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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 5k0y | |||||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | m48S late-stage initiation complex, purified from rabbit reticulocytes lysates, displaying eIF2 ternary complex and eIF3 i and g subunits relocated to the intersubunit face | |||||||||||||||||||||||||||||||||
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![]() | TRANSLATION / eukaryotic translation initiation / ribosome / eIF3 peripheral subunits / cryo-EM | |||||||||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() viral translational termination-reinitiation / eukaryotic translation initiation factor 3 complex, eIF3m / eukaryotic translation initiation factor 2 complex / eukaryotic translation initiation factor 3 complex / formation of cytoplasmic translation initiation complex / eukaryotic 43S preinitiation complex / formation of translation preinitiation complex / eukaryotic 48S preinitiation complex / ribosomal subunit / protein-synthesizing GTPase ...viral translational termination-reinitiation / eukaryotic translation initiation factor 3 complex, eIF3m / eukaryotic translation initiation factor 2 complex / eukaryotic translation initiation factor 3 complex / formation of cytoplasmic translation initiation complex / eukaryotic 43S preinitiation complex / formation of translation preinitiation complex / eukaryotic 48S preinitiation complex / ribosomal subunit / protein-synthesizing GTPase / Formation of the ternary complex, and subsequently, the 43S complex / laminin receptor activity / Ribosomal scanning and start codon recognition / Translation initiation complex formation / Formation of a pool of free 40S subunits / ubiquitin ligase inhibitor activity / positive regulation of signal transduction by p53 class mediator / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / 90S preribosome / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / phagocytic cup / regulation of translational fidelity / ribosomal small subunit export from nucleus / rough endoplasmic reticulum / laminin binding / translation regulator activity / gastrulation / MDM2/MDM4 family protein binding / translation initiation factor activity / cytosolic ribosome / class I DNA-(apurinic or apyrimidinic site) endonuclease activity / DNA-(apurinic or apyrimidinic site) lyase / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / positive regulation of apoptotic signaling pathway / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of SSU-rRNA / small-subunit processome / translational initiation / spindle / cytoplasmic stress granule / rRNA processing / rhythmic process / positive regulation of canonical Wnt signaling pathway / regulation of translation / ribosome binding / virus receptor activity / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / small ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic small ribosomal subunit / perikaryon / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / cell differentiation / tRNA binding / mitochondrial inner membrane / postsynaptic density / rRNA binding / structural constituent of ribosome / ribosome / translation / ribonucleoprotein complex / cell division / DNA repair / mRNA binding / GTPase activity / apoptotic process / synapse / dendrite / centrosome / GTP binding / nucleolus / perinuclear region of cytoplasm / Golgi apparatus / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / nucleus / membrane / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | |||||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.8 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Simonetti, A. / Brito Querido, J. / Myasnikov, A.G. / Mancera-Martinez, E. / Renaud, A. / Kuhn, L. / Hashem, Y. | |||||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: eIF3 Peripheral Subunits Rearrangement after mRNA Binding and Start-Codon Recognition. 著者: Angelita Simonetti / Jailson Brito Querido / Alexander G Myasnikov / Eder Mancera-Martinez / Adeline Renaud / Lauriane Kuhn / Yaser Hashem / ![]() 要旨: mRNA translation initiation in eukaryotes requires the cooperation of a dozen eukaryotic initiation factors (eIFs) forming several complexes, which leads to mRNA attachment to the small ribosomal ...mRNA translation initiation in eukaryotes requires the cooperation of a dozen eukaryotic initiation factors (eIFs) forming several complexes, which leads to mRNA attachment to the small ribosomal 40S subunit, mRNA scanning for start codon, and accommodation of initiator tRNA at the 40S P site. eIF3, composed of 13 subunits, 8 core (a, c, e, f, h, l, k, and m) and 5 peripheral (b, d, g, i, and j), plays a central role during this process. Here we report a cryo-electron microscopy structure of a mammalian 48S initiation complex at 5.8 Å resolution. It shows the relocation of subunits eIF3i and eIF3g to the 40S intersubunit face on the GTPase binding site, at a late stage in initiation. On the basis of a previous study, we demonstrate the relocation of eIF3b to the 40S intersubunit face, binding below the eIF2-Met-tRNAi(Met) ternary complex upon mRNA attachment. Our analysis reveals the deep rearrangement of eIF3 and unravels the molecular mechanism underlying eIF3 function in mRNA scanning and timing of ribosomal subunit joining. | |||||||||||||||||||||||||||||||||
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その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.3 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 163.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 286.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-RNA鎖 , 3種, 3分子 NAF
#1: RNA鎖 | 分子量: 24231.510 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: tRNAiMet / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 572789.812 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
#3: RNA鎖 | 分子量: 9603.775 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: Beta-Globin mRNA / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
-タンパク質 , 1種, 1分子 P
#4: タンパク質 | 分子量: 30633.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
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+Ribosomal protein ... , 26種, 26分子 GHJKLQRUVWXZacefghijklmnpt
-40S ribosomal protein ... , 7種, 7分子 IYboqrs
#7: タンパク質 | 分子量: 29658.920 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
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#21: タンパク質 | 分子量: 9480.186 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
#24: タンパク質 | 分子量: 8896.102 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
#37: タンパク質 | 分子量: 23902.871 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
#39: タンパク質 | 分子量: 27471.535 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
#40: タンパク質 | 分子量: 13766.122 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
#41: タンパク質 | 分子量: 15188.970 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
-Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit ... , 3種, 3分子 MOT
#11: タンパク質・ペプチド | 分子量: 4124.495 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
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#12: タンパク質 | 分子量: 8675.697 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
#16: タンパク質 | 分子量: 37039.328 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
-Eukaryotic initiation factor 2 ... , 2種, 2分子 Sd
#15: タンパク質 | 分子量: 45862.441 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
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#26: タンパク質・ペプチド | 分子量: 2103.416 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
-詳細
Has protein modification | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: m48S late-stage initiation complex, purified from rabbit reticulocytes lysates, displaying eIF2 ternary complex and eIF3 i and g subunits relocated to the intersubunit face タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: MULTIPLE SOURCES |
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分子量 | 値: 2 MDa / 実験値: NO |
緩衝液 | pH: 7.6 |
試料 | 濃度: 0.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 59000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 4500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 0.01 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 1.5 sec. / 電子線照射量: 24 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 5700 |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 14 µm / 動画フレーム数/画像: 7 / 利用したフレーム数/画像: 2-8 |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 5.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 475000 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / クラス平均像の数: 10 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 4KZY Accession code: 4KZY / Source name: PDB / タイプ: experimental model |