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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 5xjc | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | Cryo-EM structure of the human spliceosome just prior to exon ligation at 3.6 angstrom | |||||||||
要素 |
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キーワード | SPLICING / RNA splicing / human spliceosome / C* complex / atomic structure / step 2 factors / EJC | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報second spliceosomal transesterification activity / exon-exon junction subcomplex mago-y14 / negative regulation of selenocysteine incorporation / cellular response to selenite ion / regulation of nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / exon-exon junction complex / selenocysteine insertion sequence binding / pre-mRNA 3'-splice site binding / regulation of translation at postsynapse, modulating synaptic transmission / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway ...second spliceosomal transesterification activity / exon-exon junction subcomplex mago-y14 / negative regulation of selenocysteine incorporation / cellular response to selenite ion / regulation of nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / exon-exon junction complex / selenocysteine insertion sequence binding / pre-mRNA 3'-splice site binding / regulation of translation at postsynapse, modulating synaptic transmission / regulation of retinoic acid receptor signaling pathway / post-mRNA release spliceosomal complex / renal system process / 3'-5' RNA helicase activity / U2 snRNP binding / U7 snRNA binding / histone pre-mRNA DCP binding / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / U7 snRNP / Z-decay: degradation of maternal mRNAs by zygotically expressed factors / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / histone pre-mRNA 3'end processing complex / regulation of vitamin D receptor signaling pathway / regulation of mRNA processing / SLBP independent Processing of Histone Pre-mRNAs / SLBP Dependent Processing of Replication-Dependent Histone Pre-mRNAs / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / Deadenylation of mRNA / negative regulation of excitatory postsynaptic potential / intracellular mRNA localization / embryonic cranial skeleton morphogenesis / alternative mRNA splicing, via spliceosome / protein methylation / poly(A) binding / 7-methylguanosine cap hypermethylation / U12-type spliceosomal complex / embryonic brain development / nuclear retinoic acid receptor binding / U1 snRNP binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / methylosome / pre-mRNA binding / ATP-dependent activity, acting on RNA / regulation of mRNA splicing, via spliceosome / C2H2 zinc finger domain binding / pICln-Sm protein complex / positive regulation of mRNA splicing, via spliceosome / RNA splicing, via transesterification reactions / mRNA 3'-end processing / M-decay: degradation of maternal mRNAs by maternally stored factors / sno(s)RNA-containing ribonucleoprotein complex / small nuclear ribonucleoprotein complex / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / host-mediated activation of viral transcription / P granule / positive regulation of vitamin D receptor signaling pathway / snRNP binding / commitment complex / U2-type precatalytic spliceosome / mRNA cis splicing, via spliceosome / oocyte development / telomerase holoenzyme complex / Regulation of gene expression in late stage (branching morphogenesis) pancreatic bud precursor cells / Transport of Mature mRNA derived from an Intron-Containing Transcript / Notch binding / RUNX3 regulates NOTCH signaling / telomerase RNA binding / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U2-type prespliceosome assembly / U2-type spliceosomal complex / nuclear vitamin D receptor binding / NOTCH4 Intracellular Domain Regulates Transcription / U1 snRNP / RNA Polymerase II Transcription Termination / U2 snRNP / U4 snRNP / NOTCH3 Intracellular Domain Regulates Transcription / nuclear-transcribed mRNA catabolic process, nonsense-mediated decay / U2-type prespliceosome / positive regulation of neurogenesis / protein peptidyl-prolyl isomerization / inner cell mass cell proliferation / K63-linked polyubiquitin modification-dependent protein binding / nuclear androgen receptor binding / ubiquitin-ubiquitin ligase activity / precatalytic spliceosome / Notch-HLH transcription pathway / Formation of paraxial mesoderm / lipid biosynthetic process / WD40-repeat domain binding / regulation of alternative mRNA splicing, via spliceosome / positive regulation of transforming growth factor beta receptor signaling pathway / SMAD binding / mitotic G2 DNA damage checkpoint signaling / mRNA 3'-splice site recognition / mRNA Splicing - Minor Pathway / protein kinase inhibitor activity / spliceosomal complex assembly / exploration behavior / spliceosomal tri-snRNP complex assembly 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト)![]() Human adenovirus 2 (ヒトアデノウイルス) | |||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Zhang, X. / Yan, C. / Hang, J. / Finci, I.L. / Lei, J. / Shi, Y. | |||||||||
| 資金援助 | 中国, 2件
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引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2017タイトル: An Atomic Structure of the Human Spliceosome. 著者: Xiaofeng Zhang / Chuangye Yan / Jing Hang / Lorenzo I Finci / Jianlin Lei / Yigong Shi / ![]() 要旨: Mechanistic understanding of pre-mRNA splicing requires detailed structural information on various states of the spliceosome. Here we report the cryo electron microscopy (cryo-EM) structure of the ...Mechanistic understanding of pre-mRNA splicing requires detailed structural information on various states of the spliceosome. Here we report the cryo electron microscopy (cryo-EM) structure of the human spliceosome just before exon ligation (the C complex) at an average resolution of 3.76 Å. The splicing factor Prp17 stabilizes the active site conformation. The step II factor Slu7 adopts an extended conformation, binds Prp8 and Cwc22, and is poised for selection of the 3'-splice site. Remarkably, the intron lariat traverses through a positively charged central channel of RBM22; this unusual organization suggests mechanisms of intron recruitment, confinement, and release. The protein PRKRIP1 forms a 100-Å α helix linking the distant U2 snRNP to the catalytic center. A 35-residue fragment of the ATPase/helicase Prp22 latches onto Prp8, and the quaternary exon junction complex (EJC) recognizes upstream 5'-exon sequences and associates with Cwc22 and the GTPase Snu114. These structural features reveal important mechanistic insights into exon ligation. | |||||||||
| 履歴 |
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| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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| PDBx/mmCIF形式 | 5xjc.cif.gz | 3.1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb5xjc.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
| PDBx/mmJSON形式 | 5xjc.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/xj/5xjc ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/xj/5xjc | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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|---|---|
| 1 |
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要素
-タンパク質 , 18種, 19分子 ACJLNPQRSTUXYbiuvwx
| #1: タンパク質 | 分子量: 273974.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q6P2Q9 | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| #3: タンパク質 | 分子量: 109560.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q15029 | ||||||||
| #10: タンパク質 | 分子量: 100610.008 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9BZJ0 | ||||||||
| #12: タンパク質 | 分子量: 92406.883 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q99459 | ||||||||
| #14: タンパク質 | 分子量: 17032.850 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P41223 | ||||||||
| #16: タンパク質 | 分子量: 26674.447 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9P013 | ||||||||
| #17: タンパク質 | 分子量: 171502.453 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O60306 | ||||||||
| #18: タンパク質 | 分子量: 61770.648 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q13573 | ||||||||
| #19: タンパク質 | 分子量: 18257.805 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y3C6, peptidylprolyl isomerase | ||||||||
| #20: タンパク質 | 分子量: 57280.758 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O43660 | ||||||||
| #21: タンパク質 | 分子量: 300255.312 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9UQ35 | ||||||||
| #24: タンパク質 | 分子量: 21040.176 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9H875 | ||||||||
| #25: タンパク質 | 分子量: 139508.328 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q14562, RNA helicase | ||||||||
| #28: タンパク質 | 分子量: 23686.004 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P14678#37: タンパク質 | | 分子量: 46930.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P38919, RNA helicase#38: タンパク質 | | 分子量: 17301.799 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96A72#39: タンパク質 | | 分子量: 19925.070 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9Y5S9#40: タンパク質 | | 分子量: 76381.992 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O15234 |
-RNA鎖 , 4種, 4分子 BFGH
| #2: RNA鎖 | 分子量: 37254.855 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) |
|---|---|
| #6: RNA鎖 | 分子量: 34404.438 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) |
| #7: RNA鎖 | 分子量: 87977.836 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 由来: (合成) ![]() Human adenovirus 2 (ヒトアデノウイルス) |
| #8: RNA鎖 | 分子量: 60186.445 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: GenBank: 609501 |
-U5 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 DE
| #4: タンパク質 | 分子量: 244823.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75643, RNA helicase |
|---|---|
| #5: タンパク質 | 分子量: 39359.492 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q96DI7 |
-Pre-mRNA-splicing factor ... , 6種, 6分子 IKMOVZ
| #9: タンパク質 | 分子量: 100148.711 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9HCS7 |
|---|---|
| #11: タンパク質 | 分子量: 26163.420 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O75934 |
| #13: タンパク質 | 分子量: 28780.518 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O95926 |
| #15: タンパク質 | 分子量: 46959.555 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9NW64 |
| #22: タンパク質 | 分子量: 105646.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9HCG8 |
| #26: タンパク質 | 分子量: 68510.844 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O95391 |
-Pre-mRNA-processing factor ... , 2種, 5分子 Wqrst
| #23: タンパク質 | 分子量: 65612.180 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O60508 |
|---|---|
| #36: タンパク質 | 分子量: 55245.547 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q9UMS4, RING-type E3 ubiquitin transferase |
-Small nuclear ribonucleoprotein ... , 6種, 12分子 ahcjdkfmelgn
| #27: タンパク質 | 分子量: 13940.308 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62318#29: タンパク質 | 分子量: 13310.653 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62314#30: タンパク質 | 分子量: 13551.928 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62316#31: タンパク質 | 分子量: 9734.171 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62306#32: タンパク質 | 分子量: 10817.601 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62304#33: タンパク質 | 分子量: 8508.084 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P62308 |
|---|
-U2 small nuclear ribonucleoprotein ... , 2種, 2分子 op
| #34: タンパク質 | 分子量: 28456.584 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P09661 |
|---|---|
| #35: タンパク質 | 分子量: 25524.367 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P08579 |
-非ポリマー , 6種, 24分子 










| #41: 化合物 | ChemComp-IHP / | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| #42: 化合物 | ChemComp-GTP / | ||||||
| #43: 化合物 | ChemComp-MG / #44: 化合物 | #45: 化合物 | ChemComp-ZN / #46: 化合物 | |
-詳細
| Has protein modification | Y |
|---|---|
| 配列の詳細 | The UNK reisue between G-1 and G1 is added intentionally as per authors request to fill in the ...The UNK reisue between G-1 and G1 is added intentionally as per authors request to fill in the cleavage by RNA splicing. |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: human C* spliceosome / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#40 / 由来: NATURAL |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
| 緩衝液 | pH: 7.5 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / アライメント法: BASIC |
| 試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN / 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
| 撮影 | 平均露光時間: 0.25 sec. / 電子線照射量: 50 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 5 / 実像数: 7308 |
| 電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルター 上限: 10 eV / エネルギーフィルター 下限: 0 eV / 色収差補正装置: -10 |
| 画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 32 / 利用したフレーム数/画像: 2-32 |
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解析
| EMソフトウェア |
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 100085 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||
| 精密化 | 最高解像度: 3.6 Å |
ムービー
コントローラー
万見について




Homo sapiens (ヒト)
Human adenovirus 2 (ヒトアデノウイルス)
中国, 2件
引用
UCSF Chimera









PDBj





















































