFIPA LVILGIV VF KIRDHLISRG SHHHHHHGHH HHHH UniProtKB: ATP-binding cassette sub-family G member 5 |
-分子 #2: ATP-binding cassette sub-family G member 8
分子 | 名称: ATP-binding cassette sub-family G member 8 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO EC番号: トランスロカーゼ; 他の化合物の輸送を触媒; ヌクレオシド三リン酸の加水分解に伴う |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 80.365828 KDa |
組換発現 | 生物種: Komagataella pastoris (菌類) |
配列 | 文字列: MAGKAAEERG LPKGATPQDT SGLQDRLFSS ESDNSLYFTY SGQPNTLEVR DLNYQVDLAS QVPWFEQLAQ FKMPWTSPSC QNSCELGIQ NLSFKVRSGQ MLAIIGSSGC GRASLLDVIT GRGHGGKIKS GQIWINGQPS SPQLVRKCVA HVRQHNQLLP N LTVRETLA ...文字列: MAGKAAEERG LPKGATPQDT SGLQDRLFSS ESDNSLYFTY SGQPNTLEVR DLNYQVDLAS QVPWFEQLAQ FKMPWTSPSC QNSCELGIQ NLSFKVRSGQ MLAIIGSSGC GRASLLDVIT GRGHGGKIKS GQIWINGQPS SPQLVRKCVA HVRQHNQLLP N LTVRETLA FIAQMRLPRT FSQAQRDKRV EDVIAELRLR QCADTRVGNM YVRGLSGGER RRVSIGVQLL WNPGILILDE PT SGLDSFT AHNLVKTLSR LAKGNRLVLI SLHQPRSDIF RLFDLVLLMT SGTPIYLGAA QHMVQYFTAI GYPCPRYSNP ADF YVDLTS IDRRSREQEL ATREKAQSLA ALFLEKVRDL DDFLWKAETK DLDEDTCVES SVTPLDTNCL PSPTKMPGAV QQFT TLIRR QISNDFRDLP TLLIHGAEAC LMSMTIGFLY FGHGSIQLSF MDTAALLFMI GALIPFNVIL DVISKCYSER AMLYY ELED GLYTTGPYFF AKILGELPEH CAYIIIYGMP TYWLANLRPG LQPFLLHFLL VWLVVFCCRI MALAAAALLP TFHMAS FFS NALYNSFYLA GGFMINLSSL WTVPAWISKV SFLRWCFEGL MKIQFSRRTY KMPLGNLTIA VSGDKILSVM ELDSYPL YA IYLIVIGLSG GFMVLYYVSL RFIKQKPSQD WASNSLEVLF QGPNVDSKRR WKKNFIAVSA ANRFKKISSS GAL UniProtKB: ATP-binding cassette sub-family G member 8 |
-分子 #3: 2C7 Fab heavy chain
分子 | 名称: 2C7 Fab heavy chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) |
分子量 | 理論値: 26.37967 KDa |
組換発現 | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) |
配列 | 文字列: MGWSCIILFL VATATGVHSE VKLVESGGGL VQPGGSLRLS CATSGFTFSE FFMEWVRQPP GKRLEWVAVS RNEANDYTTD YSASVKGRF IVSRDTSQNI LYLQMNALRA EDTAIYYCAR DAWMGFDYWG QGTTVTVSSA STKGPSVFPL APSSKSTSGG T AALGCLVK ...文字列: MGWSCIILFL VATATGVHSE VKLVESGGGL VQPGGSLRLS CATSGFTFSE FFMEWVRQPP GKRLEWVAVS RNEANDYTTD YSASVKGRF IVSRDTSQNI LYLQMNALRA EDTAIYYCAR DAWMGFDYWG QGTTVTVSSA STKGPSVFPL APSSKSTSGG T AALGCLVK DYFPEPVTVS WNSGALTSGV HTFPAVLQSS GLYSLSSVVT VPSSSLGTQT YICNVNHKPS NTKVDKRVEP KS CDKTH |
-分子 #4: 2C7 Fab light chain
分子 | 名称: 2C7 Fab light chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) |
分子量 | 理論値: 25.605615 KDa |
組換発現 | 生物種: Mus musculus (ハツカネズミ) |
配列 | 文字列: MGWSCIILFL VATARTGVHS DIQMTQSPSS LSASLGERVS LTCRASQEIS GYLSWLQQKP DGTIQRLIYA AFSLDSGVPK RFSGSRSGS DYSLTISSLE SEDLAHYYCL QYASYPCTFG GGTKLEIKRT VAAPSVFIFP PSDEQLKSGT ASVVCLLNNF Y PREAKVQW ...文字列: MGWSCIILFL VATARTGVHS DIQMTQSPSS LSASLGERVS LTCRASQEIS GYLSWLQQKP DGTIQRLIYA AFSLDSGVPK RFSGSRSGS DYSLTISSLE SEDLAHYYCL QYASYPCTFG GGTKLEIKRT VAAPSVFIFP PSDEQLKSGT ASVVCLLNNF Y PREAKVQW KVDNALQSGN SQESVTEQDS KDSTYSLSST LTLSKADYEK HKVYACEVTH QGLSSPVTKS FNRGEC |
-分子 #5: CHOLESTEROL
分子 | 名称: CHOLESTEROL / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 2 / 式: CLR |
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分子量 | 理論値: 386.654 Da |
Chemical component information | ChemComp-CLR: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 10 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 293 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
詳細 | Added 8mM ATP, Magnesium and 0.2mg/ml cholesterol in ethanol |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4900 / 平均露光時間: 1.8 sec. / 平均電子線量: 60.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |