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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-20553 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of DDB1dB-DCAF15-DDA1 bound to E7820 and RBM39 | |||||||||
マップデータ | Final refinement map | |||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 RS domain binding / regulation of natural killer cell activation / positive regulation by virus of viral protein levels in host cell / epigenetic programming in the zygotic pronuclei / spindle assembly involved in female meiosis / U1 snRNP binding / Cul4-RING E3 ubiquitin ligase complex / UV-damage excision repair / regulation of mRNA splicing, via spliceosome / biological process involved in interaction with symbiont ...RS domain binding / regulation of natural killer cell activation / positive regulation by virus of viral protein levels in host cell / epigenetic programming in the zygotic pronuclei / spindle assembly involved in female meiosis / U1 snRNP binding / Cul4-RING E3 ubiquitin ligase complex / UV-damage excision repair / regulation of mRNA splicing, via spliceosome / biological process involved in interaction with symbiont / WD40-repeat domain binding / regulation of mitotic cell cycle phase transition / Cul4A-RING E3 ubiquitin ligase complex / Cul4B-RING E3 ubiquitin ligase complex / ubiquitin ligase complex scaffold activity / immune system process / negative regulation of reproductive process / negative regulation of developmental process / cullin family protein binding / viral release from host cell / centriolar satellite / ectopic germ cell programmed cell death / small molecule binding / proteasomal protein catabolic process / positive regulation of viral genome replication / RNA processing / positive regulation of gluconeogenesis / mRNA Splicing - Major Pathway / RNA splicing / nucleotide-excision repair / Recognition of DNA damage by PCNA-containing replication complex / DNA Damage Recognition in GG-NER / regulation of circadian rhythm / Dual Incision in GG-NER / Transcription-Coupled Nucleotide Excision Repair (TC-NER) / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / mRNA processing / Wnt signaling pathway / Formation of Incision Complex in GG-NER / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / protein polyubiquitination / positive regulation of protein catabolic process / cellular response to UV / microtubule cytoskeleton / rhythmic process / positive regulation of proteasomal ubiquitin-dependent protein catabolic process / protein-macromolecule adaptor activity / Neddylation / site of double-strand break / ubiquitin-dependent protein catabolic process / proteasome-mediated ubiquitin-dependent protein catabolic process / chromosome, telomeric region / damaged DNA binding / protein ubiquitination / nuclear speck / DNA repair / apoptotic process / DNA damage response / protein-containing complex binding / nucleolus / negative regulation of apoptotic process / protein-containing complex / DNA binding / RNA binding / extracellular space / extracellular exosome / nucleoplasm / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.4 Å | |||||||||
