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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8124 | ||||||||||||
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タイトル | Structure of the yeast Kluyveromyces lactis small ribosomal subunit in complex with the cricket paralysis virus IRES. | ||||||||||||
マップデータ | None | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | IRES / ribosome / small / subunit | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 90S preribosome / endonucleolytic cleavage to generate mature 3'-end of SSU-rRNA from (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / translation regulator activity / endonucleolytic cleavage in ITS1 to separate SSU-rRNA from 5.8S rRNA and LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rescue of stalled ribosome / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of SSU-rRNA / small-subunit processome / protein kinase C binding / positive regulation of apoptotic signaling pathway ...90S preribosome / endonucleolytic cleavage to generate mature 3'-end of SSU-rRNA from (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / translation regulator activity / endonucleolytic cleavage in ITS1 to separate SSU-rRNA from 5.8S rRNA and LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / rescue of stalled ribosome / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of SSU-rRNA / small-subunit processome / protein kinase C binding / positive regulation of apoptotic signaling pathway / modification-dependent protein catabolic process / protein tag activity / rRNA processing / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosome binding / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / rRNA binding / ribosome / protein ubiquitination / structural constituent of ribosome / positive regulation of protein phosphorylation / ribonucleoprotein complex / translation / mRNA binding / ubiquitin protein ligase binding / nucleolus / RNA binding / zinc ion binding / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Kluyveromyces lacti (酵母) / Kluyveromyces lactis (酵母) / Cricket paralysis virus (ウイルス) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Murray J / Savva CG | ||||||||||||
資金援助 | 英国, 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2016 タイトル: Structural characterization of ribosome recruitment and translocation by type IV IRES. 著者: Jason Murray / Christos G Savva / Byung-Sik Shin / Thomas E Dever / V Ramakrishnan / Israel S Fernández / 要旨: Viral mRNA sequences with a type IV IRES are able to initiate translation without any host initiation factors. Initial recruitment of the small ribosomal subunit as well as two translocation steps ...Viral mRNA sequences with a type IV IRES are able to initiate translation without any host initiation factors. Initial recruitment of the small ribosomal subunit as well as two translocation steps before the first peptidyl transfer are essential for the initiation of translation by these mRNAs. Using electron cryomicroscopy (cryo-EM) we have structurally characterized at high resolution how the Cricket Paralysis Virus Internal Ribosomal Entry Site (CrPV-IRES) binds the small ribosomal subunit (40S) and the translocation intermediate stabilized by elongation factor 2 (eEF2). The CrPV-IRES restricts tvhe otherwise flexible 40S head to a conformation compatible with binding the large ribosomal subunit (60S). Once the 60S is recruited, the binary CrPV-IRES/80S complex oscillates between canonical and rotated states (Fernández et al., 2014; Koh et al., 2014), as seen for pre-translocation complexes with tRNAs. Elongation factor eEF2 with a GTP analog stabilizes the ribosome-IRES complex in a rotated state with an extra ~3 degrees of rotation. Key residues in domain IV of eEF2 interact with pseudoknot I (PKI) of the CrPV-IRES stabilizing it in a conformation reminiscent of a hybrid tRNA state. The structure explains how diphthamide, a eukaryotic and archaeal specific post-translational modification of a histidine residue of eEF2, is involved in translocation. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_8124.map.gz | 78.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-8124-v30.xml emd-8124.xml | 55.6 KB 55.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_8124_fsc.xml | 9.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_8124.png | 139.2 KB | ||
マスクデータ | emd_8124_msk_1.map emd_8124_msk_2.map | 83.7 MB 83.7 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-8124.cif.gz | 11.5 KB | ||
その他 | emd_8124_additional_1.map.gz emd_8124_additional_2.map.gz emd_8124_half_map_1.map.gz emd_8124_half_map_2.map.gz | 11.2 MB 64.9 MB 65.2 MB 65.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8124 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8124 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_8124_validation.pdf.gz | 517 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_8124_full_validation.pdf.gz | 516.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_8124_validation.xml.gz | 15.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8124 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8124 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8124.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | None | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.34 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_8124_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-マスク #2
ファイル | emd_8124_msk_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: None
ファイル | emd_8124_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | None | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: None
ファイル | emd_8124_additional_2.map | ||||||||||||
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-ハーフマップ: None
ファイル | emd_8124_half_map_1.map | ||||||||||||
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: None
ファイル | emd_8124_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | None | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Kluyveromyces lactis small ribosomal subunit in complex with the ...
+超分子 #1: Kluyveromyces lactis small ribosomal subunit in complex with the ...
+分子 #1: Ribosomal protein uS2
+分子 #2: Ribosomal protein eS1
+分子 #3: Ribosomal protein uS5
+分子 #4: Ribosomal protein uS3
+分子 #5: Ribosomal protein eS4
+分子 #6: Ribosomal protein uS7
+分子 #7: Ribosomal protein eS6
+分子 #8: Ribosomal protein eS7
+分子 #9: Ribosomal protein eS8
+分子 #10: Ribosomal protein uS4
+分子 #11: Ribosomal protein eS10
+分子 #12: Ribosomal protein uS17
+分子 #13: Ribosomal protein eS12
+分子 #14: Ribosomal protein uS15
+分子 #15: Ribosomal protein uS14
+分子 #16: Ribosomal protein uS19
+分子 #17: Ribosomal protein uS9
+分子 #18: Ribosomal protein eS17
+分子 #19: Ribosomal protein uS13
+分子 #20: Ribosomal protein eS19
+分子 #21: Ribosomal protein uS10
+分子 #22: Ribosomal protein eS21
+分子 #23: Ribosomal protein uS8
+分子 #24: Ribosomal protein uS21
+分子 #25: Ribosomal protein eS24
+分子 #26: Ribosomal protein eS25
+分子 #27: Ribosomal protein eS26
+分子 #28: Ribosomal protein eS27
+分子 #29: Ribosomal protein eS28
+分子 #30: Ribosomal protein eS29
+分子 #31: Ribosomal protein eS30
+分子 #32: Ribosomal protein eS31
+分子 #33: Ribosomal protein RACK1
+分子 #34: 18S ribosomal RNA
+分子 #35: Cricket paralysis virus IRES RNA
+分子 #36: MAGNESIUM ION
+分子 #37: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 6.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 3 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 20 sec. | ||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 298 K / 装置: FEI VITROBOT MARK II |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 検出モード: INTEGRATING / 平均電子線量: 25.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: RECIPROCAL / プロトコル: OTHER |
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得られたモデル | PDB-5it9: |