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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-4943 | |||||||||
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タイトル | In situ structure of a pentameric IgM complex bound to complement components C1 and one molecule of C4b | |||||||||
マップデータ | Pentameric IgM with C1 and one copy of C4b | |||||||||
試料 |
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生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 25.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Sharp TH | |||||||||
資金援助 | オランダ, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2019 タイトル: Insights into IgM-mediated complement activation based on in situ structures of IgM-C1-C4b. 著者: Thomas H Sharp / Aimee L Boyle / Christoph A Diebolder / Alexander Kros / Abraham J Koster / Piet Gros / 要旨: Antigen binding by serum Ig-M (IgM) protects against microbial infections and helps to prevent autoimmunity, but causes life-threatening diseases when mistargeted. How antigen-bound IgM activates ...Antigen binding by serum Ig-M (IgM) protects against microbial infections and helps to prevent autoimmunity, but causes life-threatening diseases when mistargeted. How antigen-bound IgM activates complement-immune responses remains unclear. We present cryoelectron tomography structures of IgM, C1, and C4b complexes formed on antigen-bearing lipid membranes by normal human serum at 4 °C. The IgM-C1-C4b complexes revealed C4b product release as the temperature-limiting step in complement activation. Both IgM hexamers and pentamers adopted hexagonal, dome-shaped structures with Fab pairs, dimerized by hinge domains, bound to surface antigens that support a platform of Fc regions. C1 binds IgM through widely spread C1q-collagen helices, with C1r proteases pointing outward and C1s bending downward and interacting with surface-attached C4b, which further interacts with the adjacent IgM-Fab and globular C1q-recognition unit. Based on these data, we present mechanistic models for antibody-mediated, C1q-transmitted activation of C1 and for C4b deposition, while further conformational rearrangements are required to form C3 convertases. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_4943.map.gz | 14.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-4943-v30.xml emd-4943.xml | 12.4 KB 12.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_4943_fsc.xml | 6.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_4943.png | 153.3 KB | ||
マスクデータ | emd_4943_msk_1.map | 15.6 MB | マスクマップ | |
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4943 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4943 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_4943_validation.pdf.gz | 274.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_4943_full_validation.pdf.gz | 273.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_4943_validation.xml.gz | 8.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4943 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4943 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_4943.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 15.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Pentameric IgM with C1 and one copy of C4b | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.3 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_4943_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : pentameric IgM-C1-C4b1
全体 | 名称: pentameric IgM-C1-C4b1 |
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要素 |
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-超分子 #1: pentameric IgM-C1-C4b1
超分子 | 名称: pentameric IgM-C1-C4b1 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: Map contains a complex of pentameric IgM, complement component C1 and one molecule of complement component C4b |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 器官: Human serum |
分子量 | 理論値: 1.931 MDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 / 構成要素 - 式: PBS / 構成要素 - 名称: PBS |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: LEICA EM GP |
詳細 | Antigenic liposomes + IgM + Normal human serum |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | 位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均露光時間: 2.4 sec. / 平均電子線量: 1.48 e/Å2 詳細: Exposures of 2.4 sec were dose-fractionated into 6 movie frames per tilt angle. The total dose for each tilt series was 80 e-/A^2. Focusing to -300 nm was performed before each image ...詳細: Exposures of 2.4 sec were dose-fractionated into 6 movie frames per tilt angle. The total dose for each tilt series was 80 e-/A^2. Focusing to -300 nm was performed before each image acquisition using a low-dose routine |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm / 倍率(公称値): 33000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |