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基本情報
| 登録情報 | ![]() | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | NHEJ Long-range complex with PAXX | |||||||||
マップデータ | Apo | |||||||||
試料 |
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キーワード | Complex / Kinase / NHEJ / DNA BINDING PROTEIN / DNA BINDING PROTEIN-DNA complex | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報FHA domain binding / positive regulation of chromosome organization / positive regulation of ligase activity / DNA ligase IV complex / positive regulation of platelet formation / DNA ligase activity / Ku70:Ku80 complex / DN2 thymocyte differentiation / DNA ligase (ATP) / negative regulation of t-circle formation ...FHA domain binding / positive regulation of chromosome organization / positive regulation of ligase activity / DNA ligase IV complex / positive regulation of platelet formation / DNA ligase activity / Ku70:Ku80 complex / DN2 thymocyte differentiation / DNA ligase (ATP) / negative regulation of t-circle formation / T cell receptor V(D)J recombination / DNA end binding / pro-B cell differentiation / small-subunit processome assembly / positive regulation of lymphocyte differentiation / DNA ligase (ATP) activity / DNA-dependent protein kinase activity / DNA-dependent protein kinase complex / histone H2AXS139 kinase activity / DNA-dependent protein kinase-DNA ligase 4 complex / immunoglobulin V(D)J recombination / nonhomologous end joining complex / nucleotide-excision repair, DNA gap filling / immature B cell differentiation / single strand break repair / regulation of smooth muscle cell proliferation / cellular response to X-ray / V(D)J recombination / nuclear telomere cap complex / double-strand break repair via alternative nonhomologous end joining / regulation of epithelial cell proliferation / double-strand break repair via classical nonhomologous end joining / isotype switching / Cytosolic sensors of pathogen-associated DNA / protein localization to site of double-strand break / telomere capping / IRF3-mediated induction of type I IFN / regulation of hematopoietic stem cell differentiation / positive regulation of neurogenesis / recombinational repair / regulation of telomere maintenance / protein localization to chromosome, telomeric region / U3 snoRNA binding / DNA biosynthetic process / maturation of 5.8S rRNA / T cell lineage commitment / cellular response to lithium ion / cellular hyperosmotic salinity response / negative regulation of cGAS/STING signaling pathway / positive regulation of double-strand break repair via nonhomologous end joining / response to ionizing radiation / 2-LTR circle formation / B cell lineage commitment / hematopoietic stem cell proliferation / telomeric DNA binding / ligase activity / negative regulation of protein phosphorylation / positive regulation of protein kinase activity / 付加脱離酵素(リアーゼ); 炭素-酸素リアーゼ類; その他の炭素-酸素リアーゼ / site of DNA damage / peptidyl-threonine phosphorylation / T cell differentiation / 5'-deoxyribose-5-phosphate lyase activity / somatic stem cell population maintenance / hematopoietic stem cell differentiation / response to X-ray / chromosome organization / ATP-dependent activity, acting on DNA / ectopic germ cell programmed cell death / somitogenesis / telomere maintenance via telomerase / SUMOylation of DNA damage response and repair proteins / condensed chromosome / DNA polymerase binding / mitotic G1 DNA damage checkpoint signaling / neurogenesis / activation of innate immune response / telomere maintenance / DNA helicase activity / cyclin binding / positive regulation of erythrocyte differentiation / cellular response to leukemia inhibitory factor / positive regulation of translation / B cell differentiation / central nervous system development / stem cell proliferation / response to gamma radiation / cellular response to ionizing radiation / small-subunit processome / Nonhomologous End-Joining (NHEJ) / enzyme activator activity / cellular response to gamma radiation / protein-DNA complex / base-excision repair / regulation of circadian rhythm / brain development / peptidyl-serine phosphorylation / protein destabilization / protein modification process / double-strand break repair via nonhomologous end joining 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.39 Å | |||||||||
データ登録者 | Chen S / He Y | |||||||||
| 資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2023タイトル: Cryo-EM visualization of DNA-PKcs structural intermediates in NHEJ. 著者: Siyu Chen / Alex Vogt / Linda Lee / Tasmin Naila / Ryan McKeown / Alan E Tomkinson / Susan P Lees-Miller / Yuan He / ![]() 要旨: DNA double-strand breaks (DSBs), one of the most cytotoxic forms of DNA damage, can be repaired by the tightly regulated nonhomologous end joining (NHEJ) machinery (Stinson and Loparo and Zhao ). ...DNA double-strand breaks (DSBs), one of the most cytotoxic forms of DNA damage, can be repaired by the tightly regulated nonhomologous end joining (NHEJ) machinery (Stinson and Loparo and Zhao ). Core NHEJ factors form an initial long-range (LR) synaptic complex that transitions into a DNA-PKcs (DNA-dependent protein kinase, catalytic subunit)-free, short-range state to align the DSB ends (Chen ). Using single-particle cryo-electron microscopy, we have visualized three additional key NHEJ complexes representing different transition states, with DNA-PKcs adopting distinct dimeric conformations within each of them. Upon DNA-PKcs autophosphorylation, the LR complex undergoes a substantial conformational change, with both Ku and DNA-PKcs rotating outward to promote DNA break exposure and DNA-PKcs dissociation. We also captured a dimeric state of catalytically inactive DNA-PKcs, which resembles structures of other PIKK (Phosphatidylinositol 3-kinase-related kinase) family kinases, revealing a model of the full regulatory cycle of DNA-PKcs during NHEJ. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_28732.map.gz | 233.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-28732-v30.xml emd-28732.xml | 34.5 KB 34.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_28732_fsc.xml | 17 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_28732.png | 49.1 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-28732.cif.gz | 11.6 KB | ||
| その他 | emd_28732_half_map_1.map.gz emd_28732_half_map_2.map.gz | 336.1 MB 336.4 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28732 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28732 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 8ezaMC ![]() 8ez9C ![]() 8ezbC C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_28732.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 421.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Apo | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.079 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: half1
| ファイル | emd_28732_half_map_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | half1 | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half2
| ファイル | emd_28732_half_map_2.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | half2 | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
+全体 : NHEJ Long-range complex with PAXX
+超分子 #1: NHEJ Long-range complex with PAXX
+分子 #1: Protein PAXX
+分子 #2: X-ray repair cross-complementing protein 6
+分子 #3: X-ray repair cross-complementing protein 5
+分子 #4: DNA-dependent protein kinase catalytic subunit
+分子 #5: PRKDC_HUMAN DNA-dependent protein kinase catalytic subunit -- Unk...
+分子 #8: Non-homologous end-joining factor 1
+分子 #9: DNA repair protein XRCC4
+分子 #10: DNA ligase 4
+分子 #6: DNA (31-MER)
+分子 #7: DNA (30-MER)
+分子 #11: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
| 濃度 | 2 mg/mL |
|---|---|
| 緩衝液 | pH: 7.9 |
| グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: GRAPHENE OXIDE / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 10 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR |
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 302 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 温度 | 最低: 70.0 K / 最高: 70.0 K |
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / デジタル化 - サイズ - 横: 5760 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 11006 / 平均露光時間: 4.0 sec. / 平均電子線量: 65.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 2.0 µm / 倍率(補正後): 60000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 倍率(公称値): 60000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
| 精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT 当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient |
|---|---|
| 得られたモデル | ![]() PDB-8eza: |
ムービー
コントローラー
万見について




キーワード
Homo sapiens (ヒト)
データ登録者
米国, 2件
引用























Z (Sec.)
Y (Row.)
X (Col.)





































unidentified baculovirus (ウイルス)
FIELD EMISSION GUN


