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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3308 | |||||||||
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タイトル | HIV-1 cleaved wild type JR-FL EnvdCT trimer in complex with PGT151 at 4.19 A resolution | |||||||||
マップデータ | Wild type JR-FL EnvdCT in complex with PGT151, with Fab constant region and detergent micelle masked out. | |||||||||
試料 |
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キーワード | HIV-1 / Env / PGT151 / broadly neutralizing antibody (中和抗体) | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 positive regulation of plasma membrane raft polarization / positive regulation of receptor clustering / positive regulation of establishment of T cell polarity / virus-mediated perturbation of host defense response / host cell endosome membrane / clathrin-dependent endocytosis of virus by host cell / viral protein processing / fusion of virus membrane with host plasma membrane / fusion of virus membrane with host endosome membrane / エンベロープ (ウイルス) ...positive regulation of plasma membrane raft polarization / positive regulation of receptor clustering / positive regulation of establishment of T cell polarity / virus-mediated perturbation of host defense response / host cell endosome membrane / clathrin-dependent endocytosis of virus by host cell / viral protein processing / fusion of virus membrane with host plasma membrane / fusion of virus membrane with host endosome membrane / エンベロープ (ウイルス) / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / virion membrane / structural molecule activity / identical protein binding / 細胞膜 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Human Immunodeficiency Virus-1 (ヒト免疫不全ウイルス) / Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.19 Å | |||||||||
データ登録者 | Lee JH / Ozorowski G / Ward AB | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2016 タイトル: Cryo-EM structure of a native, fully glycosylated, cleaved HIV-1 envelope trimer. 著者: Jeong Hyun Lee / Gabriel Ozorowski / Andrew B Ward / 要旨: The envelope glycoprotein trimer (Env) on the surface of HIV-1 recognizes CD4(+) T cells and mediates viral entry. During this process, Env undergoes substantial conformational rearrangements, making ...The envelope glycoprotein trimer (Env) on the surface of HIV-1 recognizes CD4(+) T cells and mediates viral entry. During this process, Env undergoes substantial conformational rearrangements, making it difficult to study in its native state. Soluble stabilized trimers have provided valuable insights into the Env structure, but they lack the hydrophobic membrane proximal external region (MPER, an important target of broadly neutralizing antibodies), the transmembrane domain, and the cytoplasmic tail. Here we present (i) a cryogenic electron microscopy (cryo-EM) structure of a clade B virus Env, which lacks only the cytoplasmic tail and is stabilized by the broadly neutralizing antibody PGT151, at a resolution of 4.2 angstroms and (ii) a reconstruction of this form of Env in complex with PGT151 and MPER-targeting antibody 10E8 at a resolution of 8.8 angstroms. These structures provide new insights into the wild-type Env structure. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_3308.map.gz | 59.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-3308-v30.xml emd-3308.xml | 17.9 KB 17.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_3308.png | 904.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3308 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3308 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3308.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 62.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Wild type JR-FL EnvdCT in complex with PGT151, with Fab constant region and detergent micelle masked out. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.31 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Cleaved JR-FL EnvdCT in complex with PGT151 Fab
全体 | 名称: Cleaved JR-FL EnvdCT in complex with PGT151 Fab |
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要素 |
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-超分子 #1000: Cleaved JR-FL EnvdCT in complex with PGT151 Fab
超分子 | 名称: Cleaved JR-FL EnvdCT in complex with PGT151 Fab / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Two PGT151 Fabs bind one Env trimer / Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 535 KDa |
-分子 #1: HIV-1 Envelope glycoprotein
分子 | 名称: HIV-1 Envelope glycoprotein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: HIV-1 Env 詳細: wild-type JR-FL Env trimer with the cytoplasmic tail truncated コピー数: 1 / 集合状態: Trimer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Human Immunodeficiency Virus-1 (ヒト免疫不全ウイルス) 株: JR-FL / 別称: HIV-1 |
分子量 | 理論値: 435 KDa |
組換発現 | 生物種: Mammalian (哺乳類) / 組換株: Human / 組換細胞: HEK293F / 組換プラスミド: phCMV3 |
-分子 #2: Immunoglobulin G PGT151
分子 | 名称: Immunoglobulin G PGT151 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: IgG PGT151 / 詳細: PGT151 cleaved into Fab / コピー数: 2 / 集合状態: Heterodimer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human |
分子量 | 理論値: 50 KDa |
組換発現 | 生物種: Mammalian (哺乳類) / 組換株: Human / 組換細胞: HEK293F |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 3.5 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 詳細: 50 mM Tris pH 7.4, 150 mM NaCl, 0.1% DDM, 0.03 mg/mL sodium deoxycholate |
グリッド | 詳細: 400 mesh C-Flat, CF-2/2-4C, plasma cleaned for 5 seconds |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 装置: HOMEMADE PLUNGER 詳細: Samples were treated with biobeads prior to freezing 手法: Grids were manually plunged at RT. |
-電子顕微鏡法 #1
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 22500 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 22500 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
Microscopy ID | 1 |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective astigmatism corrected at 22,500x magnification. |
日付 | 2014年11月8日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 5.0 µm / 実像数: 8759 / 平均電子線量: 35.1 e/Å2 詳細: Each full dose image is an aligned stack of frames recorded each using a dose of ~10 e-/Angstrom^2/sec. |
Tilt angle min | 0 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-電子顕微鏡法 #2
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 22500 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 倍率(公称値): 22500 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
Microscopy ID | 2 |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective astigmatism corrected at 22,500x magnification. |
日付 | 2014年10月24日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 5.0 µm / 実像数: 8759 / 平均電子線量: 33.7 e/Å2 詳細: Each full dose image is an aligned stack of frames recorded each using a dose of ~10 e-/Angstrom^2/sec. |
Tilt angle min | 0 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-電子顕微鏡法 #3
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 22500 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 22500 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
Microscopy ID | 3 |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective astigmatism corrected at 22,500x magnification. |
日付 | 2014年9月11日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 5.0 µm / 実像数: 8759 / 平均電子線量: 32.2 e/Å2 詳細: Each full dose image is an aligned stack of frames recorded each using a dose of ~10 e-/Angstrom^2/sec. |
Tilt angle min | 0 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-電子顕微鏡法 #4
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 22500 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 倍率(公称値): 22500 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
Microscopy ID | 4 |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective astigmatism corrected at 22,500x magnification. |
日付 | 2015年2月27日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 5.0 µm / 実像数: 8759 / 平均電子線量: 32.4 e/Å2 詳細: Each full dose image is an aligned stack of frames recorded each using a dose of ~10 e-/Angstrom^2/sec. |
Tilt angle min | 0 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: Each micrograph |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.19 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: Relion / 使用した粒子像数: 201386 |
詳細 | At the end of refinement which gave the 4.3 Angstrom resolution structure, a mask was applied to exclude the flexible micelle and Fab constant regions, following which the model refined for an additional 3 iterations (until convergence). |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: Chain - #0 - Chain ID: B / Chain - #1 - Chain ID: G |
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ソフトウェア | 名称: Chimera |
詳細 | The trimer was used as an initial model for model building and refinement. |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
得られたモデル | PDB-5fuu: |