+
データを開く
-
基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8p8b | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Mycoplasma pneumoniae large ribosomal subunit in chloramphenicol-treated cells | |||||||||
![]() |
| |||||||||
![]() | TRANSLATION / In situ / Ribosome / Chloramphenicol / cryo-ET | |||||||||
機能・相同性 | ![]() RNA polymerase II CTD heptapeptide repeat P3 isomerase activity / RNA polymerase II CTD heptapeptide repeat P6 isomerase activity / peptidylprolyl isomerase / protein transport / protein folding / large ribosomal subunit / transferase activity / 5S rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding ...RNA polymerase II CTD heptapeptide repeat P3 isomerase activity / RNA polymerase II CTD heptapeptide repeat P6 isomerase activity / peptidylprolyl isomerase / protein transport / protein folding / large ribosomal subunit / transferase activity / 5S rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / ribonucleoprotein complex / cell division / response to antibiotic / mRNA binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | |||||||||
![]() | Schacherl, M. / Xue, L. / Spahn, C.M.T. / Mahamid, J. | |||||||||
資金援助 | ![]() ![]()
| |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Structural insights into context-dependent inhibitory mechanisms of chloramphenicol in cells. 著者: Liang Xue / Christian M T Spahn / Magdalena Schacherl / Julia Mahamid / ![]() ![]() 要旨: Ribosome-targeting antibiotics represent an important class of antimicrobial drugs. Chloramphenicol (Cm) is a well-studied ribosomal peptidyl transferase center (PTC) binder and growing evidence ...Ribosome-targeting antibiotics represent an important class of antimicrobial drugs. Chloramphenicol (Cm) is a well-studied ribosomal peptidyl transferase center (PTC) binder and growing evidence suggests that its inhibitory action depends on the sequence of the nascent peptide. How such selective inhibition on the molecular scale manifests on the cellular level remains unclear. Here, we use cryo-electron tomography to analyze the impact of Cm inside the bacterium Mycoplasma pneumoniae. By resolving the Cm-bound ribosomes to 3.0 Å, we elucidate Cm's coordination with natural nascent peptides and transfer RNAs in the PTC. We find that Cm leads to the accumulation of a number of translation elongation states, indicating ongoing futile accommodation cycles, and to extensive ribosome collisions. We, thus, suggest that, beyond its direct inhibition of protein synthesis, the action of Cm may involve the activation of cellular stress responses. This work exemplifies how in-cell structural biology can expand the understanding of mechanisms of action for extensively studied antibiotics. | |||||||||
履歴 |
|
-
構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
---|
-
ダウンロードとリンク
-
ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 2.4 MB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | ![]() | 1.9 MB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
---|
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 17134MC ![]() 8p6pC ![]() 8p7xC ![]() 8p7yC ![]() 8p8vC ![]() 8p8wC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
---|---|
類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
実験データセット #1 | データ参照: ![]() |
-
リンク
-
集合体
登録構造単位 | ![]()
|
---|---|
1 |
|
-
要素
+50S ribosomal protein ... , 29種, 29分子 012abcdefghijklmnopqrstuvwxyz
-RNA鎖 , 7種, 7分子 345678Y
#4: RNA鎖 | 分子量: 940953.500 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: GenBank: 26117688 |
---|---|
#5: RNA鎖 | 分子量: 34796.676 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: GenBank: 26117688 |
#6: RNA鎖 | 分子量: 491327.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 詳細: Sequence comprises 16S rRNA ribonucleotides 1374-1387 and 1463-1480 only. 由来: (天然) ![]() 参照: GenBank: 26117688 |
#7: RNA鎖 | 分子量: 24440.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: GenBank: 26117688 |
#8: RNA鎖 | 分子量: 24136.244 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: GenBank: 26117688 |
#9: RNA鎖 | 分子量: 24401.449 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: GenBank: 26117688 |
#11: RNA鎖 | 分子量: 2894.807 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() |
-タンパク質 / タンパク質・ペプチド , 2種, 2分子 XZ
#10: タンパク質 | 分子量: 51427.031 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 参照: UniProt: P75454, peptidylprolyl isomerase |
---|---|
#12: タンパク質・ペプチド | 分子量: 3127.794 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() |
-非ポリマー , 9種, 266分子 
















#39: 化合物 | ChemComp-ZN / #40: 化合物 | ChemComp-CLM / | #41: 化合物 | ChemComp-K / | #42: 化合物 | ChemComp-MG / #43: 化合物 | ChemComp-PUT / #44: 化合物 | ChemComp-SPM / #45: 化合物 | ChemComp-SPD / #46: 化合物 | #47: 化合物 | ChemComp-LYS / | |
---|
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
---|---|
Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: CELL / 3次元再構成法: サブトモグラム平均法 |
-
試料調製
構成要素 | 名称: Large ribosomal subunit with some elements of the small ribosomal subunit. Focused refinement on 50S subunit of the in situ 70S subunit map. タイプ: CELL 詳細: Mycoplasma pneumoniae M129 cells treated with chloramphenicol Entity ID: #1-#8, #10-#38 / 由来: NATURAL |
---|---|
由来(天然) | 生物種: ![]() |
緩衝液 | pH: 7.4 詳細: The modified Hayflick medium: 14.7g/L Difco PPLO(Becton Dickinson), 20% (v/v) Gibco horse serum(New Zealand origin), 100 mM HEPES-Na; pH 7.4, 1% (w/w) glucose, 0.002% (w/w) phenol red, 1000 U/mL penicillin G. |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: Mycoplasma pneumoniae M129 cells were grown on gold Quantifoil grids at 37 Celsius in the modified Hayflick medium. Treatment with chloramphenicol at the final concentration of 0.2 mg/ml was ...詳細: Mycoplasma pneumoniae M129 cells were grown on gold Quantifoil grids at 37 Celsius in the modified Hayflick medium. Treatment with chloramphenicol at the final concentration of 0.2 mg/ml was performed for about 15 minutes before plunge freezing. |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 |
急速凍結 | 装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: ETHANE-PROPANE 詳細: Back-side blotting for 2-3 seconds before plunging using a manual plunger without an environmental control chamber. |
-
電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 64000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3250 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 3.34 e/Å2 / Avg electron dose per subtomogram: 137 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 実像数: 1 詳細: Gatan K3 camera in non-CDS counting mode, targeted dose rate on camera ~20 e/pixel/second, 10 frames per tilt image, constant exposure time for each tilt, pixel size 1.329A |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
-
解析
EMソフトウェア |
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CTF補正 | 詳細: CTF estimation and 3D CTF correction are done in Warp タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 30774 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 詳細: half maps from Warp/M / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
EM volume selection | Num. of tomograms: 139 / Num. of volumes extracted: 30774 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL / Target criteria: Cross-correlation coefficient | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
|