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- EMDB-10663: Focused refinement CF in eiPIC -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-10663
タイトルFocused refinement CF in eiPIC
マップデータ
試料
  • 複合体: early intermediate RNA-Polymerase I Pre-initiation Complex - eiPIC
    • 複合体: RNA polymerase
    • 複合体: transcription initiation factor
    • 複合体: DNA
生物種Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) / Synthetic construct (人工物)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.54 Å
データ登録者Pilsl M / Engel C
資金援助 ドイツ, 2件
OrganizationGrant number国
German Research Foundation (DFG)EN 1204/1-1 ドイツ
German Research Foundation (DFG)CRC 960 ドイツ
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2020
タイトル: Structural basis of RNA polymerase I pre-initiation complex formation and promoter melting.
著者: Michael Pilsl / Christoph Engel /
要旨: Transcription of the ribosomal RNA precursor by RNA polymerase (Pol) I is a prerequisite for the biosynthesis of ribosomes in eukaryotes. Compared to Pols II and III, the mechanisms underlying ...Transcription of the ribosomal RNA precursor by RNA polymerase (Pol) I is a prerequisite for the biosynthesis of ribosomes in eukaryotes. Compared to Pols II and III, the mechanisms underlying promoter recognition, initiation complex formation and DNA melting by Pol I substantially diverge. Here, we report the high-resolution cryo-EM reconstruction of a Pol I early initiation intermediate assembled on a double-stranded promoter scaffold that prevents the establishment of downstream DNA contacts. Our analyses demonstrate how efficient promoter-backbone interaction is achieved by combined re-arrangements of flexible regions in the 'core factor' subunits Rrn7 and Rrn11. Furthermore, structure-function analysis illustrates how destabilization of the melted DNA region correlates with contraction of the polymerase cleft upon transcription activation, thereby combining promoter recruitment with DNA-melting. This suggests that molecular mechanisms and structural features of Pol I initiation have co-evolved to support the efficient melting, initial transcription and promoter clearance required for high-level rRNA synthesis.
履歴
登録2020年2月4日-
ヘッダ(付随情報) 公開2020年3月18日-
マップ公開2020年3月18日-
更新2020年3月18日-
現状2020年3月18日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.022
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.022
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_10663.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_10663.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 282.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.09 Å/pix.
x 420 pix.
= 457.8 Å		1.09 Å/pix.
x 420 pix.
= 457.8 Å		1.09 Å/pix.
x 420 pix.
= 457.8 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.09 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.022 / ムービー #1: 0.022
最小 - 最大-0.030239038 - 0.05790723
平均 (標準偏差)-0.00003387238 (±0.0013648649)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ420420420
Spacing420420420
セルA=B=C: 457.80002 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.091.091.09
M x/y/z420420420
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z457.800457.800457.800
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS420420420
D min/max/mean-0.0300.058-0.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : early intermediate RNA-Polymerase I Pre-initiation Complex - eiPIC

全体名称: early intermediate RNA-Polymerase I Pre-initiation Complex - eiPIC
要素
  • 複合体: early intermediate RNA-Polymerase I Pre-initiation Complex - eiPIC
    • 複合体: RNA polymerase
    • 複合体: transcription initiation factor
    • 複合体: DNA

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超分子 #1: early intermediate RNA-Polymerase I Pre-initiation Complex - eiPIC

超分子名称: early intermediate RNA-Polymerase I Pre-initiation Complex - eiPIC
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0

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超分子 #2: RNA polymerase

超分子名称: RNA polymerase / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母)

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超分子 #3: transcription initiation factor

超分子名称: transcription initiation factor / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1
由来(天然)生物種: Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母)
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)

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超分子 #4: DNA

超分子名称: DNA / タイプ: complex / ID: 4 / 親要素: 1
由来(天然)生物種: Synthetic construct (人工物)
組換発現生物種: Synthetic construct (人工物)

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.1 mg/mL
緩衝液pH: 7.8 / 構成要素 - 式: KCl
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: SUPER-RESOLUTION / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4088 / 平均電子線量: 1.4 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 3.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.5 µm / 倍率（公称値）: 105000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

CTF補正ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0) / ソフトウェア - 詳細: 3
初期モデルモデルのタイプ: NONE / 詳細: Initial model generated from 2D classes
最終 再構成解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.54 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.08) / 使用した粒子像数: 122099
初期 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0) / ソフトウェア - 詳細: 3
最終 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.0) / ソフトウェア - 詳細: 3

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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