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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-12857 | |||||||||
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タイトル | 30S ribosomal subunit from E. coli | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | ribosome / 30S subunit / RNA | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 mRNA 5'-UTR binding / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome ...mRNA 5'-UTR binding / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / mRNA binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli str. K-12 substr. MG1655 (大腸菌) / Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.05 Å | |||||||||
データ登録者 | Maksimova E / Korepanov A | |||||||||
資金援助 | ロシア, 1件
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引用 | ジャーナル: Int J Mol Sci / 年: 2021 タイトル: RbfA Is Involved in Two Important Stages of 30S Subunit Assembly: Formation of the Central Pseudoknot and Docking of Helix 44 to the Decoding Center. 著者: Elena M Maksimova / Alexey P Korepanov / Olesya V Kravchenko / Timur N Baymukhametov / Alexander G Myasnikov / Konstantin S Vassilenko / Zhanna A Afonina / Elena A Stolboushkina / 要旨: Ribosome biogenesis is a highly coordinated and complex process that requires numerous assembly factors that ensure prompt and flawless maturation of ribosomal subunits. Despite the increasing amount ...Ribosome biogenesis is a highly coordinated and complex process that requires numerous assembly factors that ensure prompt and flawless maturation of ribosomal subunits. Despite the increasing amount of data collected, the exact role of most assembly factors and mechanistic details of their operation remain unclear, mainly due to the shortage of high-resolution structural information. Here, using cryo-electron microscopy, we characterized 30S ribosomal particles isolated from an strain with a deleted gene for the RbfA factor. The cryo-EM maps for pre-30S subunits were divided into six classes corresponding to consecutive assembly intermediates: from the particles with a completely unresolved head domain and unfolded central pseudoknot to almost mature 30S subunits with well-resolved body, platform, and head domains and partially distorted helix 44. The structures of two predominant 30S intermediates belonging to most populated classes obtained at 2.7 Å resolutions indicate that RbfA acts at two distinctive 30S assembly stages: early formation of the central pseudoknot including folding of the head, and positioning of helix 44 in the decoding center at a later stage. Additionally, it was shown that the formation of the central pseudoknot may promote stabilization of the head domain, likely through the RbfA-dependent maturation of the neck helix 28. An update to the model of factor-dependent 30S maturation is proposed, suggesting that RfbA is involved in most of the subunit assembly process. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_12857.map.gz | 13.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-12857-v30.xml emd-12857.xml | 50.1 KB 50.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_12857.png | 137.1 KB | ||
Filedesc metadata | emd-12857.cif.gz | 8.9 KB | ||
その他 | emd_12857_additional_1.map.gz emd_12857_additional_2.map.gz emd_12857_additional_3.map.gz emd_12857_additional_4.map.gz emd_12857_half_map_1.map.gz emd_12857_half_map_2.map.gz | 6 MB 8.4 MB 226.2 MB 226.2 MB 226.7 MB 226.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12857 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12857 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_12857_validation.pdf.gz | 827.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_12857_full_validation.pdf.gz | 827.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_12857_validation.xml.gz | 15.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_12857_validation.cif.gz | 18.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12857 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12857 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_12857.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 244.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.86 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: 30S head
ファイル | emd_12857_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | 30S head | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: 30S body
ファイル | emd_12857_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | 30S body | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: 30S head half A map
ファイル | emd_12857_additional_3.map | ||||||||||||
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注釈 | 30S head half A map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: 30S head half B map
ファイル | emd_12857_additional_4.map | ||||||||||||
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注釈 | 30S head half B map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: 30S body
ファイル | emd_12857_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | 30S body | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: 30S body
ファイル | emd_12857_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | 30S body | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : 30S ribosomal subunit from E.coli
+超分子 #1: 30S ribosomal subunit from E.coli
+分子 #1: 16S rRNA
+分子 #2: 30S ribosomal protein S4
+分子 #3: 30S ribosomal protein S5
+分子 #4: 30S ribosomal protein S6, fully modified isoform
+分子 #5: 30S ribosomal protein S8
+分子 #6: 30S ribosomal protein S11
+分子 #7: 30S ribosomal protein S12
+分子 #8: 30S ribosomal protein S15
+分子 #9: 30S ribosomal protein S16
+分子 #10: 30S ribosomal protein S17
+分子 #11: 30S ribosomal protein S18
+分子 #12: 30S ribosomal protein S20
+分子 #13: 30S ribosomal protein S2
+分子 #14: 30S ribosomal protein S21
+分子 #15: 30S ribosomal protein S3
+分子 #16: 30S ribosomal protein S7
+分子 #17: 30S ribosomal protein S9
+分子 #18: 30S ribosomal protein S10
+分子 #19: 30S ribosomal protein S13
+分子 #20: 30S ribosomal protein S14
+分子 #21: 30S ribosomal protein S19
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 平均電子線量: 2.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: EMDB MAP |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.05 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 169371 |
初期 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |
最終 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
得られたモデル | PDB-7oe1: |