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基本情報
登録情報 | ![]() | ||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of native SWR1 bound to DNA (composite structure) | ||||||||||||
![]() | Composite cryo-EM map of SWR1-DNA complex. | ||||||||||||
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![]() | Chromatin Remodeler / Snf2 family ATPase / histone exchange / H2A.Z / GENE REGULATION | ||||||||||||
機能・相同性 | ![]() TTT Hsp90 cochaperone complex / R2TP complex / Swr1 complex / protein targeting to vacuole / Ino80 complex / box C/D snoRNP assembly / 3'-5' DNA helicase activity / NuA4 histone acetyltransferase complex / DNA helicase activity / nucleosome binding ...TTT Hsp90 cochaperone complex / R2TP complex / Swr1 complex / protein targeting to vacuole / Ino80 complex / box C/D snoRNP assembly / 3'-5' DNA helicase activity / NuA4 histone acetyltransferase complex / DNA helicase activity / nucleosome binding / nuclear periphery / rRNA processing / 5'-3' DNA helicase activity / DNA helicase / histone binding / forked DNA-dependent helicase activity / single-stranded 3'-5' DNA helicase activity / four-way junction helicase activity / double-stranded DNA helicase activity / protein stabilization / chromatin remodeling / DNA repair / regulation of DNA-templated transcription / regulation of transcription by RNA polymerase II / chromatin / ATP hydrolysis activity / zinc ion binding / ATP binding / nucleus / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | ||||||||||||
![]() | Louder RK / Park G / Wu C | ||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Molecular basis of global promoter sensing and nucleosome capture by the SWR1 chromatin remodeler. 著者: Robert K Louder / Giho Park / Ziyang Ye / Justin S Cha / Anne M Gardner / Qin Lei / Anand Ranjan / Eva Höllmüller / Florian Stengel / B Franklin Pugh / Carl Wu / ![]() ![]() 要旨: The SWR1 chromatin remodeling complex is recruited to +1 nucleosomes downstream of transcription start sites of eukaryotic promoters, where it exchanges histone H2A for the specialized variant H2A.Z. ...The SWR1 chromatin remodeling complex is recruited to +1 nucleosomes downstream of transcription start sites of eukaryotic promoters, where it exchanges histone H2A for the specialized variant H2A.Z. Here, we use cryoelectron microscopy (cryo-EM) to resolve the structural basis of the SWR1 interaction with free DNA, revealing a distinct open conformation of the Swr1 ATPase that enables sliding from accessible DNA to nucleosomes. A complete structural model of the SWR1-nucleosome complex illustrates critical roles for Swc2 and Swc3 subunits in oriented nucleosome engagement by SWR1. Moreover, an extended DNA-binding α helix within the Swc3 subunit enables sensing of nucleosome linker length and is essential for SWR1-promoter-specific recruitment and activity. The previously unresolved N-SWR1 subcomplex forms a flexible extended structure, enabling multivalent recognition of acetylated histone tails by reader domains to further direct SWR1 toward the +1 nucleosome. Altogether, our findings provide a generalizable mechanism for promoter-specific targeting of chromatin and transcription complexes. | ||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 4.5 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 32 KB 32 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 165.8 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 10.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 9b1dMC ![]() 9b1eC C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Composite cryo-EM map of SWR1-DNA complex. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.03 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
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試料の構成要素
+全体 : Native SWR1 bound to DNA.
+超分子 #1: Native SWR1 bound to DNA.
+超分子 #2: Native SWR1 complex
+分子 #1: Helicase SWR1
+分子 #2: Vacuolar protein sorting-associated protein 72
+分子 #3: Actin-like protein ARP6
+分子 #4: Vacuolar protein sorting-associated protein 71
+分子 #5: RuvB-like protein 1
+分子 #6: RuvB-like protein 2
+分子 #7: DNA (147-MER)
+分子 #8: DNA (147-MER)
+分子 #9: PHOSPHOTHIOPHOSPHORIC ACID-ADENYLATE ESTER
+分子 #10: MAGNESIUM ION
+分子 #11: ZINC ION
+分子 #12: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 0.125 mg/mL | ||||||||||||||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.6 構成要素:
詳細: 20 mM HEPES pH 7.6, 0.2 mM EDTA, 2 mM MgCl2, 100 mM NaCl, 0.01% IGEPAL CA-630, 3.5% glycerol, and 0.25 mM TCEP, 1 mM ATP-gamma-s, 0.05% glutaraldehyde. | ||||||||||||||||||||||||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: GRAPHENE OXIDE / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 90 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | ||||||||||||||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: 6 second blot time and blot force of 12.. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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ソフトウェア | 名称: SerialEM (ver. 3.7.6) |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 5379 / 平均露光時間: 4.0 sec. / 平均電子線量: 54.0 e/Å2 詳細: Each micrograph was fractionated into 64 frames within a 4 second exposure. |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 倍率(補正後): 48543 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.6 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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ソフトウェア | 名称: ISOLDE (ver. 1.7) | ||||||
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 84 当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient | ||||||
得られたモデル | ![]() PDB-9b1d: |