データ登録者 | Faust T / Yoon H / Nowak RP / Donovan KA / Li Z / Cai Q / Eleuteri NA / Zhang T / Gray NS / Fischer ES | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Chem Biol / 年: 2020 タイトル: Structural complementarity facilitates E7820-mediated degradation of RBM39 by DCAF15. 著者: Tyler B Faust / Hojong Yoon / Radosław P Nowak / Katherine A Donovan / Zhengnian Li / Quan Cai / Nicholas A Eleuteri / Tinghu Zhang / Nathanael S Gray / Eric S Fischer / 要旨: The investigational drugs E7820, indisulam and tasisulam (aryl-sulfonamides) promote the degradation of the splicing factor RBM39 in a proteasome-dependent mechanism. While the activity critically ...The investigational drugs E7820, indisulam and tasisulam (aryl-sulfonamides) promote the degradation of the splicing factor RBM39 in a proteasome-dependent mechanism. While the activity critically depends on the cullin RING ligase substrate receptor DCAF15, the molecular details remain elusive. Here we present the cryo-EM structure of the DDB1-DCAF15-DDA1 core ligase complex bound to RBM39 and E7820 at a resolution of 4.4 Å, together with crystal structures of engineered subcomplexes. We show that DCAF15 adopts a new fold stabilized by DDA1, and that extensive protein-protein contacts between the ligase and substrate mitigate low affinity interactions between aryl-sulfonamides and DCAF15. Our data demonstrate how aryl-sulfonamides neo-functionalize a shallow, non-conserved pocket on DCAF15 to selectively bind and degrade RBM39 and the closely related splicing factor RBM23 without the requirement for a high-affinity ligand, which has broad implications for the de novo discovery of molecular glue degraders. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_20553.map.gz | 38.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-20553-v30.xml emd-20553.xml | 24.3 KB 24.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_20553_fsc.xml | 8.5 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_20553.png | 46.9 KB | ||
マスクデータ | emd_20553_msk_1.map | 50.1 MB | マスクマップ | |
その他 | emd_20553_additional.map.gz emd_20553_additional_1.map.gz emd_20553_half_map_1.map.gz emd_20553_half_map_2.map.gz | 4.3 MB 4.3 MB 38.8 MB 38.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20553 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-20553 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_20553_validation.pdf.gz | 78.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_20553_full_validation.pdf.gz | 77.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_20553_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20553 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-20553 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_20553.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 50.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Final refinement map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.059 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_20553_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Sharpened refinement map
ファイル | emd_20553_additional.map | ||||||||||||
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注釈 | Sharpened refinement map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: Sharpened refinement map
ファイル | emd_20553_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Sharpened refinement map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_20553_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_20553_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Complex of DDB1-DCAF15-DDA1 bound to E7820 and the second RRM of RBM39
全体 | 名称: Complex of DDB1-DCAF15-DDA1 bound to E7820 and the second RRM of RBM39 |
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要素 |
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-超分子 #1: Complex of DDB1-DCAF15-DDA1 bound to E7820 and the second RRM of RBM39
超分子 | 名称: Complex of DDB1-DCAF15-DDA1 bound to E7820 and the second RRM of RBM39 タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all 詳細: Compound: E7820; Chemical Name: 3-Cyano-N-(3-cyano-4-methyl-1H-indol-7-yl)benzenesulfonamide |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
