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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4v5h | |||||||||
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タイトル | E.Coli 70s Ribosome Stalled During Translation Of Tnac Leader Peptide. | |||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / RIBOSOMAL PROTEIN / RIBONUCLEOPROTEIN / NUCLEOTIDE-BINDING / PROTEIN BIOSYNTHESIS / TRANSLATION / ZINC-FINGER / TNAC / 70S RIBOSOME / STALLING | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis ...stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / four-way junction DNA binding / translational termination / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / positive regulation of RNA splicing / transcription elongation factor complex / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA endonuclease activity / response to reactive oxygen species / transcription antitermination / regulation of cell growth / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome biogenesis / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / molecular adaptor activity / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ESCHERICHIA COLI (大腸菌) synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Seidelt, B. / Innis, C.A. / Wilson, D.N. / Gartmann, M. / Armache, J. / Villa, E. / Trabuco, L.G. / Becker, T. / Mielke, T. / Schulten, K. ...Seidelt, B. / Innis, C.A. / Wilson, D.N. / Gartmann, M. / Armache, J. / Villa, E. / Trabuco, L.G. / Becker, T. / Mielke, T. / Schulten, K. / Steitz, T.A. / Beckmann, R. | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2009 タイトル: Structural insight into nascent polypeptide chain-mediated translational stalling. 著者: Birgit Seidelt / C Axel Innis / Daniel N Wilson / Marco Gartmann / Jean-Paul Armache / Elizabeth Villa / Leonardo G Trabuco / Thomas Becker / Thorsten Mielke / Klaus Schulten / Thomas A ...著者: Birgit Seidelt / C Axel Innis / Daniel N Wilson / Marco Gartmann / Jean-Paul Armache / Elizabeth Villa / Leonardo G Trabuco / Thomas Becker / Thorsten Mielke / Klaus Schulten / Thomas A Steitz / Roland Beckmann / 要旨: Expression of the Escherichia coli tryptophanase operon depends on ribosome stalling during translation of the upstream TnaC leader peptide, a process for which interactions between the TnaC nascent ...Expression of the Escherichia coli tryptophanase operon depends on ribosome stalling during translation of the upstream TnaC leader peptide, a process for which interactions between the TnaC nascent chain and the ribosomal exit tunnel are critical. We determined a 5.8 angstrom-resolution cryo-electron microscopy and single-particle reconstruction of a ribosome stalled during translation of the tnaC leader gene. The nascent chain was extended within the exit tunnel, making contacts with ribosomal components at distinct sites. Upon stalling, two conserved residues within the peptidyltransferase center adopted conformations that preclude binding of release factors. We propose a model whereby interactions within the tunnel are relayed to the peptidyltransferase center to inhibit translation. Moreover, we show that nascent chains adopt distinct conformations within the ribosomal exit tunnel. | |||||||||
履歴 |
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Remark 700 | SHEET DETERMINATION METHOD: DSSP THE SHEETS PRESENTED AS "QA" IN EACH CHAIN ON SHEET RECORDS BELOW ... SHEET DETERMINATION METHOD: DSSP THE SHEETS PRESENTED AS "QA" IN EACH CHAIN ON SHEET RECORDS BELOW IS ACTUALLY AN 5-STRANDED BARREL THIS IS REPRESENTED BY A 6-STRANDED SHEET IN WHICH THE FIRST AND LAST STRANDS ARE IDENTICAL. THE SHEET STRUCTURE OF THIS MOLECULE IS BIFURCATED. IN ORDER TO REPRESENT THIS FEATURE IN THE SHEET RECORDS BELOW, TWO SHEETS ARE DEFINED. |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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PDBx/mmCIF形式 | 4v5h.cif.gz | 3.6 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb4v5h.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 4v5h.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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文書・要旨 | 4v5h_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 4v5h_full_validation.pdf.gz | 5.8 MB | 表示 | |
XML形式データ | 4v5h_validation.xml.gz | 670.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 4v5h_validation.cif.gz | 923.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v5/4v5h ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v5/4v5h | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 5種, 5分子 AAAVAXBABB
#1: RNA鎖 | 分子量: 495927.719 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: GenBank: 54791136 |
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#22: RNA鎖 | 分子量: 24890.803 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: GenBank: 54791136 |
