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万見
- PDB-2w4v: Isometrically contracting insect asynchronous flight muscle quick... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 2w4v
タイトルIsometrically contracting insect asynchronous flight muscle quick frozen after a quick release step
要素
  • MYOSIN ESSENTIAL LIGHT CHAIN, STRIATED ADDUCTOR MUSCLE
  • MYOSIN HEAVY CHAIN, STRIATED MUSCLE
  • MYOSIN REGULATORY LIGHT CHAIN, STRIATED ADDUCTOR MUSCLE
キーワードCONTRACTILE PROTEIN / TROPOMYOSIN / LIGHT CHAINS / ACTIN-BINDING / ISOMETRIC CONTRACTION / THIN FILAMENT / MOTOR PROTEIN / THICK FILAMENT / MUSCLE PROTEIN
機能・相同性
機能・相同性情報


muscle myosin complex / myosin filament / myosin II complex / myosin complex / sarcomere organization / microfilament motor activity / myofibril / muscle contraction / actin filament binding / calmodulin binding ...muscle myosin complex / myosin filament / myosin II complex / myosin complex / sarcomere organization / microfilament motor activity / myofibril / muscle contraction / actin filament binding / calmodulin binding / calcium ion binding / ATP binding
類似検索 - 分子機能
: / EF-hand domain / DNA repair protein XRCC4-like, C-terminal / Myosin tail / Myosin tail / Myosin N-terminal SH3-like domain / Myosin S1 fragment, N-terminal / : / Myosin, N-terminal, SH3-like / Myosin N-terminal SH3-like domain profile. ...: / EF-hand domain / DNA repair protein XRCC4-like, C-terminal / Myosin tail / Myosin tail / Myosin N-terminal SH3-like domain / Myosin S1 fragment, N-terminal / : / Myosin, N-terminal, SH3-like / Myosin N-terminal SH3-like domain profile. / Short calmodulin-binding motif containing conserved Ile and Gln residues. / IQ motif, EF-hand binding site / Myosin head, motor domain / Myosin head (motor domain) / Myosin motor domain profile. / Myosin. Large ATPases. / IQ motif profile. / Kinesin motor domain superfamily / EF-hand domain pair / EF-hand, calcium binding motif / EF-Hand 1, calcium-binding site / EF-hand calcium-binding domain. / EF-hand calcium-binding domain profile. / EF-hand domain / EF-hand domain pair / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
Myosin essential light chain, striated adductor muscle / Myosin regulatory light chain, striated adductor muscle / Myosin heavy chain, striated muscle
類似検索 - 構成要素
生物種ARGOPECTEN IRRADIANS (無脊椎動物)
手法電子顕微鏡法 / 電子線トモグラフィー法 / 解像度: 35 Å
データ登録者Wu, S. / Liu, J. / Reedy, M.C. / Tregear, R.T. / Winkler, H. / Franzini-Armstrong, C. / Sasaki, H. / Lucaveche, C. / Goldman, Y.E. / Reedy, M.K. / Taylor, K.A.
引用
ジャーナル: PLoS One / 年: 2012
タイトル: Structural changes in isometrically contracting insect flight muscle trapped following a mechanical perturbation.
著者: Shenping Wu / Jun Liu / Mary C Reedy / Robert J Perz-Edwards / Richard T Tregear / Hanspeter Winkler / Clara Franzini-Armstrong / Hiroyuki Sasaki / Carmen Lucaveche / Yale E Goldman / Michael ...著者: Shenping Wu / Jun Liu / Mary C Reedy / Robert J Perz-Edwards / Richard T Tregear / Hanspeter Winkler / Clara Franzini-Armstrong / Hiroyuki Sasaki / Carmen Lucaveche / Yale E Goldman / Michael K Reedy / Kenneth A Taylor /
要旨: The application of rapidly applied length steps to actively contracting muscle is a classic method for synchronizing the response of myosin cross-bridges so that the average response of the ensemble ...The application of rapidly applied length steps to actively contracting muscle is a classic method for synchronizing the response of myosin cross-bridges so that the average response of the ensemble can be measured. Alternatively, electron tomography (ET) is a technique that can report the structure of the individual members of the ensemble. We probed the structure of active myosin motors (cross-bridges) by applying 0.5% changes in length (either a stretch or a release) within 2 ms to isometrically contracting insect flight muscle (IFM) fibers followed after 5-6 ms by rapid freezing against a liquid helium cooled copper mirror. ET of freeze-substituted fibers, embedded and thin-sectioned, provides 3-D cross-bridge images, sorted by multivariate data analysis into ~40 classes, distinct in average structure, population size and lattice distribution. Individual actin subunits are resolved facilitating quasi-atomic modeling of each class average to determine its binding strength (weak or strong) to actin. ~98% of strong-binding acto-myosin attachments present after a length perturbation are confined to "target zones" of only two actin subunits located exactly midway between successive troponin complexes along each long-pitch helical repeat of actin. Significant changes in the types, distribution and structure of actin-myosin attachments occurred in a manner consistent with the mechanical transients. Most dramatic is near disappearance, after either length perturbation, of a class of weak-binding cross-bridges, attached within the target zone, that are highly likely to be precursors of strong-binding cross-bridges. These weak-binding cross-bridges were originally observed in isometrically contracting IFM. Their disappearance following a quick stretch or release can be explained by a recent kinetic model for muscle contraction, as behaviour consistent with their identification as precursors of strong-binding cross-bridges. The results provide a detailed model for contraction in IFM that may be applicable to contraction in other types of muscle.
#1: ジャーナル: J Struct Biol / 年: 2009
タイトル: Methods for identifying and averaging variable molecular conformations in tomograms of actively contracting insect flight muscle.
著者: Shenping Wu / Jun Liu / Mary C Reedy / Hanspeter Winkler / Michael K Reedy / Kenneth A Taylor /
要旨: During active muscle contraction, tension is generated through many simultaneous, independent interactions between the molecular motor myosin and the actin filaments. The ensemble of myosin motors ...During active muscle contraction, tension is generated through many simultaneous, independent interactions between the molecular motor myosin and the actin filaments. The ensemble of myosin motors displays heterogeneous conformations reflecting different mechanochemical steps of the ATPase pathway. We used electron tomography of actively contracting insect flight muscle fast-frozen, freeze substituted, Araldite embedded, thin-sectioned and stained, to obtain 3D snapshots of the multiplicity of actin-attached myosin structures. We describe procedures for alignment of the repeating lattice of sub-volumes (38.7 nm cross-bridge repeats bounded by troponin) and multivariate data analysis to identify self-similar repeats for computing class averages. Improvements in alignment and classification of repeat sub-volumes reveals (for the first time in active muscle images) the helix of actin subunits in the thin filament and the troponin density with sufficient clarity that a quasiatomic model of the thin filament can be built into the class averages independent of the myosin cross-bridges. We show how quasiatomic model building can identify both strong and weak myosin attachments to actin. We evaluate the accuracy of image classification to enumerate the different types of actin-myosin attachments.
履歴
登録2008年12月2日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02010年9月15日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12012年7月18日Group: Database references / Version format compliance
改定 1.22017年1月25日Group: Database references
改定 1.32017年4月19日Group: Other
改定 1.42019年10月23日Group: Data collection / Other / カテゴリ: cell / em_image_scans / Item: _cell.Z_PDB
改定 1.52024年5月8日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond / database_2
Item: _database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • マップデータ: EMDB-1584
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • マップデータ: EMDB-1585
  • Jmolによる作画
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  • PDB-2w4u との合成表示
  • Jmolによる作画
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  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-1585
  • + PDB-2w4u
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
C: MYOSIN HEAVY CHAIN, STRIATED MUSCLE
Y: MYOSIN REGULATORY LIGHT CHAIN, STRIATED ADDUCTOR MUSCLE
Z: MYOSIN ESSENTIAL LIGHT CHAIN, STRIATED ADDUCTOR MUSCLE


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)127,4713
ポリマ－127,4713
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1
手法PISA
モデル数27

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要素

#1: タンパク質 MYOSIN HEAVY CHAIN, STRIATED MUSCLE / MYOSIN S1


分子量: 94843.883 Da / 分子数: 1 / 断片: RESIDUES 5-835 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: MYOSIN S1 HEAVY CHAIN / 由来: (天然) ARGOPECTEN IRRADIANS (無脊椎動物) / 参照: UniProt: P24733
#2: タンパク質 MYOSIN REGULATORY LIGHT CHAIN, STRIATED ADDUCTOR MUSCLE / MYOSIN S1 / R-LC


