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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-31214 | |||||||||
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| タイトル | Human Mediator in a Tail-extended conformation (MED-E) | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Yin X / Li J / Wu Z / Liu W / Xu Y | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2021タイトル: Structures of the human Mediator and Mediator-bound preinitiation complex. 著者: Xizi Chen / Xiaotong Yin / Jiabei Li / Zihan Wu / Yilun Qi / Xinxin Wang / Weida Liu / Yanhui Xu / ![]() 要旨: The 1.3-megadalton transcription factor IID (TFIID) is required for preinitiation complex (PIC) assembly and RNA polymerase II (Pol II)-mediated transcription initiation on almost all genes. The 26- ...The 1.3-megadalton transcription factor IID (TFIID) is required for preinitiation complex (PIC) assembly and RNA polymerase II (Pol II)-mediated transcription initiation on almost all genes. The 26-subunit Mediator stimulates transcription and cyclin-dependent kinase 7 (CDK7)-mediated phosphorylation of the Pol II C-terminal domain (CTD). We determined the structures of human Mediator in the Tail module-extended (at near-atomic resolution) and Tail-bent conformations and structures of TFIID-based PIC-Mediator (76 polypeptides, ~4.1 megadaltons) in four distinct conformations. PIC-Mediator assembly induces concerted reorganization (Head-tilting and Middle-down) of Mediator and creates a Head-Middle sandwich, which stabilizes two CTD segments and brings CTD to CDK7 for phosphorylation; this suggests a CTD-gating mechanism favorable for phosphorylation. The TFIID-based PIC architecture modulates Mediator organization and TFIIH stabilization, underscoring the importance of TFIID in orchestrating PIC-Mediator assembly. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
|---|---|
| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_31214.map.gz | 262.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-31214-v30.xml emd-31214.xml | 16.3 KB 16.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| 画像 | emd_31214.png | 101.3 KB | ||
| その他 | emd_31214_additional_1.map.gz emd_31214_additional_2.map.gz | 263.1 MB 263.5 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-31214 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-31214 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_31214_validation.pdf.gz | 359.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_31214_full_validation.pdf.gz | 359.4 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_31214_validation.xml.gz | 8.1 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-31214 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-31214 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_31214.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 512 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.06 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: #1
| ファイル | emd_31214_additional_1.map | ||||||||||||
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| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
-追加マップ: #2
| ファイル | emd_31214_additional_2.map | ||||||||||||
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| 投影像・断面図 |
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| 密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Structure of the human Mediator complex
| 全体 | 名称: Structure of the human Mediator complex |
|---|---|
| 要素 |
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-超分子 #1: Structure of the human Mediator complex
| 超分子 | 名称: Structure of the human Mediator complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#27 |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
| 組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: Expi293 |
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 緩衝液 | pH: 8 |
|---|---|
| グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY |
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
| 最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 46190 |
|---|---|
| 初期 角度割当 | タイプ: OTHER |
| 最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
-原子モデル構築 1
| 精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
|---|
ムービー
コントローラー
万見について



Homo sapiens (ヒト)
データ登録者
引用
UCSF Chimera























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