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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6qdv | ||||||||||||
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タイトル | Human post-catalytic P complex spliceosome | ||||||||||||
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![]() | SPLICING / spliceosome / RNA / complex | ||||||||||||
機能・相同性 | ![]() second spliceosomal transesterification activity / exon-exon junction subcomplex mago-y14 / negative regulation of selenocysteine incorporation / regulation of nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / cellular response to selenite ion / selenocysteine insertion sequence binding / exon-exon junction complex / pre-mRNA 3'-splice site binding / regulation of translation at postsynapse, modulating synaptic transmission / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway ...second spliceosomal transesterification activity / exon-exon junction subcomplex mago-y14 / negative regulation of selenocysteine incorporation / regulation of nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / cellular response to selenite ion / selenocysteine insertion sequence binding / exon-exon junction complex / pre-mRNA 3'-splice site binding / regulation of translation at postsynapse, modulating synaptic transmission / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway / granulocyte differentiation / post-mRNA release spliceosomal complex / renal system process / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / negative regulation of toll-like receptor signaling pathway / histone pre-mRNA DCP binding / 3'-5' RNA helicase activity / endonucleolytic cleavage of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / U7 snRNP / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / Z-decay: degradation of maternal mRNAs by zygotically expressed factors / histone pre-mRNA 3'end processing complex / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / regulation of mRNA processing / regulation of vitamin D receptor signaling pathway / negative regulation of excitatory postsynaptic potential / negative regulation of interleukin-8 production / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / negative regulation of lipopolysaccharide-mediated signaling pathway / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / Deadenylation of mRNA / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / nuclear retinoic acid receptor binding / embryonic brain development / protein methylation / oocyte development / embryonic cranial skeleton morphogenesis / U12-type spliceosomal complex / alternative mRNA splicing, via spliceosome / poly(A) binding / 7-methylguanosine cap hypermethylation / negative regulation of interferon-beta production / U1 snRNP binding / M-decay: degradation of maternal mRNAs by maternally stored factors / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / mRNA 3'-end processing / methylosome / RNA splicing, via transesterification reactions / ATP-dependent activity, acting on RNA / pICln-Sm protein complex / C2H2 zinc finger domain binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / pre-mRNA binding / regulation of mRNA splicing, via spliceosome / snRNP binding / positive regulation of mRNA splicing, via spliceosome / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / host-mediated activation of viral transcription / spliceosomal tri-snRNP complex / P granule / telomerase holoenzyme complex / U2-type precatalytic spliceosome / positive regulation of vitamin D receptor signaling pathway / commitment complex / telomerase RNA binding / mRNA cis splicing, via spliceosome / U2-type spliceosomal complex / nuclear vitamin D receptor binding / U2-type prespliceosome assembly / Notch binding / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / Regulation of gene expression in late stage (branching morphogenesis) pancreatic bud precursor cells / positive regulation of alpha-beta T cell differentiation / U2-type catalytic step 2 spliceosome / RUNX3 regulates NOTCH signaling / positive regulation of neurogenesis / NOTCH4 Intracellular Domain Regulates Transcription / U4 snRNP / RNA Polymerase II Transcription Termination / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / U2 snRNP / U1 snRNP / NOTCH3 Intracellular Domain Regulates Transcription / negative regulation of type I interferon-mediated signaling pathway / U2-type prespliceosome / inner cell mass cell proliferation / WD40-repeat domain binding / protein peptidyl-prolyl isomerization / ubiquitin-ubiquitin ligase activity / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / nuclear androgen receptor binding / snoRNA binding / precatalytic spliceosome / negative regulation of NF-kappaB transcription factor activity / regulation of alternative mRNA splicing, via spliceosome / Notch-HLH transcription pathway / lipid biosynthetic process / hematopoietic stem cell proliferation 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | ||||||||||||
![]() | Fica, S.M. / Oubridge, C. / Wilkinson, M.E. / Newman, A.J. / Nagai, K. | ||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: A human postcatalytic spliceosome structure reveals essential roles of metazoan factors for exon ligation. 著者: Sebastian M Fica / Chris Oubridge / Max E Wilkinson / Andrew J Newman / Kiyoshi Nagai / ![]() 要旨: During exon ligation, the spliceosome recognizes the 3'-splice site (3'SS) of precursor messenger RNA (pre-mRNA) through non-Watson-Crick pairing with the 5'SS and the branch adenosine, in a ...During exon ligation, the spliceosome recognizes the 3'-splice site (3'SS) of precursor messenger RNA (pre-mRNA) through non-Watson-Crick pairing with the 5'SS and the branch adenosine, in a conformation stabilized by Prp18 and Prp8. Here we present the 3.3-angstrom cryo-electron microscopy structure of a human postcatalytic spliceosome just after exon ligation. The 3'SS docks at the active site through conserved RNA interactions in the absence of Prp18. Unexpectedly, the metazoan-specific FAM32A directly bridges the 5'-exon and intron 3'SS of pre-mRNA and promotes exon ligation, as shown by functional assays. CACTIN, SDE2, and NKAP-factors implicated in alternative splicing-further stabilize the catalytic conformation of the spliceosome during exon ligation. Together these four proteins act as exon ligation factors. Our study reveals how the human spliceosome has co-opted additional proteins to modulate a conserved RNA-based mechanism for 3'SS selection and to potentially fine-tune alternative splicing at the exon ligation stage. | ||||||||||||
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 4525MC ![]() 4526C ![]() 4527C ![]() 4528C ![]() 4529C ![]() 4530C ![]() 4532C ![]() 4533C ![]() 4534C ![]() 4535C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-RNA鎖 , 5種, 5分子 256EI
#1: RNA鎖 | 分子量: 60459.621 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 36908.668 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#3: RNA鎖 | 分子量: 34098.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#11: RNA鎖 | 分子量: 4437.700 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) ![]() ![]() |
#15: RNA鎖 | 分子量: 27772.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) ![]() ![]() |
-タンパク質 , 18種, 19分子 789ACDFGJKLOPSUVbki
#4: タンパク質 | 分子量: 44691.359 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
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#5: タンパク質 | 分子量: 10370.526 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#6: タンパク質 | 分子量: 16929.314 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#7: タンパク質 | 分子量: 273974.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#9: タンパク質 | 分子量: 101231.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#10: タンパク質 | 分子量: 14476.882 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#12: タンパク質 | 分子量: 15210.249 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#13: タンパク質 | 分子量: 7269.374 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#16: タンパク質 | 分子量: 35782.395 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#17: タンパク質 | 分子量: 33819.922 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#18: タンパク質 | 分子量: 17032.850 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#21: タンパク質 | 分子量: 92406.883 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#22: タンパク質 | 分子量: 26674.447 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#24: タンパク質 | 分子量: 100610.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#26: タンパク質 | 分子量: 171502.453 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() | ||
#27: タンパク質 | 分子量: 139522.312 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() | ||
#31: タンパク質 | 分子量: 9551.284 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #38: タンパク質 | | 分子量: 18055.529 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-U5 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 BN
#8: タンパク質 | 分子量: 197053.984 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#20: タンパク質 | 分子量: 34092.410 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-Pre-mRNA-splicing factor ... , 6種, 6分子 HMTcsy
#14: タンパク質 | 分子量: 105646.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#19: タンパク質 | 分子量: 33156.129 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#25: タンパク質 | 分子量: 100148.711 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#32: タンパク質 | 分子量: 68510.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#41: タンパク質 | 分子量: 26163.420 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#43: タンパク質 | 分子量: 17302.371 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-タンパク質・ペプチド , 3種, 3分子 RZz
#23: タンパク質・ペプチド | 分子量: 2767.128 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#30: タンパク質・ペプチド | 分子量: 3321.766 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#44: タンパク質・ペプチド | 分子量: 4036.538 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-U2 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 WY
#28: タンパク質 | 分子量: 18697.730 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#29: タンパク質 | 分子量: 10688.563 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 12分子 dnepfqgrhljm
#33: タンパク質 | 分子量: 9460.979 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #34: タンパク質 | 分子量: 9582.185 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #35: タンパク質 | 分子量: 8038.415 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #36: タンパク質 | 分子量: 8160.629 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #37: タンパク質 | 分子量: 9086.731 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #39: タンパク質 | 分子量: 13551.928 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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-Pre-mRNA-processing factor ... , 2種, 5分子 otuvw
#40: タンパク質 | 分子量: 59116.055 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#42: タンパク質 | 分子量: 55245.547 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-非ポリマー , 6種, 18分子 










#45: 化合物 | ChemComp-MG / #46: 化合物 | ChemComp-K / | #47: 化合物 | ChemComp-ATP / | #48: 化合物 | ChemComp-GTP / | #49: 化合物 | ChemComp-ZN / #50: 化合物 | ChemComp-IHP / | |
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-詳細
Has protein modification | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 |
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分子量 | 値: 3.0 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.9 | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK III / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K 詳細: 3 uL sample was applied to the grid, left for 25s, then blotted for 2.5-3.5s and immediately plunged into liquid ethane. |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 135000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 平均露光時間: 10 sec. / 電子線照射量: 53 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 6200 |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 40 / 利用したフレーム数/画像: 1-40 |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 103860 / 対称性のタイプ: POINT |