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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 9j1u
タイトルStructural basis of the bifunctionality of M. salinexigens ZYF650T glucosylglycerol phosphorylase in glucosylglycerol catabolism
要素Sucrose phosphorylase
キーワードSTRUCTURAL PROTEIN / Glucosylglycerol / phosphorylase-GH13_18 / structure-double displacement mechanism
機能・相同性
機能・相同性情報


sucrose phosphorylase / sucrose phosphorylase activity / carbohydrate metabolic process
類似検索 - 分子機能
Sucrose phosphorylase / Oligo-1,6-glucosidase, domain 2 / Alpha amylase, catalytic domain / Glycosyl hydrolase, family 13, catalytic domain / Alpha-amylase domain / Glycoside hydrolase superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
1-O-phosphono-alpha-D-glucopyranose / alpha-D-glucopyranose / Sucrose phosphorylase
類似検索 - 構成要素
生物種Marinobacter salinexigens (バクテリア)
手法X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 2.72 Å
データ登録者Lu, D. / Ma, H.L.
資金援助 中国, 1件
組織認可番号
National Natural Science Foundation of China (NSFC)32271358 中国
引用ジャーナル: J Biol Chem / : 2025
タイトル: Structural basis of the bifunctionality of Marinobacter salinexigens ZYF650 glucosylglycerol phosphorylase in glucosylglycerol catabolism.
著者: Di Lu / Keke Zhang / Chen Cheng / Danni Wu / Lei Yin / Quan Luo / Meiyun Shi / Honglei Ma / Xuefeng Lu /
要旨: 2-O-α-Glucosylglycerol (GG) is a natural heteroside synthesized by many cyanobacteria and a few heterotrophic bacteria under salt stress conditions. Bacteria produce GG in response to stimuli and ...2-O-α-Glucosylglycerol (GG) is a natural heteroside synthesized by many cyanobacteria and a few heterotrophic bacteria under salt stress conditions. Bacteria produce GG in response to stimuli and degrade it once the stimulus diminishes. Heterotrophic bacteria utilize GG phosphorylase (GGP), a member of the GH13_18 family, via a two-step process consisting of phosphorolysis and hydrolysis for GG catabolism. However, the precise mechanism by which GGP degrades GG remains elusive. We determined the 3D structure of a recently identified GGP (MsGGP) of the deep-sea bacterium Marinobacter salinexigens ZYF650, in complex with glucose and glycerol, α-d-glucose-1-phosphate (αGlc1-P), and orthophosphate (inorganic phosphate) at resolutions of 2.5, 2.7, and 2.7 Å, respectively. Notably, the first αGlc1-P complex structure in the GH13_18 family, the complex of MsGGP and αGlc1-P, validates that GGP catalyzes GG decomposition through consecutive phosphorolysis and hydrolysis. In addition, the structure reveals the mechanism of high stereoselectivity on αGlc1-P. Glu231 and Asp190 were identified as the catalytic residues. Interestingly, these structures closely resemble each other, indicating minimal conformational changes upon binding end-product glucose and glycerol, or the intermediate αGlc1-P. The structures also indicate that the substrates may follow a specific trajectory and a precise order toward the active center in close proximity and in a geometrically favorable orientation for catalysis in a double displacement mechanism.
履歴
登録2024年8月5日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBC
改定 1.02025年9月10日Provider: repository / タイプ: Initial release

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
F: Sucrose phosphorylase
B: Sucrose phosphorylase
C: Sucrose phosphorylase
D: Sucrose phosphorylase
E: Sucrose phosphorylase
A: Sucrose phosphorylase
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)331,10921
ポリマ-329,4236
非ポリマー1,68615
2,414134
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: gel filtration
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
Buried area18170 Å2
ΔGint-69 kcal/mol
Surface area97220 Å2
手法PISA
単位格子
Length a, b, c (Å)111.830, 178.500, 180.240
Angle α, β, γ (deg.)90.00, 90.00, 90.00
Int Tables number19
Space group name H-MP212121

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要素

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タンパク質 , 1種, 6分子 FBCDEA

#1: タンパク質
Sucrose phosphorylase / Glucosylglycerol phosphorylase


分子量: 54903.852 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Marinobacter salinexigens (バクテリア)
遺伝子: gtfA, FWJ25_14990 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A5B0VBK8, sucrose phosphorylase

-
, 2種, 4分子

#2: 糖 ChemComp-GLC / alpha-D-glucopyranose / alpha-D-glucose / D-glucose / glucose


タイプ: D-saccharide, alpha linking / 分子量: 180.156 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : C6H12O6
識別子タイププログラム
DGlcpaCONDENSED IUPAC CARBOHYDRATE SYMBOLGMML 1.0
a-D-glucopyranoseCOMMON NAMEGMML 1.0
a-D-GlcpIUPAC CARBOHYDRATE SYMBOLPDB-CARE 1.0
GlcSNFG CARBOHYDRATE SYMBOLGMML 1.0
#5: 糖 ChemComp-G1P / 1-O-phosphono-alpha-D-glucopyranose / ALPHA-D-GLUCOSE-1-PHOSPHATE / 1-O-phosphono-alpha-D-glucose / 1-O-phosphono-D-glucose / 1-O-phosphono-glucose


タイプ: D-saccharide / 分子量: 260.136 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : C6H13O9P / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
識別子タイププログラム
a-D-Glcp1PO3IUPAC CARBOHYDRATE SYMBOLPDB-CARE 1.0

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非ポリマー , 3種, 145分子

#3: 化合物
ChemComp-GOL / GLYCEROL / GLYCERIN / PROPANE-1,2,3-TRIOL


分子量: 92.094 Da / 分子数: 8 / 由来タイプ: 合成 / : C3H8O3
#4: 化合物 ChemComp-NA / SODIUM ION


分子量: 22.990 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 合成 / : Na
#6: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 134 / 由来タイプ: 天然 / : H2O

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかY
Has protein modificationN

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実験情報

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実験

実験手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1

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試料調製

結晶マシュー密度: 2.73 Å3/Da / 溶媒含有率: 54.95 %
結晶化温度: 289 K / 手法: 蒸気拡散法
詳細: 0.1 M Sodium chloride, 0.1 M BIS-TRIS propane pH 9.0, 25% Polyethylene glycol 1,500

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データ収集

回折平均測定温度: 100 K / Serial crystal experiment: N
放射光源由来: シンクロトロン / サイト: SSRF / ビームライン: BL10U2 / 波長: 0.987 Å
検出器タイプ: DECTRIS EIGER X 16M / 検出器: PIXEL / 日付: 2024年6月3日
放射プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray
放射波長波長: 0.987 Å / 相対比: 1
反射解像度: 2.72→31.11 Å / Num. obs: 96759 / % possible obs: 99.3 % / 冗長度: 5.7 % / Rmerge(I) obs: 0.074 / Rpim(I) all: 0.051 / Rrim(I) all: 0.096 / Net I/σ(I): 14.7
反射 シェル解像度: 2.72→2.79 Å / Rmerge(I) obs: 0.747 / Num. unique obs: 6676 / Rpim(I) all: 0.626 / Rrim(I) all: 0.98

