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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 3jb9 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the yeast spliceosome at 3.6 angstrom resolution | |||||||||
要素 |
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キーワード | RNA BINDING PROTEIN/RNA / Spliceosome (スプライセオソーム) / U2/U5/U6 / Lariat / RNA BINDING PROTEIN-RNA complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 : / : / : / : / protein modification by small protein conjugation or removal / regulation of siRNA-mediated facultative heterochromatin formation / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / second spliceosomal transesterification activity / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER ...: / : / : / : / protein modification by small protein conjugation or removal / regulation of siRNA-mediated facultative heterochromatin formation / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / second spliceosomal transesterification activity / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / : / spliceosomal conformational changes to generate catalytic conformation / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / U12-type spliceosomal complex / pre-mRNA binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / pICln-Sm protein complex / Prp19 complex / spliceosomal tri-snRNP complex / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / Cul4-RING E3 ubiquitin ligase complex / U2-type spliceosomal complex / commitment complex / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U4 snRNP / U2 snRNP / U1 snRNP / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / spliceosomal complex assembly / protein K63-linked ubiquitination / mRNA 5'-splice site recognition / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / U5 snRNA binding / U5 snRNP / U2 snRNA binding / spliceosomal snRNP assembly / U6 snRNA binding / protein peptidyl-prolyl isomerization / pre-mRNA intronic binding / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / プロリルイソメラーゼ / peptidyl-prolyl cis-trans isomerase activity / spliceosomal complex / RING-type E3 ubiquitin transferase / mRNA splicing, via spliceosome / ubiquitin-protein transferase activity / metallopeptidase activity / ubiquitin protein ligase activity / フォールディング / 核膜 / cysteine-type deubiquitinase activity / 細胞周期 / ribonucleoprotein complex / DNA修復 / mRNA binding / GTPase activity / GTP binding / DNA binding / RNA binding / metal ion binding / 細胞核 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Yan, C. / Hang, J. / Wan, R. / Huang, M. / Wong, C. / Shi, Y. | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2015 タイトル: Structure of a yeast spliceosome at 3.6-angstrom resolution. 著者: Chuangye Yan / Jing Hang / Ruixue Wan / Min Huang / Catherine C L Wong / Yigong Shi / 要旨: Splicing of precursor messenger RNA (pre-mRNA) in yeast is executed by the spliceosome, which consists of five small nuclear ribonucleoproteins (snRNPs), NTC (nineteen complex), NTC-related proteins ...Splicing of precursor messenger RNA (pre-mRNA) in yeast is executed by the spliceosome, which consists of five small nuclear ribonucleoproteins (snRNPs), NTC (nineteen complex), NTC-related proteins (NTR), and a number of associated enzymes and cofactors. Here, we report the three-dimensional structure of a Schizosaccharomyces pombe spliceosome at 3.6-angstrom resolution, revealed by means of single-particle cryogenic electron microscopy. This spliceosome contains U2 and U5 snRNPs, NTC, NTR, U6 small nuclear RNA, and an RNA intron lariat. The atomic model includes 10,574 amino acids from 37 proteins and four RNA molecules, with a combined molecular mass of approximately 1.3 megadaltons. Spp42 (Prp8 in Saccharomyces cerevisiae), the key protein component of the U5 snRNP, forms a central scaffold and anchors the catalytic center. Both the morphology and the placement of protein components appear to have evolved to facilitate the dynamic process of pre-mRNA splicing. Our near-atomic-resolution structure of a central spliceosome provides a molecular framework for mechanistic understanding of pre-mRNA splicing. | |||||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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PDBx/mmCIF形式 | 3jb9.cif.gz | 2.2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb3jb9.ent.gz | 1.7 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 3jb9.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/jb/3jb9 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/jb/3jb9 | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 6413MC 6414MC 6415MC 6416MC 6417MC 6418MC 6419MC 6420MC 6421MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-Pre-mRNA-splicing factor ... , 14種, 14分子 ABKLWYacehiRrX
#1: タンパク質 | 分子量: 274917.781 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O14187 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 111445.281 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O94316 |
#11: タンパク質 | 分子量: 48909.672 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O13615 |
#12: タンパク質 | 分子量: 37477.242 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O94620 |
#19: タンパク質 | 分子量: 75128.133 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: P39964 |
#20: タンパク質 | 分子量: 41838.934 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: P87126 |
#21: タンパク質 | 分子量: 37133.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O59800 |
#22: タンパク質 | 分子量: 74547.477 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: Q09909 |
#24: タンパク質 | 分子量: 17122.850 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O74772 |
#26: タンパク質 | 分子量: 30478.979 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: P78794 |
#27: タンパク質 | 分子量: 21348.246 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: Q9USV3 |
#28: タンパク質 | 分子量: 67082.680 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: P87312 |
#29: タンパク質 | 分子量: 72172.055 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: Q9P7R9 |
#30: タンパク質 | 分子量: 148532.906 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O94508 |
-RNA鎖 , 5種, 5分子 CNOQP
#3: RNA鎖 | 分子量: 38191.363 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) |
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#14: RNA鎖 | 分子量: 31863.982 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) |
#15: RNA鎖 | 分子量: 2528.529 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) |
#16: RNA鎖 | 分子量: 4047.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 詳細: chain O and Q come from one RNA molecule. atom O2' A (Q 501) is covalently binding to atom P G (Q 100). 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) |
#17: RNA鎖 | 分子量: 59207.473 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe (分裂酵母) |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 12分子 DZFfGlHmInJo
#4: タンパク質 | 分子量: 11050.884 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: Q9UUC6 #6: タンパク質 | 分子量: 13115.422 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O42661 #7: タンパク質 | 分子量: 13119.311 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O14036 #8: タンパク質 | 分子量: 9702.353 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: Q9USZ3 #9: タンパク質 | 分子量: 8667.062 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O59734 #10: タンパク質 | 分子量: 8616.038 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O74966 |
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-タンパク質 , 6種, 7分子 EbMdjkx
#5: タンパク質 | 分子量: 15493.004 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: Q10163 #13: タンパク質 | | 分子量: 62798.176 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: Q09882 #23: タンパク質 | | 分子量: 16884.201 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: P87051, プロリルイソメラーゼ #31: タンパク質 | | 分子量: 27260.381 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: Q9USX8 #32: タンパク質 | | 分子量: 12685.730 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: Q7LL14 #33: タンパク質 | | 分子量: 35081.176 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 |
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-Pre-mRNA-processing factor ... , 2種, 5分子 STUVg
#18: タンパク質 | 分子量: 54243.988 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 参照: UniProt: O14011, 合成酵素; C-N結合を形成; 酸-D-アミノ酸リガーゼ(ペプチド合成) #25: タンパク質 | | 分子量: 63211.309 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Schizosaccharomyces pombe 972h- (分裂酵母) 株: 972 / ATCC 24843 / 参照: UniProt: O43071 |
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-非ポリマー , 4種, 13分子
#34: 化合物 | ChemComp-GDP / | ||||
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#35: 化合物 | ChemComp-MG / #36: 化合物 | ChemComp-ZN / #37: 化合物 | ChemComp-ADP / | |
-詳細
配列の詳細 | THERE ARE MANY UNK RESIDUES IN CHAIN K, W, Y, a(LOWER CASE), R, r(LOWER CASE). THE COMPLETE ...THERE ARE MANY UNK RESIDUES IN CHAIN K, W, Y, a(LOWER CASE), R, r(LOWER CASE). THE COMPLETE SEQUENCE OF THESE CHAINS CORRESPOND |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: spliceosomeスプライセオソーム / タイプ: COMPLEX |
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緩衝液 | 名称: CEB buffer / pH: 8 / 詳細: CEB buffer |
試料 | 濃度: 0.3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: carbon coated grid |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 手法: Blot for 2.5 seconds before plunging |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS / 日付: 2015年3月29日 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 3 nm / Cs: 1.4 mm / カメラ長: 0 mm |
試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER 傾斜角・最大: 0 ° / 傾斜角・最小: 0 ° |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 (4k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア | 名称: RELION / カテゴリ: 3次元再構成 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 112795 / 詳細: (Single particle--Applied symmetry: C1) / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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精密化ステップ | サイクル: LAST
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