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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4adv | ||||||
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タイトル | Structure of the E. coli methyltransferase KsgA bound to the E. coli 30S ribosomal subunit | ||||||
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![]() | TRANSLATION / RIBOSOME BIOGENESIS / SMALL RIBOSOMAL SUBUNIT | ||||||
機能・相同性 | ![]() 16S rRNA (adenine1518-N6/adenine1519-N6)-dimethyltransferase / 16S rRNA (adenine(1518)-N(6)/adenine(1519)-N(6))-dimethyltransferase activity / rRNA (adenine-N6,N6-)-dimethyltransferase activity / rRNA base methylation / rRNA methylation / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / ribosomal small subunit binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing ...16S rRNA (adenine1518-N6/adenine1519-N6)-dimethyltransferase / 16S rRNA (adenine(1518)-N(6)/adenine(1519)-N(6))-dimethyltransferase activity / rRNA (adenine-N6,N6-)-dimethyltransferase activity / rRNA base methylation / rRNA methylation / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / ribosomal small subunit binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / four-way junction DNA binding / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / positive regulation of RNA splicing / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA endonuclease activity / maturation of SSU-rRNA / transcription antitermination / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / mRNA 5'-UTR binding / rRNA processing / ribosome biogenesis / regulation of translation / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / double-stranded DNA binding / small ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / structural constituent of ribosome / ribosome / translation / response to antibiotic / mRNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 13.5 Å | ||||||
![]() | Boehringer, D. / O'Farrell, H.C. / Rife, J.P. / Ban, N. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: Structural insights into methyltransferase KsgA function in 30S ribosomal subunit biogenesis. 著者: Daniel Boehringer / Heather C O'Farrell / Jason P Rife / Nenad Ban / ![]() ![]() 要旨: The assembly of the ribosomal subunits is facilitated by ribosome biogenesis factors. The universally conserved methyltransferase KsgA modifies two adjacent adenosine residues in the 3'-terminal ...The assembly of the ribosomal subunits is facilitated by ribosome biogenesis factors. The universally conserved methyltransferase KsgA modifies two adjacent adenosine residues in the 3'-terminal helix 45 of the 16 S ribosomal RNA (rRNA). KsgA recognizes its substrate adenosine residues only in the context of a near mature 30S subunit and is required for the efficient processing of the rRNA termini during ribosome biogenesis. Here, we present the cryo-EM structure of KsgA bound to a nonmethylated 30S ribosomal subunit. The structure reveals that KsgA binds to the 30S platform with the catalytic N-terminal domain interacting with substrate adenosine residues in helix 45 and the C-terminal domain making extensive contacts to helix 27 and helix 24. KsgA excludes the penultimate rRNA helix 44 from adopting its position in the mature 30S subunit, blocking the formation of the decoding site and subunit joining. We suggest that the activation of methyltransferase activity and subsequent dissociation of KsgA control conformational changes in helix 44 required for final rRNA processing and translation initiation. | ||||||
履歴 |
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ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 1.1 MB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 901.2 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 131.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 202.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-30S RIBOSOMAL PROTEIN ... , 20種, 20分子 BCDEFGHIJKLMNOPQRSTU
#2: タンパク質 | 分子量: 26650.475 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#3: タンパク質 | 分子量: 25900.117 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#4: タンパク質 | 分子量: 23383.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#5: タンパク質 | 分子量: 17498.203 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#6: タンパク質 | 分子量: 15727.512 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#7: タンパク質 | 分子量: 19923.959 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#8: タンパク質 | 分子量: 14015.361 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#9: タンパク質 | 分子量: 14755.074 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#10: タンパク質 | 分子量: 11755.597 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#11: タンパク質 | 分子量: 13739.778 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#12: タンパク質 | 分子量: 13636.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#13: タンパク質 | 分子量: 12997.271 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#14: タンパク質 | 分子量: 11475.364 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#15: タンパク質 | 分子量: 10319.882 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#16: タンパク質 | 分子量: 9207.572 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#17: タンパク質 | 分子量: 9593.296 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#18: タンパク質 | 分子量: 8874.276 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#19: タンパク質 | 分子量: 10324.160 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#20: タンパク質 | 分子量: 9577.268 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
#21: タンパク質 | 分子量: 8524.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
-RNA鎖 / タンパク質 / 非ポリマー , 3種, 141分子 AV

#1: RNA鎖 | 分子量: 499690.031 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
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#22: タンパク質 | 分子量: 27988.273 Da / 分子数: 1 / Fragment: RESIDUES 17-268 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() 参照: UniProt: P06992, 16S rRNA (adenine1518-N6/adenine1519-N6)-dimethyltransferase |
#23: 水 | ChemComp-HOH / |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: E. COLI METHYLTRANSFERASE KSGA BOUND TO THE E. COLI 30S RIBOSOMAL SUBUNIT タイプ: COMPLEX |
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緩衝液 | 名称: 40 MM KCL, 4MM MGCL2, 20 MM HEPES/KOH PH 7. 6, 6 MM 2- MERCAPTOETHANOL pH: 7.6 詳細: 40 MM KCL, 4MM MGCL2, 20 MM HEPES/KOH PH 7. 6, 6 MM 2- MERCAPTOETHANOL |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: HOLEY CARBON |
急速凍結 | 装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: ETHANE 詳細: VITRIFICATION 1 -- CRYOGEN- ETHANE, INSTRUMENT- PLUNGER, |
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電子顕微鏡撮影
顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI 20 詳細: SEMI-AUTOMATIC DATA ACQUISITION WITH SERIAL EM SCRIPT |
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電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 62000 X / 倍率(補正後): 82000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 4000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 2000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 20 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) |
放射波長 | 相対比: 1 |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: PER IMAGE, CTFFIND3 | |||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 手法: ANGULAR RECONSTITUTION, PROJECTION MATCHING / 解像度: 13.5 Å / 粒子像の数: 23343 / ピクセルサイズ(実測値): 3.07 Å 詳細: 30S RIBOSOMAL SUBUNIT HEAD AND BODY WERE FITTED SEPARATELY AS RIGID BODIES. SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA FROM EMDB EMD-2017. (DEPOSITION ID: 10519). 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL / Target criteria: Cross-correlation coefficient / 詳細: METHOD--RIGID BODY REFINEMENT PROTOCOL--XRAY | |||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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精密化 | 最高解像度: 13.5 Å | |||||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 13.5 Å
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