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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-9564 | ||||||||||||||||||
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タイトル | RNA dependent RNA polymerase ,vp4,dsRNA | ||||||||||||||||||
![]() | the structure of RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) complexes within the capsid at 3.9-%u212B resolution using a 200 kV TEM | ||||||||||||||||||
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![]() | structural classification / TRANSFERASE-RNA complex | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() viral genome replication / RNA-directed RNA polymerase / RNA-directed RNA polymerase activity / RNA binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() | ||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | ||||||||||||||||||
![]() | Li X / Zhou N | ||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Near-Atomic Resolution Structure Determination of a Cypovirus Capsid and Polymerase Complex Using Cryo-EM at 200kV. 著者: Xiaowu Li / Niyun Zhou / Wenyuan Chen / Bin Zhu / Xurong Wang / Bin Xu / Jiawei Wang / Hongrong Liu / Lingpeng Cheng / ![]() 要旨: Single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM) allows the high-resolution structural determination of biological assemblies in a near-native environment. However, all high-resolution (better than ...Single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM) allows the high-resolution structural determination of biological assemblies in a near-native environment. However, all high-resolution (better than 3.5Å) cryo-EM structures reported to date were obtained by using 300kV transmission electron microscopes (TEMs). We report here the structures of a cypovirus capsid of 750-Å diameter at 3.3-Å resolution and of RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) complexes within the capsid at 3.9-Å resolution using a 200-kV TEM. The newly resolved structure revealed conformational changes of two subdomains in the RdRp. These conformational changes, which were involved in RdRp's switch from non-transcribing to transcribing mode, suggest that the RdRp may facilitate the unwinding of genomic double-stranded RNA. The possibility of 3-Å resolution structural determinations for biological assemblies of relatively small sizes using cryo-EM at 200kV was discussed. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 1.2 GB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 17.9 KB 17.9 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 244.6 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 6.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 909.3 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 908.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 9.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 11.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
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注釈 | the structure of RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) complexes within the capsid at 3.9-%u212B resolution using a 200 kV TEM | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.932 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : RNA dependent RNA polymerase ,VP4,dsRNA
全体 | 名称: RNA dependent RNA polymerase ,VP4,dsRNA |
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要素 |
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-超分子 #1: RNA dependent RNA polymerase ,VP4,dsRNA
超分子 | 名称: RNA dependent RNA polymerase ,VP4,dsRNA / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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-超分子 #2: RNA dependent RNA polymerase
超分子 | 名称: RNA dependent RNA polymerase / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1 |
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-超分子 #3: VP4
超分子 | 名称: VP4 / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #2 |
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-超分子 #4: dsRNA
超分子 | 名称: dsRNA / タイプ: complex / ID: 4 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3 |
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-超分子 #5: dsRNA
超分子 | 名称: dsRNA / タイプ: complex / ID: 5 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #4 |
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-分子 #1: RNA-dependent RNA polymerase
分子 | 名称: RNA-dependent RNA polymerase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 139.077281 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MLPNTKLHNT IFSETRKFTR ESFKEIEHLT ARLANDSVAR HDFLFNTSIA LISDYSGEDS NGNQLQATIT IPNEIINPKE YDPSDYPLA EDESFFKQGH KYDYLVTFRA GSLTNTYEPK TKMYKLHAAL DKLMHVRQRK SRFADLWREL CAVIASLDVW Y QTTNYPLR ...文字列: MLPNTKLHNT IFSETRKFTR ESFKEIEHLT ARLANDSVAR HDFLFNTSIA LISDYSGEDS NGNQLQATIT IPNEIINPKE YDPSDYPLA EDESFFKQGH KYDYLVTFRA GSLTNTYEPK TKMYKLHAAL DKLMHVRQRK SRFADLWREL CAVIASLDVW Y QTTNYPLR TYVKLLFHRG DEFPFYESPS QDRIIFNDKS VASILPTFVY TCCQVGTAIM SGILTHVESI VAMNHFLHCA KD SYIDEKL KIKGIGRSWY QEALHNVGQA TVPVWSQFNE VIGHRRKSTS EPHFVSSTFI SLRAKRAELL YPEFNAYINR AIQ LSKTQN DVANYYAACR AMTNDGTFLA TLTELSLDAA VFPRIEQRLV TRPAVLMSNT RHESLKQKYT NGVGSIAQSY LSSF TDEIA KRVNGIHHDE AWLNFLTTSS PGRKLTEIEK LEVGGDVAAW SNSRIVMQAV FAREYRTPER IFKSLKAPIK LVERQ QSDR RQRAISGLDN DRLFLSFMPY TIGKQIYELN DNAAQGKQAG NAFDIGEMLY WTSQRNVLLS SIDVAGMDAS VTTNTK DIY NTFVLDVASK CTVPRFGPYY AKNMEVFEVG KRQSQVRYVN AAWQACALEA ADSQTSTSYE SEIFGQVKNA EGTYPSG RA DTSTHHTVLL QGLVRGNELK RASDGKNSCL ATIKILGDDI MEIFQGSESD TYDHAMSNAN ILNESGFATT AELSQNSI V LLQQLVVNGT FWGFADRISL WTREDTKDIG RLNLAMMELN ALIDDLVFRV RRPEGLKMLG FFCGAICLRR FTLSVDNKL YDSTYNNLSK YMTLIKYDKN PDFDSTLMSL ILPLAWLFMP RGGEYPAYPF ERRDGTFTED ESMFTARGAY KRRLLYDVSN IREMIQQNS MALDDDLLHE YGFTGALLLI DLNILDLIDE VKKEDISPVK VSELATSLEQ LGKLGEREKS RRAASDLKIR G HALSNDIV YGYGLQEKIQ KSAMATKETT VQSKRVSSRL HDVIVAKTRD YKISTIPADA LRLHEFEVED VTVDLLPHAK HT SYSSLAY NMSFGSDGWF AFALLGGLDR SANLLRLDVA SIRGNYHKFS YDDPVFKQGY KIYKSDATLL NDFFTAISAG PKE QGILLR AFAYYSLYGN VEYHYVLSPR QLFFLSDNPV SAERLVRIPP KYYVSTQCRA LYNIFSYLHI LRSIANNWGK RLKM VLHPG LIAYVRGTSQ GAILPEADNV UniProtKB: RNA-directed RNA polymerase |
-分子 #2: VP4 protein
分子 | 名称: VP4 protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 63.734707 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() |
配列 | 文字列: MFAIDPLKHP KLYEEYGLYL RPHQINQEIK PTTIKKKELA PTIRSIKYAS LIHSMLAKHA ARHNGTLINP RMYADMITLG NTKVTVTKG TPKAQIDTLK MNGLTVVSKS RRNNKKKPVS DTTASTDETT DDVVTYKALT EMSTLVESFR LPSGLTLIVF D DEKYQSLI ...文字列: MFAIDPLKHP KLYEEYGLYL RPHQINQEIK PTTIKKKELA PTIRSIKYAS LIHSMLAKHA ARHNGTLINP RMYADMITLG NTKVTVTKG TPKAQIDTLK MNGLTVVSKS RRNNKKKPVS DTTASTDETT DDVVTYKALT EMSTLVESFR LPSGLTLIVF D DEKYQSLI PDYINQLITY TQPHIIPTWQ GITDFSDTYL RSYFKRPFEL TASNLAVPQK HNLSPITRSI FNNTGREDAI IR KLYGYGE YVFIKYEGCL ITWTGLYGAV TMMVNLPKRD LGLDVGDDFL KEYKKLLFHG VITDAIPSGI SAKSTVMRIS PHK MMNPSG GALAVLSKYI EAVVSTNVIN ATLVVYAEKG AGKTSFLSTY AQQLSLASGQ IVGHLSSDAY GRWLAKNKDV EEPS FEYDY VLSLDTDDNE SYYEQKASEL LTSHGISELS QYELLSVRRK VKMMNEMDEI LIAQLDNANT HSERNFYYMV STGKN TPRT LIVEGHFNAQ DATIARTDTT ILLRTINDTT QAMRDRQRSG VVQLFLRDTY YRLLPSLHTT VYPFEMLESI KRWKWV H UniProtKB: VP4 protein |
-分子 #3: RNA (42-MER)
分子 | 名称: RNA (42-MER) / タイプ: rna / ID: 3 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 13.781683 KDa |
配列 | 文字列: AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AA |
-分子 #4: RNA (42-MER)
分子 | 名称: RNA (42-MER) / タイプ: rna / ID: 4 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 12.814002 KDa |
配列 | 文字列: UUUUUUUUUU UUUUUUUUUU UUUUUUUUUU UUUUUUUUUU UU |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: NITROGEN |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 平均電子線量: 20.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | ![]() モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |