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- EMDB-9246: Structure of full-length IP3R1 channel in Apo-state -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-9246
タイトルStructure of full-length IP3R1 channel in Apo-state
マップデータcryo-EM density map of IP3R1 in apo-state
試料
  • 複合体: Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor
生物種Rattus norvegicus (ドブネズミ)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.3 Å
データ登録者Fan G / Baker MR / Wang Z / Seryshev AB / Ludtke SJ / Baker ML / Serysheva II
資金援助 米国, 6件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01GM072804 米国
National Institutes of Health/National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin Diseases (NIH/NIAMS)R21AR063255 米国
National Institutes of Health/National Institute of Neurological Disorders and Stroke (NIH/NINDS)R21NS106968 米国
American Heart Association16GRNT2972000 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01GM080139 米国
National Science Foundation (NSF, United States)DBI-1356306 米国
引用ジャーナル: Cell Res / 年: 2018
タイトル: Cryo-EM reveals ligand induced allostery underlying InsPR channel gating.
著者: Guizhen Fan / Mariah R Baker / Zhao Wang / Alexander B Seryshev / Steven J Ludtke / Matthew L Baker / Irina I Serysheva /
要旨: Inositol-1,4,5-trisphosphate receptors (InsPRs) are cation channels that mobilize Ca from intracellular stores in response to a wide range of cellular stimuli. The paradigm of InsPR activation is the ...Inositol-1,4,5-trisphosphate receptors (InsPRs) are cation channels that mobilize Ca from intracellular stores in response to a wide range of cellular stimuli. The paradigm of InsPR activation is the coupled interplay between binding of InsP and Ca that switches the ion conduction pathway between closed and open states to enable the passage of Ca through the channel. However, the molecular mechanism of how the receptor senses and decodes ligand-binding signals into gating motion remains unknown. Here, we present the electron cryo-microscopy structure of InsPR1 from rat cerebellum determined to 4.1 Å resolution in the presence of activating concentrations of Ca and adenophostin A (AdA), a structural mimetic of InsP and the most potent known agonist of the channel. Comparison with the 3.9 Å-resolution structure of InsPR1 in the Apo-state, also reported herein, reveals the binding arrangement of AdA in the tetrameric channel assembly and striking ligand-induced conformational rearrangements within cytoplasmic domains coupled to the dilation of a hydrophobic constriction at the gate. Together, our results provide critical insights into the mechanistic principles by which ligand-binding allosterically gates InsPR channel.
履歴
登録2018年10月22日-
ヘッダ(付随情報) 公開2018年11月7日-
マップ公開2018年12月5日-
更新2019年12月25日-
現状2019年12月25日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.8
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.8
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_9246.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_9246.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈cryo-EM density map of IP3R1 in apo-state
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.26 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.8 / ムービー #1: 0.8
最小 - 最大-6.904124 - 10.5527115
平均 (標準偏差)0.056378666 (±0.36657882)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ200200200
Spacing200200200
セルA=B=C: 252.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.261.261.26
M x/y/z200200200
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z252.000252.000252.000
α/β/γ90.00090.00090.000
start NX/NY/NZ000
NX/NY/NZ281156
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS200200200
D min/max/mean-6.90410.5530.056

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor

全体名称: Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor
要素
  • 複合体: Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor

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超分子 #1: Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor

超分子名称: Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 / 詳細: tetrameric assembly
由来(天然)生物種: Rattus norvegicus (ドブネズミ) / 器官: Brain / 組織: Cerebellum / Organelle: endoplasmic reticulum / 細胞中の位置: membrane
分子量理論値: 1.3 MDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

緩衝液pH: 7.4
詳細: 50 mM Tris-HCl buffer (pH 7.4), 150 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.4% CHAPS, 2 mM EGTA, 1 mM EDTA, protease inhibitors
グリッド支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 詳細: unavailable
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 293 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細0.1 mg/ml

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TECNAI F30
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.0 mm
試料ステージ試料ホルダーモデル: GATAN 910 MULTI-SPECIMEN SINGLE TILT CRYO TRANSFER HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
温度最低: 93.0 K / 最高: 93.0 K
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 2-17 / 実像数: 9823 / 平均露光時間: 0.2 sec. / 平均電子線量: 1.3 e/Å2
実験機器
モデル: Tecnai F30 / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 207914
CTF補正ソフトウェア - 名称: EMAN2 (ver. 2.1)
初期モデルモデルのタイプ: EMDB MAP
EMDB ID:

6369

初期 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: EMAN2 (ver. 2.1)
最終 3次元分類ソフトウェア - 名称: EMAN2 (ver. 2.1)
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: EMAN2 (ver. 2.1)
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C4 (4回回転対称) / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: EMAN2 (ver. 2.1) / 使用した粒子像数: 100615

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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