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- PDB-6thn: Multiple Genomic RNA-Coat Protein Contacts Play Vital Roles in th... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 6thn
タイトルMultiple Genomic RNA-Coat Protein Contacts Play Vital Roles in the Assembly of Infectious Enterovirus-E symmetry expansion+2fold focused classification
要素
  • (Genome polyprotein) x 4
  • RNA Peak 9 Bernoulli Plot
キーワードVIRUS / BEV1 / enterovirus / picornavirus / RNA
機能・相同性
機能・相同性情報


symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of RIG-I activity / picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / ribonucleoside triphosphate phosphatase activity / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / endocytosis involved in viral entry into host cell / nucleoside-triphosphate phosphatase ...symbiont-mediated suppression of host cytoplasmic pattern recognition receptor signaling pathway via inhibition of RIG-I activity / picornain 2A / symbiont-mediated suppression of host mRNA export from nucleus / ribonucleoside triphosphate phosphatase activity / symbiont genome entry into host cell via pore formation in plasma membrane / picornain 3C / T=pseudo3 icosahedral viral capsid / host cell cytoplasmic vesicle membrane / endocytosis involved in viral entry into host cell / nucleoside-triphosphate phosphatase / protein complex oligomerization / monoatomic ion channel activity / symbiont-mediated suppression of host gene expression / DNA replication / RNA helicase activity / induction by virus of host autophagy / RNA-directed RNA polymerase / viral RNA genome replication / cysteine-type endopeptidase activity / RNA-dependent RNA polymerase activity / virus-mediated perturbation of host defense response / DNA-templated transcription / host cell nucleus / virion attachment to host cell / structural molecule activity / proteolysis / RNA binding / ATP binding / membrane / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
Helicase/polymerase/peptidase polyprotein, Calicivirus-type / Poliovirus 3A protein-like / Poliovirus 3A protein like / Picornavirus 2B protein / Poliovirus core protein 3a, soluble domain / Picornavirus 2B protein / Peptidase C3, picornavirus core protein 2A / Picornavirus core protein 2A / Picornavirus coat protein VP4 / Picornavirus coat protein (VP4) ...Helicase/polymerase/peptidase polyprotein, Calicivirus-type / Poliovirus 3A protein-like / Poliovirus 3A protein like / Picornavirus 2B protein / Poliovirus core protein 3a, soluble domain / Picornavirus 2B protein / Peptidase C3, picornavirus core protein 2A / Picornavirus core protein 2A / Picornavirus coat protein VP4 / Picornavirus coat protein (VP4) / Picornavirales 3C/3C-like protease domain / Picornavirales 3C/3C-like protease domain profile. / Peptidase C3A/C3B, picornaviral / 3C cysteine protease (picornain 3C) / Picornavirus capsid / picornavirus capsid protein / Helicase, superfamily 3, single-stranded RNA virus / Superfamily 3 helicase of positive ssRNA viruses domain profile. / Helicase, superfamily 3, single-stranded DNA/RNA virus / RNA helicase / Picornavirus/Calicivirus coat protein / Viral coat protein subunit / RNA-directed RNA polymerase, C-terminal domain / Viral RNA-dependent RNA polymerase / Reverse transcriptase/Diguanylate cyclase domain / RNA-directed RNA polymerase, catalytic domain / RdRp of positive ssRNA viruses catalytic domain profile. / Peptidase S1, PA clan, chymotrypsin-like fold / Peptidase S1, PA clan / DNA/RNA polymerase superfamily / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
MYRISTIC ACID / RNA / RNA (> 10) / Genome polyprotein
類似検索 - 構成要素
生物種Bovine enterovirus
Bovine enterovirus strain VG-5-27 (エンテロウイルス)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.6 Å
データ登録者Chandler-Bostock, R. / Mata, C.P. / Bingham, R. / Dykeman, E.J. / Meng, B. / Tuthill, T.J. / Rowlands, D.J. / Ranson, N.A. / Twarock, R. / Stockley, P.G.
資金援助 英国, 7件
組織認可番号
Wellcome Trust110145 英国
Wellcome Trust110146 英国
Wellcome Trust089311/Z/09/Z 英国
Wellcome Trust090932/Z/09/Z 英国
Wellcome Trust106692 英国
Royal SocietyLT130088 英国
Royal SocietyRSWF/R1/180009 英国
引用ジャーナル: PLoS Pathog / : 2020
タイトル: Assembly of infectious enteroviruses depends on multiple, conserved genomic RNA-coat protein contacts.
著者: Rebecca Chandler-Bostock / Carlos P Mata / Richard J Bingham / Eric C Dykeman / Bo Meng / Tobias J Tuthill / David J Rowlands / Neil A Ranson / Reidun Twarock / Peter G Stockley /
要旨: Picornaviruses are important viral pathogens, but despite extensive study, the assembly process of their infectious virions is still incompletely understood, preventing the development of anti-viral ...Picornaviruses are important viral pathogens, but despite extensive study, the assembly process of their infectious virions is still incompletely understood, preventing the development of anti-viral strategies targeting this essential part of the life cycle. We report the identification, via RNA SELEX and bioinformatics, of multiple RNA sites across the genome of a typical enterovirus, enterovirus-E (EV-E), that each have affinity for the cognate viral capsid protein (CP) capsomer. Many of these sites are evolutionarily conserved across known EV-E variants, suggesting they play essential functional roles. Cryo-electron microscopy was used to reconstruct the EV-E particle at ~2.2 Å resolution, revealing extensive density for the genomic RNA. Relaxing the imposed symmetry within the reconstructed particles reveals multiple RNA-CP contacts, a first for any picornavirus. Conservative mutagenesis of the individual RNA-contacting amino acid side chains in EV-E, many of which are conserved across the enterovirus family including poliovirus, is lethal but does not interfere with replication or translation. Anti-EV-E and anti-poliovirus aptamers share sequence similarities with sites distributed across the poliovirus genome. These data are consistent with the hypothesis that these RNA-CP contacts are RNA Packaging Signals (PSs) that play vital roles in assembly and suggest that the RNA PSs are evolutionarily conserved between pathogens within the family, augmenting the current protein-only assembly paradigm for this family of viruses.
履歴
登録2019年11月20日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02020年12月9日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12021年6月23日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year / _citation_author.identifier_ORCID / _citation_author.name
改定 1.22024年5月22日Group: Data collection / Database references ...Data collection / Database references / Derived calculations / Refinement description
カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond ...chem_comp_atom / chem_comp_bond / database_2 / em_3d_fitting_list / pdbx_initial_refinement_model / pdbx_struct_oper_list
Item: _database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession ..._database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession / _em_3d_fitting_list.accession_code / _em_3d_fitting_list.initial_refinement_model_id / _em_3d_fitting_list.source_name / _em_3d_fitting_list.type / _pdbx_struct_oper_list.name / _pdbx_struct_oper_list.symmetry_operation / _pdbx_struct_oper_list.type

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構造の表示

ムービー
  • 生物学的単位 - complete icosahedral assembly
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • 生物学的単位 - icosahedral pentamer
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • 生物学的単位 - icosahedral 23 hexamer
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • マップデータ: EMDB-10506
  • Jmolによる作画
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  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-10506
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
1: Genome polyprotein
2: Genome polyprotein
3: Genome polyprotein
4: Genome polyprotein
A: RNA Peak 9 Bernoulli Plot
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)95,0339
ポリマ-94,3845
非ポリマー6494
1,74797
1
1: Genome polyprotein
2: Genome polyprotein
3: Genome polyprotein
4: Genome polyprotein
A: RNA Peak 9 Bernoulli Plot
ヘテロ分子
x 60


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)5,701,975540
ポリマ-5,663,043300
非ポリマー38,932240
3,243180
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
point symmetry operation59
2


  • 登録構造と同一
  • icosahedral asymmetric unit
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
3
1: Genome polyprotein
2: Genome polyprotein
3: Genome polyprotein
4: Genome polyprotein
A: RNA Peak 9 Bernoulli Plot
ヘテロ分子
x 5


  • icosahedral pentamer
  • 475 kDa, 25 ポリマー
分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)475,16545
ポリマ-471,92025
非ポリマー3,24420
27015
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
point symmetry operation4
4
1: Genome polyprotein
2: Genome polyprotein
3: Genome polyprotein
4: Genome polyprotein
A: RNA Peak 9 Bernoulli Plot
ヘテロ分子
x 6


  • icosahedral 23 hexamer
  • 570 kDa, 30 ポリマー
分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)570,19754
ポリマ-566,30430
非ポリマー3,89324
32418
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
point symmetry operation5
5


  • 登録構造と同一(異なる座標系)
  • icosahedral asymmetric unit, std point frame
タイプ名称対称操作
transform to point frame1
対称性点対称性: (シェーンフリース記号: I (正20面体型対称))

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要素

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タンパク質 , 4種, 4分子 1234

#1: タンパク質 Genome polyprotein


分子量: 31280.955 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Bovine enterovirus (strain VG-5-27) (エンテロウイルス)
参照: UniProt: P12915, picornain 2A, nucleoside-triphosphate phosphatase, picornain 3C, RNA-directed RNA polymerase
#2: タンパク質 Genome polyprotein


分子量: 27325.604 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Bovine enterovirus (strain VG-5-27) (エンテロウイルス)
参照: UniProt: P12915, picornain 2A, nucleoside-triphosphate phosphatase, picornain 3C, RNA-directed RNA polymerase
#3: タンパク質 Genome polyprotein


分子量: 26627.221 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Bovine enterovirus (strain VG-5-27) (エンテロウイルス)
参照: UniProt: P12915, picornain 2A, nucleoside-triphosphate phosphatase, picornain 3C, RNA-directed RNA polymerase
#4: タンパク質 Genome polyprotein


分子量: 5619.105 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Bovine enterovirus (strain VG-5-27) (エンテロウイルス)
参照: UniProt: P12915, picornain 2A, nucleoside-triphosphate phosphatase, picornain 3C, RNA-directed RNA polymerase

-
RNA鎖 , 1種, 1分子 A

#5: RNA鎖 RNA Peak 9 Bernoulli Plot


分子量: 3531.162 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然
由来: (天然) Bovine enterovirus strain VG-5-27 (エンテロウイルス)

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非ポリマー , 3種, 101分子

#6: 化合物 ChemComp-MYR / MYRISTIC ACID / ミリスチン酸


分子量: 228.371 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : C14H28O2
#7: 化合物 ChemComp-SO4 / SULFATE ION / 硫酸ジアニオン


分子量: 96.063 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : SO4
#8: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 97 / 由来タイプ: 天然 / : H2O

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Bovine enterovirus strain VG-5-27 / タイプ: VIRUS / Entity ID: #1-#5 / 由来: NATURAL
由来(天然)生物種: Bovine enterovirus strain VG-5-27 (エンテロウイルス)
ウイルスについての詳細中空か: NO / エンベロープを持つか: NO / 単離: STRAIN / タイプ: VIRION
ウイルス殻三角数 (T数): 3
緩衝液pH: 7.4 / 詳細: PBS
緩衝液成分: PBS
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結装置: LEICA EM GP / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 277 K

-
電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: OTHER / 倍率(公称値): 75000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 750 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影平均露光時間: 1 sec. / 電子線照射量: 49.5 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING
フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k)
実像数: 8785

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.15.2_3472: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
2EPU画像取得
4GctfCTF補正
7UCSF Chimeraモデルフィッティング
9RELION3初期オイラー角割当
10RELION3最終オイラー角割当
12RELION33次元再構成
13Coot0.9モデル精密化
CTF補正タイプ: NONE
粒子像の選択選択した粒子像数: 260348
対称性点対称性: I (正20面体型対称)
3次元再構成解像度: 2.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 946982 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築空間: REAL
原子モデル構築PDB-ID: 1BEV
Accession code: 1BEV / Source name: PDB / タイプ: experimental model
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.01391740
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d1.006534060
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d4.503231600
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.06558860
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.00769240

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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