分子量: 15575.700 Da / 分子数: 1 / 断片: RESIDUES 16-151 / 由来タイプ: 天然
詳細: MYOSIN REGULATORY LIGHT CHAIN, RLC, STRIATED ADDUCTOR MUSCLE
由来: (天然) ARGOPECTEN IRRADIANS (無脊椎動物) / 参照: UniProt: P13543
#3: タンパク質 MYOSIN ESSENTIAL LIGHT CHAIN, STRIATED ADDUCTOR MUSCLE / MYOSIN S1 / E-LC


分子量: 17051.912 Da / 分子数: 1 / 断片: RESIDUES 5-155 / 由来タイプ: 天然
詳細: MYOSIN ESSENTIAL LIGHT CHAIN, ELC, STRIATED ADDUCTOR MUSCLE
由来: (天然) ARGOPECTEN IRRADIANS (無脊椎動物) / 参照: UniProt: P07291
配列の詳細92 IDENTITY TO P24733 100 IDENTITY TO P13543 100 IDENTITY TO P07291

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: TISSUE / ３次元再構成法: 電子線トモグラフィー法

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試料調製

構成要素名称: INSECT FIBRILLAR FLIGHT MUSCLE / タイプ: TISSUE
詳細: THIS SPECIMEN IS OBTAINED FROM A QUICK FROZEN, ISOMETRICALLY CONTRACTING ASYNCHRONOUS INSECT FLIGHT MUSCLE THAT HAS BEEN FREEZE SUBSTITUTED, PLASTIC EMBEDDED, AND THIN SECTIONED. THE FIBERS ...詳細: THIS SPECIMEN IS OBTAINED FROM A QUICK FROZEN, ISOMETRICALLY CONTRACTING ASYNCHRONOUS INSECT FLIGHT MUSCLE THAT HAS BEEN FREEZE SUBSTITUTED, PLASTIC EMBEDDED, AND THIN SECTIONED. THE FIBERS FOR THIS STUDY WERE SUBJECTED TO MECHANICAL TRANSIENTS. FOR THE QUICK RELEASE,THE FIBER WAS RELEASED 9 NM PER HALF-SARCOMERE IN 2 MS AND THE FREEZING IMPACT - OCC-6 MS LATER.
緩衝液名称: 20 MM MOPS BUFFER, 5 MM NAN3, AND MGCL2, ATP, CACL2, AND EGTA IN VARYING MILLIMOLAR CONCENTRATIONS
詳細: 20 MM MOPS BUFFER, 5 MM NAN3, AND MGCL2, ATP, CACL2, AND EGTA IN VARYING MILLIMOLAR CONCENTRATIONS
試料包埋: YES / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: NO
試料支持詳細: CARBON
急速凍結装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: HELIUM
詳細: SMASH AGAINST A LIQUID HELIUM COOLED GOLD COATED COPPER MIRROR

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電子顕微鏡撮影

顕微鏡モデル: FEI/PHILIPS CM300FEG/T
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm
試料ホルダ傾斜角・最大: 72 ° / 傾斜角・最小: -72 °
撮影フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F224 (2k x 2k)
放射波長相対比: 1

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解析

対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF
詳細: NOTE THAT OUR LOWEST RESOLUTION DATA IS AT INVERSE 1 MICRON. NUMBER OF FOURIER COEFFICIENTS IS ALMOST A HALF MILLION. THESE COORDINATES WERE FITTED TO AVERAGED SUBVOLUMES OBTAINED FROM A DUAL ...詳細: NOTE THAT OUR LOWEST RESOLUTION DATA IS AT INVERSE 1 MICRON. NUMBER OF FOURIER COEFFICIENTS IS ALMOST A HALF MILLION. THESE COORDINATES WERE FITTED TO AVERAGED SUBVOLUMES OBTAINED FROM A DUAL AXIS TOMOGRAM. THE FITTING WAS DONE MANUALLY USING THE CRYSTALLOGRAPHIC MODEL FITTING PROGRAM O. THERE ARE 27 MODELS.
対称性のタイプ: POINT
精密化最高解像度: 35 Å
精密化ステップサイクル: LAST / 最高解像度: 35 Å
タンパク質核酸リガンド溶媒全体
原子数8501 0 0 0 8501

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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