#23: RNA鎖 | 分子量: 3497.194 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
#34: RNA鎖 | 分子量: 37848.555 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: GenBank: 38859724 |
#35: RNA鎖 | 分子量: 941306.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: GenBank: 38859724 |
-30S RIBOSOMAL PROTEIN ... , 20種, 20分子 ABACADAEAFAGAHAIAJAKALAMANAOAPAQARASATAU
#2: タンパク質 | 分子量: 24253.943 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 9-226 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7V0 |
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#3: タンパク質 | 分子量: 23078.785 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 2-207 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7V3 |
#4: タンパク質 | 分子量: 23383.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7V8 |
#5: タンパク質 | 分子量: 15804.282 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 10-159 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7W1 |
#6: タンパク質 | 分子量: 11669.371 Da / 分子数: 1 / Fragment: 1-100 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P02358 |
#7: タンパク質 | 分子量: 16764.406 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 3-152 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P02359 |
#8: タンパク質 | 分子量: 14015.361 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7W7 |
#9: タンパク質 | 分子量: 14554.882 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 4-130 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7X3 |
#10: タンパク質 | 分子量: 11196.988 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 5-102 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7R5 |
#11: タンパク質 | 分子量: 12487.200 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 13-129 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7R9 |
#12: タンパク質 | 分子量: 13636.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7S3 |
#13: タンパク質 | 分子量: 12528.639 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 2-114 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7S9 |
#14: タンパク質 | 分子量: 11028.997 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AG59 |
#15: タンパク質 | 分子量: 10188.687 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 2-89 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: Q8X9M2 |
#16: タンパク質 | 分子量: 9065.417 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 1-80 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7T3 |
#17: タンパク質 | 分子量: 9263.946 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 4-83 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0AG63 |
#18: タンパク質 | 分子量: 6466.477 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 20-74 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7T7 |
#19: タンパク質 | 分子量: 9057.626 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 3-81 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7U3 |
#20: タンパク質 | 分子量: 9506.190 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 3-87 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7U7 |
#21: タンパク質 | 分子量: 6067.081 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 4-54 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 参照: UniProt: P68679 |
-タンパク質・ペプチド , 1種, 1分子 AZ
#24: タンパク質・ペプチド | 分子量: 1439.571 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) |
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+50S RIBOSOMAL PROTEIN ... , 30種, 30分子 B0B1B2B3B4B5B6B7B8BCBDBEBFBGBHBIBJBKBLBMBNBOBPBQBRBSBTBUBWBY
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: TNAC STALLED 70S RIBOSOME WITH P-SITE TRNA. / タイプ: RIBOSOME |
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緩衝液 | 名称: 50 MM TRIS-HCL PH 8.0, 10MM MG-ACETATE, 50MM KCL, 10MM NH4CL, 2MM EGTA, 2MM L-TRYPTOPHAN, 10 MM DTT pH: 8 詳細: 50 MM TRIS-HCL PH 8.0, 10MM MG-ACETATE, 50MM KCL, 10MM NH4CL, 2MM EGTA, 2MM L-TRYPTOPHAN, 10 MM DTT |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: HOLEY CARBON |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE / 詳細: CRYOGEN- ETHANE, |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Tecnai F30 / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI F30 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 39000 X / 倍率(補正後): 38900 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.26 mm |
試料ホルダ | 温度: 95 K |
撮影 | 電子線照射量: 20 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM |
画像スキャン | デジタル画像の数: 128 |
放射波長 | 相対比: 1 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: DEFOCUS GROUP VOLUMES | |||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 手法: PROJECTION MATCHING / 解像度: 5.8 Å / 粒子像の数: 263000 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL / 詳細: METHOD--MDFF REFINEMENT PROTOCOL--FLEXIBLE FITTING | |||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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精密化 | 最高解像度: 5.8 Å | |||||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 5.8 Å
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