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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8b9d | ||||||
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タイトル | Human replisome bound by Pol Alpha | ||||||
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![]() | REPLICATION / human / priming / polymerase | ||||||
機能・相同性 | ![]() cellular response to bleomycin / DNA primase AEP / DNA secondary structure binding / ribonucleotide binding / detection of abiotic stimulus / regulation of nuclear cell cycle DNA replication / replication fork arrest / Switching of origins to a post-replicative state / cell cycle phase transition / Unwinding of DNA ...cellular response to bleomycin / DNA primase AEP / DNA secondary structure binding / ribonucleotide binding / detection of abiotic stimulus / regulation of nuclear cell cycle DNA replication / replication fork arrest / Switching of origins to a post-replicative state / cell cycle phase transition / Unwinding of DNA / DNA replication initiation / DNA strand elongation involved in mitotic DNA replication / GINS complex / mitotic DNA replication preinitiation complex assembly / Telomere C-strand synthesis initiation / activation of protein kinase activity / cellular response to cisplatin / DNA/RNA hybrid binding / Inhibition of replication initiation of damaged DNA by RB1/E2F1 / cellular response to hydroxyurea / replication fork protection complex / nuclear origin of replication recognition complex / regulation of type I interferon production / anaphase-promoting complex binding / Regulation of MITF-M-dependent genes involved in DNA replication, damage repair and senescence / alpha DNA polymerase:primase complex / mitotic DNA replication / regulation of phosphorylation / DNA replication checkpoint signaling / Polymerase switching / CMG complex / Processive synthesis on the lagging strand / DNA replication preinitiation complex / MCM complex / lagging strand elongation / Removal of the Flap Intermediate / mitotic DNA replication checkpoint signaling / Polymerase switching on the C-strand of the telomere / double-strand break repair via break-induced replication / mitotic DNA replication initiation / DNA replication, synthesis of primer / mitotic intra-S DNA damage checkpoint signaling / regulation of DNA-templated DNA replication initiation / inner cell mass cell proliferation / positive regulation of double-strand break repair / branching morphogenesis of an epithelial tube / DNA strand elongation involved in DNA replication / DNA synthesis involved in DNA repair / Apoptotic cleavage of cellular proteins / leading strand elongation / G1/S-Specific Transcription / mitotic G2 DNA damage checkpoint signaling / replication fork processing / nuclear replication fork / DNA replication origin binding / cochlea development / Activation of the pre-replicative complex / DNA replication initiation / positive regulation of double-strand break repair via homologous recombination / Activation of ATR in response to replication stress / response to UV / DNA helicase activity / cellular response to interleukin-4 / cellular response to epidermal growth factor stimulus / Assembly of the pre-replicative complex / DNA damage checkpoint signaling / morphogenesis of an epithelium / Defective pyroptosis / enzyme activator activity / lung development / helicase activity / regulation of circadian rhythm / Orc1 removal from chromatin / double-strand break repair via nonhomologous end joining / DNA-templated DNA replication / multicellular organism growth / nuclear matrix / circadian rhythm / protein import into nucleus / DNA-directed RNA polymerase activity / peptidyl-serine phosphorylation / cellular senescence / cellular response to xenobiotic stimulus / nuclear envelope / site of double-strand break / nucleosome assembly / mitotic cell cycle / single-stranded DNA binding / Processing of DNA double-strand break ends / 4 iron, 4 sulfur cluster binding / histone binding / DNA helicase / DNA-directed DNA polymerase / DNA-directed DNA polymerase activity / chromosome, telomeric region / DNA replication / cell population proliferation / Ub-specific processing proteases / ciliary basal body / cilium 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | ||||||
![]() | Jones, M.L. / Yeeles, J.T.P. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: How Pol α-primase is targeted to replisomes to prime eukaryotic DNA replication. 著者: Morgan L Jones / Valentina Aria / Yasemin Baris / Joseph T P Yeeles / ![]() 要旨: During eukaryotic DNA replication, Pol α-primase generates primers at replication origins to start leading-strand synthesis and every few hundred nucleotides during discontinuous lagging-strand ...During eukaryotic DNA replication, Pol α-primase generates primers at replication origins to start leading-strand synthesis and every few hundred nucleotides during discontinuous lagging-strand replication. How Pol α-primase is targeted to replication forks to prime DNA synthesis is not fully understood. Here, by determining cryoelectron microscopy (cryo-EM) structures of budding yeast and human replisomes containing Pol α-primase, we reveal a conserved mechanism for the coordination of priming by the replisome. Pol α-primase binds directly to the leading edge of the CMG (CDC45-MCM-GINS) replicative helicase via a complex interaction network. The non-catalytic PRIM2/Pri2 subunit forms two interfaces with CMG that are critical for in vitro DNA replication and yeast cell growth. These interactions position the primase catalytic subunit PRIM1/Pri1 directly above the exit channel for lagging-strand template single-stranded DNA (ssDNA), revealing why priming occurs efficiently only on the lagging-strand template and elucidating a mechanism for Pol α-primase to overcome competition from RPA to initiate primer synthesis. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.5 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.6 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 184.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 304.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-DNA replication licensing factor ... , 6種, 6分子 234567
#1: タンパク質 | 分子量: 102034.102 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
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#2: タンパク質 | 分子量: 91110.852 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#3: タンパク質 | 分子量: 96684.852 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#4: タンパク質 | 分子量: 82406.633 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#5: タンパク質 | 分子量: 93010.273 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#6: タンパク質 | 分子量: 81411.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
-DNA polymerase alpha ... , 2種, 2分子 AB
#7: タンパク質 | 分子量: 66015.539 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
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#21: タンパク質 | 分子量: 170392.656 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
-タンパク質 , 7種, 9分子 CKLPQOHJI
#8: タンパク質 | 分子量: 66016.891 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
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#13: タンパク質 | 分子量: 138903.031 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#14: タンパク質 | 分子量: 34600.223 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#17: タンパク質 | 分子量: 58890.918 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#18: タンパク質 | 分子量: 155184.703 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#19: タンパク質 | 分子量: 54242.598 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#20: タンパク質 | 分子量: 129966.961 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
-DNA replication complex GINS protein ... , 4種, 4分子 DEFG
#9: タンパク質 | 分子量: 23022.469 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
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#10: タンパク質 | 分子量: 21453.713 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#11: タンパク質 | 分子量: 24562.611 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#12: タンパク質 | 分子量: 29983.041 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 MN
#15: DNA鎖 | 分子量: 26092.645 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() |
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#16: DNA鎖 | 分子量: 26402.895 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() |
-非ポリマー , 3種, 10分子 




#22: 化合物 | #23: 化合物 | #24: 化合物 | ChemComp-ZN / |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Human replisome bound by pol alpha, engaged on a fork DNA substrate with a 60 nucleotide lagging strand. タイプ: COMPLEX Entity ID: #19, #7, #21, #17, #1-#6, #8-#12, #20, #13-#16, #18 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() |
緩衝液 | pH: 7.6 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
撮影 | 電子線照射量: 37.8 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
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解析
EMソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.20_4459: / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 174696 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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