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解析

ソフトウェア
名称バージョン分類
PHENIX(1.17.1_3660: ???)精密化
HKL-30007.21データ削減
HKL-30007.21データスケーリング
PHASER2.7.0位相決定
PDB_EXTRACT3.27データ抽出
精密化構造決定の手法: 分子置換
開始モデル: 7XDQ
解像度: 2.72→21.04 Å / SU ML: 0.43 / 交差検証法: THROUGHOUT / σ(F): 1.34 / 位相誤差: 30.61 / 立体化学のターゲット値: ML
Rfactor反射数%反射Selection details
Rfree0.2539 4609 4.78 %RANDOM
Rwork0.2144 ---
obs0.2163 96434 99.27 %-
溶媒の処理減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.11 Å / 溶媒モデル: FLAT BULK SOLVENT MODEL
精密化ステップサイクル: LAST / 解像度: 2.72→21.04 Å
タンパク質核酸リガンド溶媒全体
原子数23130 0 107 134 23371
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal
X-RAY DIFFRACTIONf_bond_d0.00723803
X-RAY DIFFRACTIONf_angle_d1.02732343
X-RAY DIFFRACTIONf_dihedral_angle_d17.7333192
X-RAY DIFFRACTIONf_chiral_restr0.0553530
X-RAY DIFFRACTIONf_plane_restr0.0074218
LS精密化 シェル
解像度 (Å)Rfactor RfreeNum. reflection RfreeRfactor RworkNum. reflection RworkRefine-ID% reflection obs (%)
2.72-2.750.44891490.3972811X-RAY DIFFRACTION92
2.75-2.780.42141210.37972889X-RAY DIFFRACTION95
2.78-2.820.41921500.37432993X-RAY DIFFRACTION98
2.82-2.850.42921380.35493032X-RAY DIFFRACTION100
2.85-2.890.39141810.34183018X-RAY DIFFRACTION100
2.89-2.930.34611640.33093028X-RAY DIFFRACTION100
2.93-2.970.31261470.32193055X-RAY DIFFRACTION100
2.97-3.020.32891490.31913099X-RAY DIFFRACTION100
3.02-3.060.3321620.29832971X-RAY DIFFRACTION100
3.06-3.110.3021910.29913048X-RAY DIFFRACTION100
3.11-3.170.38451480.30363057X-RAY DIFFRACTION100
3.17-3.220.36081230.27993090X-RAY DIFFRACTION100
3.22-3.290.31771400.28223076X-RAY DIFFRACTION100
3.29-3.350.28681570.25013040X-RAY DIFFRACTION100
3.35-3.420.26771620.24253068X-RAY DIFFRACTION100
3.42-3.50.3011710.24343047X-RAY DIFFRACTION100
3.5-3.590.24261440.23313079X-RAY DIFFRACTION100
3.59-3.690.31631580.23823051X-RAY DIFFRACTION100
3.69-3.80.26711530.22473096X-RAY DIFFRACTION100
3.8-3.920.21811290.20633093X-RAY DIFFRACTION100
3.92-4.060.2381570.20223077X-RAY DIFFRACTION100
4.06-4.220.21621220.18433101X-RAY DIFFRACTION100
4.22-4.410.20651600.16513095X-RAY DIFFRACTION100
4.41-4.640.22471450.16883109X-RAY DIFFRACTION100
4.64-4.920.2481600.16583092X-RAY DIFFRACTION100
4.92-5.30.18891670.15743112X-RAY DIFFRACTION100
5.3-5.820.22321560.17623119X-RAY DIFFRACTION100
5.82-6.640.22541690.17133136X-RAY DIFFRACTION100
6.64-8.280.20881750.17943151X-RAY DIFFRACTION100
8.28-21.040.17611610.16123192X-RAY DIFFRACTION97
精密化 TLS

手法: refined / Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION

IDL112)L122)L132)L222)L232)L332)S11 (Å °)S12 (Å °)S13 (Å °)S21 (Å °)S22 (Å °)S23 (Å °)S31 (Å °)S32 (Å °)S33 (Å °)T112)T122)T132)T222)T232)T332)Origin x (Å)Origin y (Å)Origin z (Å)
11.76560.4367-0.65970.8323-0.6232.5152-0.0215-0.3461-0.34440.1112-0.0059-0.08120.52740.48040.02420.83790.1841-0.02370.4204-0.00020.5281-21.2252-2.2383-15.4109
21.6240.9557-0.94842.3419-0.48292.0090.0387-0.153-0.11350.2489-0.0325-0.34190.31370.6881-0.0660.55470.1547-0.03530.6083-0.01360.4768-8.22294.9676-24.57
31.27790.65420.17930.366-0.13511.58520.0030.276-0.02790.2033-0.1465-0.01970.58830.1630.10050.43070.08-0.01360.3710.00980.5044-26.48773.5239-36.287
41.57090.4543-0.17921.7216-0.97272.1720.1011-0.16920.13820.1835-0.0236-0.2361-0.08740.194-0.10170.373-0.0052-0.03740.3587-0.03810.5262-33.747214.6208-24.2987
50.1508-0.1958-0.37990.50141.15515.8346-0.21010.36450.17150.26110.02240.49021.4005-0.669-0.02720.378-0.16830.00390.61730.01430.7055-50.15581.6391-35.4536
62.2220.7336-0.03510.35280.29682.1482-0.15290.3171-0.2538-0.15550.17810.06360.4960.1754-0.02410.81390.08010.03210.334-0.02780.547-26.2358-1.398-77.7723
71.6213-0.8519-0.87422.17050.98622.81370.01290.2663-0.1948-0.1944-0.17830.15560.2868-0.70530.06080.62-0.1378-0.05310.5379-0.04540.4955-51.45725.5385-71.4931
82.0536-0.28-0.30890.0958-0.09221.58780.1788-0.1576-0.1733-0.1378-0.1690.12840.6292-0.0140.0320.58590.00930.01480.3072-0.010.4516-32.79144.1766-57.1642
92.12940.1195-0.59061.65190.30672.62310.0722-0.15510.0735-0.3082-0.0295-0.0990.33960.5384-0.03350.38770.09350.01640.4568-0.01390.4704-16.218810.8347-63.246
100.7-0.2724-0.02292.0351-0.57131.14910.04470.22430.0001-0.5082-0.0594-0.654-0.22260.78620.0560.8535-0.50320.18551.4284-0.14950.77414.778542.8517-65.4519
111.16911.1251-0.49282.2026-0.70252.2093-0.27220.3172-0.7283-0.6210.20990.01780.13420.16650.26730.4232-0.0010.02831.3674-0.17631.00385.695319.5564-55.936
120.7931-0.4597-0.3260.6108-0.16211.2307-0.1138-0.0211-0.4298-0.50590.3335-0.6185-0.0431.00950.14850.628-0.3150.17451.5807-0.15830.832514.303533.512-54.5773
132.09460.2736-0.75541.5231-0.29030.3182-0.0364-0.2177-0.29690.03390.1198-0.1843-0.40090.8174-0.09350.6382-0.41380.04191.1154-0.09860.68813.460947.5636-46.8832
142.67370.5265-0.35621.9659-0.62460.2107-0.16830.1683-0.3091-0.19940.0658-0.0272-0.4930.4933-0.0640.8661-0.44310.02230.7528-0.0070.6614-8.503846.5844-52.6324
152.35790.967-0.0683.1466-0.40381.00760.05490.1207-0.3704-0.18390.09570.3525-0.71370.477-0.09840.9659-0.33110.05840.7531-0.07910.708-10.440246.6752-58.99
161.50180.5642-0.25261.7244-0.31160.081-0.02670.20720.1328-0.18250.09840.0959-0.58930.5256-0.05151.2013-0.62310.12030.9082-0.0720.619-2.659558.0064-61.7995
171.86060.6940.07842.1668-0.36380.084-0.15620.24760.75590.019-0.0420.2918-0.61440.4125-0.01761.6289-0.56630.11230.87350.03660.8337-6.000873.14-52.275
180.3110.1828-0.23150.49930.60981.7830.0168-0.2373-0.1344-0.181-0.33260.454-0.3809-0.86880.23440.50890.29720.02451.129-0.03240.8357-70.290241.606-23.7802
191.5456-0.9567-0.98511.15860.54573.773-0.1366-0.1355-0.32730.2262-0.03770.26640.1157-0.21960.08990.5420.03130.05320.71080.01520.74-61.502519.1207-34.9496
200.70830.1422-0.23351.79230.39051.3695-0.1412-0.0324-0.0372-0.20560.00430.3016-0.2676-0.7030.08010.54580.2822-0.01240.7755-0.00890.5407-64.301640.7567-38.9449
213.30630.4628-1.04292.51921.12883.590.0585-0.1256-0.2103-0.1473-0.0040.0182-0.2111-0.1210.09460.53130.13120.0120.4727-0.07120.5856-47.180946.1419-36.7066
221.27120.329-0.73260.99470.70571.68060.0825-0.2657-0.087-0.3017-0.003-0.1752-0.5335-0.142-0.10960.68260.25170.00020.50670.04860.566-49.784350.1775-24.4687
232.8792-0.04350.21542.88650.42630.5371-0.0579-0.11410.576-0.40460.0895-0.1327-1.1797-0.4587-0.10411.55970.34350.01370.61680.0020.6938-50.974170.0582-38.6429
240.7003-0.46980.27131.8355-0.14541.6438-0.0491-0.26770.30780.5616-0.0026-0.0464-0.79450.4840.05381.0062-0.59720.08320.9538-0.14580.7256-4.196861.2741-8.2868
251.10080.06380.5310.96731.68043.06570.1205-0.17450.42840.0868-0.12120.2036-0.7953-0.35610.1511.2972-0.25610.13820.767-0.13890.8465-24.949969.9622-22.2803
260.22410.02170.52560.580.48431.911-0.00640.03280.1763-0.14660.0232-0.1314-1.64580.4938-0.07940.9169-0.73930.14640.9384-0.08830.8221-5.175459.8743-24.5424
270.61630.2606-0.00361.2891-0.06021.20990.04870.0342-0.03330.0826-0.0463-0.0715-0.18370.5035-0.02330.4428-0.27780.02440.9609-0.04120.6906-4.235138.9184-19.5476
280.5868-0.15040.13551.5656-0.64160.76240.07240.21140.276-0.6504-0.1197-0.0229-0.9133-0.24420.05261.62430.43080.09090.69390.05470.6824-49.16963.2587-70.6725
291.55380.26890.24333.94430.86093.82670.23450.2048-0.0209-0.913-0.1832-0.3993-0.62760.1898-0.05860.85580.16750.12760.44830.03880.5024-42.852844.5229-66.1818
301.1310.5633-0.02872.594-0.03182.27650.06680.2868-0.1202-0.6578-0.18910.1475-0.3236-0.66030.0410.86540.3532-0.0460.6631-0.06060.5532-57.859937.9907-72.8333
精密化 TLSグループ
IDRefine-IDRefine TLS-IDSelection details
1X-RAY DIFFRACTION1chain 'F' and (resid 2 through 117 )
2X-RAY DIFFRACTION2chain 'F' and (resid 118 through 208 )
3X-RAY DIFFRACTION3chain 'F' and (resid 209 through 276 )
4X-RAY DIFFRACTION4chain 'F' and (resid 277 through 408 )
5X-RAY DIFFRACTION5chain 'F' and (resid 409 through 480 )
6X-RAY DIFFRACTION6chain 'B' and (resid 2 through 83 )
7X-RAY DIFFRACTION7chain 'B' and (resid 84 through 182 )
8X-RAY DIFFRACTION8chain 'B' and (resid 183 through 276 )
9X-RAY DIFFRACTION9chain 'B' and (resid 277 through 480 )
10X-RAY DIFFRACTION10chain 'C' and (resid 2 through 117 )
11X-RAY DIFFRACTION11chain 'C' and (resid 118 through 146 )
12X-RAY DIFFRACTION12chain 'C' and (resid 147 through 208 )
13X-RAY DIFFRACTION13chain 'C' and (resid 209 through 276 )
14X-RAY DIFFRACTION14chain 'C' and (resid 277 through 315 )
15X-RAY DIFFRACTION15chain 'C' and (resid 316 through 361 )
16X-RAY DIFFRACTION16chain 'C' and (resid 362 through 447 )
17X-RAY DIFFRACTION17chain 'C' and (resid 448 through 480 )
18X-RAY DIFFRACTION18chain 'D' and (resid 2 through 117 )
19X-RAY DIFFRACTION19chain 'D' and (resid 118 through 146 )
20X-RAY DIFFRACTION20chain 'D' and (resid 147 through 276 )
21X-RAY DIFFRACTION21chain 'D' and (resid 277 through 315 )
22X-RAY DIFFRACTION22chain 'D' and (resid 316 through 423 )
23X-RAY DIFFRACTION23chain 'D' and (resid 424 through 480 )
24X-RAY DIFFRACTION24chain 'E' and (resid 2 through 117 )
25X-RAY DIFFRACTION25chain 'E' and (resid 118 through 146 )
26X-RAY DIFFRACTION26chain 'E' and (resid 147 through 276 )
27X-RAY DIFFRACTION27chain 'E' and (resid 277 through 480 )
28X-RAY DIFFRACTION28chain 'A' and (resid 2 through 276 )
29X-RAY DIFFRACTION29chain 'A' and (resid 277 through 361 )
30X-RAY DIFFRACTION30chain 'A' and (resid 362 through 480 )

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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