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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-2381 | |||||||||
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タイトル | The structure and super-organization of acetylcholine receptor-rapsyn complexes; class C | |||||||||
マップデータ | Acetylcholine receptor with two pairs of rapsyn bound at approximately 72 degrees apart | |||||||||
試料 |
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キーワード | neurotransmitter receptor / clustering / synapse / neuromuscular junction / nicotinic / acetylcholine receptor / rapsyn / 43K / electric organ | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein binding / acetylcholine-gated channel complex / acetylcholine-gated monoatomic cation-selective channel activity / acetylcholine receptor binding / acetylcholine receptor signaling pathway / transmembrane signaling receptor activity / cell junction / chemical synaptic transmission / postsynaptic membrane / cytoskeleton ...protein binding / acetylcholine-gated channel complex / acetylcholine-gated monoatomic cation-selective channel activity / acetylcholine receptor binding / acetylcholine receptor signaling pathway / transmembrane signaling receptor activity / cell junction / chemical synaptic transmission / postsynaptic membrane / cytoskeleton / neuron projection / synapse / zinc ion binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Torpedo marmorata (エイ) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 42.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Zuber B / Unwin N | |||||||||
引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2013 タイトル: Structure and superorganization of acetylcholine receptor-rapsyn complexes. 著者: Benoît Zuber / Nigel Unwin / 要旨: The scaffolding protein at the neuromuscular junction, rapsyn, enables clustering of nicotinic acetylcholine receptors in high concentration and is critical for muscle function. Patients with ...The scaffolding protein at the neuromuscular junction, rapsyn, enables clustering of nicotinic acetylcholine receptors in high concentration and is critical for muscle function. Patients with insufficient receptor clustering suffer from muscle weakness. However, the detailed organization of the receptor-rapsyn network is poorly understood: it is unclear whether rapsyn first forms a wide meshwork to which receptors can subsequently dock or whether it only forms short bridges linking receptors together to make a large cluster. Furthermore, the number of rapsyn-binding sites per receptor (a heteropentamer) has been controversial. Here, we show by cryoelectron tomography and subtomogram averaging of Torpedo postsynaptic membrane that receptors are connected by up to three rapsyn bridges, the minimum number required to form a 2D network. Half of the receptors belong to rapsyn-connected groups comprising between two and fourteen receptors. Our results provide a structural basis for explaining the stability and low diffusion of receptors within clusters. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_2381.map.gz | 784.1 KB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-2381-v30.xml emd-2381.xml | 14.4 KB 14.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_2381.tif | 104.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2381 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-2381 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_2381_validation.pdf.gz | 193.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_2381_full_validation.pdf.gz | 192.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_2381_validation.xml.gz | 4.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2381 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-2381 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 4booMC 2376C 2377C 2378C 2382C 2383C 4bogC 4boiC 4bonC 4borC 4botC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_2381.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 825.2 KB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Acetylcholine receptor with two pairs of rapsyn bound at approximately 72 degrees apart | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 7.48 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Postsynaptic membrane isolated from Torpedo marmorata electric organ
全体 | 名称: Postsynaptic membrane isolated from Torpedo marmorata electric organ |
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要素 |
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-超分子 #1000: Postsynaptic membrane isolated from Torpedo marmorata electric organ
超分子 | 名称: Postsynaptic membrane isolated from Torpedo marmorata electric organ タイプ: sample / ID: 1000 / 詳細: class average 集合状態: acetylcholine receptors bound to two pairs of rapsyns Number unique components: 2 |
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分子量 | 理論値: 474 KDa |
-分子 #1: nicotinic acetylcholine receptor
分子 | 名称: nicotinic acetylcholine receptor / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: AChR / コピー数: 1 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: Torpedo marmorata (エイ) / 別称: Marble electric ray / 組織: Electric organ / 細胞: Electrocyte / 細胞中の位置: Postsynaptic plasma membrane |
分子量 | 実験値: 290 KDa / 理論値: 280 KDa |
配列 | InterPro: Nicotinic acetylcholine receptor |
-分子 #2: Rapsyn
分子 | 名称: Rapsyn / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 Name.synonym: 43 kDa receptor-associated protein of the synapse 詳細: the number of copies is suggested by the volume of the rapsyn densities コピー数: 4 / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: Torpedo marmorata (エイ) / 別称: Marble electric ray / 組織: Electric organ / 細胞: Electrocyte / 細胞中の位置: Postsynaptic plasma membrane |
分子量 | 実験値: 43 KDa / 理論値: 46 KDa |
配列 | GO: chemical synaptic transmission, protein binding, zinc ion binding, acetylcholine receptor binding, cytoskeleton, cell junction, synapse, postsynaptic membrane InterPro: 43kDa postsynaptic protein, Rapsyn, myristoylation/linker region, N-terminal, Tetratricopeptide-like helical domain superfamily, INTERPRO: IPR013026, Zinc finger, RING/FYVE/PHD-type, Zinc ...InterPro: 43kDa postsynaptic protein, Rapsyn, myristoylation/linker region, N-terminal, Tetratricopeptide-like helical domain superfamily, INTERPRO: IPR013026, Zinc finger, RING/FYVE/PHD-type, Zinc finger, RING-type, Tetratricopeptide repeat, Tetratricopeptide repeat 1, 43kDa postsynaptic, conserved site |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法, クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 詳細: 400 mM NaCl, 20 mM phosphate buffer, leupeptin 0.3 mg/l, pepstatin 1 mg/l |
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染色 | タイプ: NEGATIVE / 詳細: unstained |
グリッド | 詳細: 300 mesh copper grid with lacy carbon support, glow discharge in amylamine atmosphere |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 78 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER / 手法: blot from the carbon side |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI POLARA 300 |
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温度 | 最低: 80 K / 最高: 95 K / 平均: 85 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: objective lens astigmatism was corrected at 69,000 times magnification |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: Gatan エネルギーフィルター - エネルギー下限: 0.0 eV エネルギーフィルター - エネルギー上限: 20.0 eV |
詳細 | dual tilt axis tomography |
日付 | 2008年7月25日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) デジタル化 - サンプリング間隔: 15 µm / 実像数: 142 / 平均電子線量: 50 e/Å2 / 詳細: dual axis tilt series / ビット/ピクセル: 16 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 80213 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 6.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 倍率(公称値): 69000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN / Tilt series - Axis1 - Min angle: -70 ° / Tilt series - Axis1 - Max angle: 70 ° |
実験機器 | モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
-画像解析 #1
Image processing ID | 1 |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / ソフトウェア - 名称: IMOD, PRIISM/IVE / 使用したサブトモグラム数: 3564 |
最終 3次元分類 | クラス数: 5 |
-画像解析 #2
Image processing ID | 2 |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 42.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: XMIPP, ML, TOMO / 使用したサブトモグラム数: 3564 |
最終 3次元分類 | クラス数: 5 |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: Chain - #0 - Chain ID: A / Chain - #1 - Chain ID: B / Chain - #2 - Chain ID: C / Chain - #3 - Chain ID: D / Chain - #4 - Chain ID: E |
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ソフトウェア | 名称: Chimera |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
得られたモデル | PDB-4boo: |