分子量 | 理論値: 193 KDa |
-分子 #1: DNA damage-binding protein 1
分子 | 名称: DNA damage-binding protein 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MGSSHHHHHH SAAHIVMVDA YKPTKGGRMS YNYVVTAQKP TAVNGCVTGH FTSAEDLNLL IAKNTRLEIY VVTAEGLRPV KEVGMYGKIA VMELFRPKGE SKDLLFILTA KYNACILEYK QSGESIDIIT RAHGNVQDRI GRPSETGIIG IIDPECRMIG LRLYDGLFKV ...文字列: MGSSHHHHHH SAAHIVMVDA YKPTKGGRMS YNYVVTAQKP TAVNGCVTGH FTSAEDLNLL IAKNTRLEIY VVTAEGLRPV KEVGMYGKIA VMELFRPKGE SKDLLFILTA KYNACILEYK QSGESIDIIT RAHGNVQDRI GRPSETGIIG IIDPECRMIG LRLYDGLFKV IPLDRDNKEL KAFNIRLEEL HVIDVKFLYG CQAPTICFVY QDPQGRHVKT YEVSLREKEF NKGPWKQENV EAEASMVIAV PEPFGGAIII GQESITYHNG DKYLAIAPPI IKQSTIVCHN RVDPNGSRYL LGDMEGRLFM LLLEKEEQMD GTVTLKDLRV ELLGETSIAE CLTYLDNGVV FVGSRLGDSQ LVKLNVDSNE QGSYVVAMET FTNLGPIVDM CVVDLERQGQ GQLVTCSGAF KEGSLRIIRN GIGGNGNSGE IQKLHIRTVP LYESPRKICY QEVSQCFGVL SSRIEVQDTS GGTTALRPSA STQALSSSVS SSKLFSSSTA PHETSFGEEV EVHNLLIIDQ HTFEVLHAHQ FLQNEYALSL VSCKLGKDPN TYFIVGTAMV YPEEAEPKQG RIVVFQYSDG KLQTVAEKEV KGAVYSMVEF NGKLLASINS TVRLYEWTTE KELRTECNHY NNIMALYLKT KGDFILVGDL MRSVLLLAYK PMEGNFEEIA RDFNPNWMSA VEILDDDNFL GAENAFNLFV CQKDSAATTD EERQHLQEVG LFHLGEFVNV FCHGSLVMQN LGETSTPTQG SVLFGTVNGM IGLVTSLSES WYNLLLDMQN RLNKVIKSVG KIEHSFWRSF HTERKTEPAT GFIDGDLIES FLDISRPKMQ EVVANLQYDD GSGMKREATA DDLIKVVEEL TRIH |
-分子 #2: DDB1 and CUL4 associated factor 15
分子 | 名称: DDB1 and CUL4 associated factor 15 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MDWSHPQFEK SAVDENLYFQ GGGRMAPSSK SERNSGAGSG GGGPGGAGGK RAAGRRREHV LKQLERVKIS GQLSPRLFRK LPPRVCVSLK NIVDEDFLYA GHIFLGFSKC GRYVLSYTSS SGDDDFSFYI YHLYWWEFNV HSKLKLVRQV RLFQDEEIYS DLYLTVCEWP ...文字列: MDWSHPQFEK SAVDENLYFQ GGGRMAPSSK SERNSGAGSG GGGPGGAGGK RAAGRRREHV LKQLERVKIS GQLSPRLFRK LPPRVCVSLK NIVDEDFLYA GHIFLGFSKC GRYVLSYTSS SGDDDFSFYI YHLYWWEFNV HSKLKLVRQV RLFQDEEIYS DLYLTVCEWP SDASKVIVFG FNTRSANGML MNMMMMSDEN HRDIYVSTVA VPPPGRCAAC QDASRAHPGD PNAQCLRHGF MLHTKYQVVY PFPTFQPAFQ LKKDQVVLLN TSYSLVACAV SVHSAGDRSF CQILYDHSTC PLAPASPPEP QSPELPPALP SFCPEAAPAR SSGSPEPSPA IAKAKEFVAD IFRRAKEAKG GVPEEARPAL CPGPSGSRCR AHSEPLALCG ETAPRDSPPA SEAPASEPGY VNYTKLYYVL ESGEGTEPED ELEDDKISLP FVVTDLRGRN LRPMRERTAV QGQYLTVEQL TLDFEYVINE VIRHDATWGH QFCSFSDYDI VILEVCPETN QVLINIGLLL LAFPSPTEEG QLRPKTYHTS LKVAWDLNTG IFETVSVGDL TEVKGQTSGS VWSSYRKSCV DMVMKWLVPE SSGRYVNRMT NEALHKGCSL KVLADSERYT WIVL |
-分子 #4: RNA binding motif protein 39
分子 | 名称: RNA binding motif protein 39 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MGSSHHHHHH SAVDENLYFQ GGCGRGSAGP MRLYVGSLHF NITEDMLRGI FEPFGRIESI QLMMDSETGR SKGYGFITFS DSECAKKALE QLNGFELAGR PMKVGHVTER TDA |
-分子 #5: DET1 And DDB1 Associated 1
分子 | 名称: DET1 And DDB1 Associated 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) |
配列 | 文字列: MGSSHHHHHH SAVDENLYFQ GGGRMADFLK GLPVYNKSNF SRFHADSVCK ASNRRPSVYL PTREYPSEQI IVTEKTNILL RYLHQQWDKK NAAKKRDQEQ VELEGESSAP PRKVARTDSP DMHEDT |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.048 mg/mL | |||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
詳細: Gel filtration buffer was made fresh the day of the purification | |||||||||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 99 % / チャンバー内温度: 286 K / 装置: LEICA EM GP / 詳細: Blotted for 3 seconds before plunging.. | |||||||||||||||
詳細 | This sample was monodisperse |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | 位相板: VOLTA PHASE PLATE |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 9393 / 平均電子線量: 54.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.2 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |