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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-0722 | ||||||||||||
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タイトル | Full length S-OPA1 coated liposome tube at nucleotide-free state | ||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||
試料 |
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生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 31.7 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Zhang D / Niu T / Zhang Y / Sun F | ||||||||||||
資金援助 | 中国, 3件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2020 タイトル: Cryo-EM structures of S-OPA1 reveal its interactions with membrane and changes upon nucleotide binding. 著者: Danyang Zhang / Yan Zhang / Jun Ma / Chunmei Zhu / Tongxin Niu / Wenbo Chen / Xiaoyun Pang / Yujia Zhai / Fei Sun / 要旨: Mammalian mitochondrial inner membrane fusion is mediated by optic atrophy 1 (OPA1). Under physiological conditions, OPA1 undergoes proteolytic processing to form a membrane-anchored long isoform (L- ...Mammalian mitochondrial inner membrane fusion is mediated by optic atrophy 1 (OPA1). Under physiological conditions, OPA1 undergoes proteolytic processing to form a membrane-anchored long isoform (L-OPA1) and a soluble short isoform (S-OPA1). A combination of L-OPA1 and S-OPA1 is essential for efficient membrane fusion; however, the relevant mechanism is not well understood. In this study, we investigate the cryo-electron microscopic structures of S-OPA1-coated liposomes in nucleotide-free and GTPγS-bound states. S-OPA1 exhibits a general dynamin-like structure and can assemble onto membranes in a helical array with a dimer building block. We reveal that hydrophobic residues in its extended membrane-binding domain are critical for its tubulation activity. The binding of GTPγS triggers a conformational change and results in a rearrangement of the helical lattice and tube expansion similar to that of S-Mgm1. These observations indicate that S-OPA1 adopts a dynamin-like power stroke membrane remodeling mechanism during mitochondrial inner membrane fusion. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_0722.map.gz | 6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-0722-v30.xml emd-0722.xml | 14.4 KB 14.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_0722_fsc.xml | 5.5 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_0722.png | 91.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0722 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0722 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_0722_validation.pdf.gz | 78.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_0722_full_validation.pdf.gz | 77.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_0722_validation.xml.gz | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0722 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0722 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_0722.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.72 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : full length S-OPA1 coated liposome tube
全体 | 名称: full length S-OPA1 coated liposome tube |
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要素 |
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-超分子 #1: full length S-OPA1 coated liposome tube
超分子 | 名称: full length S-OPA1 coated liposome tube / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all 詳細: 1mg/ml full length S-OPA1 was incubated with 1mg/ml liposome at room temperature for 30 min. |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #1: Dynamin-like 120 kDa protein, mitochondrial, short form for isofo...
分子 | 名称: Dynamin-like 120 kDa protein, mitochondrial, short form for isoform 1, Optic atrophy protein 1 (OPA1), short form for isoform 1 タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: GPGSTDRGSE SDKHFRKVSD KEKIDQLQEE LLHTQLKYQR ILERLEKEN KELRKLVLQK DDKGIHHRKL KKSLIDMYSE VLDVLSDYDA SYNTQDHLPR VVVVGDQSAG KTSVLEMIA QARIFPRGSG EMMTRSPVKV TLSEGPHHVA LFKDSSREFD LTKEEDLAAL R ...文字列: GPGSTDRGSE SDKHFRKVSD KEKIDQLQEE LLHTQLKYQR ILERLEKEN KELRKLVLQK DDKGIHHRKL KKSLIDMYSE VLDVLSDYDA SYNTQDHLPR VVVVGDQSAG KTSVLEMIA QARIFPRGSG EMMTRSPVKV TLSEGPHHVA LFKDSSREFD LTKEEDLAAL R HEIELRMR KNVKEGCTVS PETISLNVKG PGLQRMVLVD LPGVINTVTS GMAPDTKETI FS ISKAYMQ NPNAIILCIQ DGSVDAERSI VTDLVSQMDP HGRRTIFVLT KVDLAEKNVA SPS RIQQII EGKLFPMKAL GYFAVVTGKG NSSESIEAIR EYEEEFFQNS KLLKTSMLKA HQVT TRNLS LAVSDCFWKM VRESVEQQAD SFKATRFNLE TEWKNNYPRL RELDRNELFE KAKNE ILDE VISLSQVTPK HWEEILQQSL WERVSTHVIE NIYLPAAQTM NSGTFNTTVD IKLKQW TDK QLPNKAVEVA WETLQEEFSR FMTEPKGKEH DDIFDKLKEA VKEESIKRHK WNDFAED SL RVIQHNALED RSISDKQQWD AAIYFMEEAL QARLKDTENA IENMVGPDWK KRWLYWKN R TQEQCVHNET KNELEKMLKC NEEHPAYLAS DEITTVRKNL ESRGVEVDPS LIKDTWHQV YRRHFLKTAL NHCNLCRRGF YYYQRHFVDS ELECNDVVLF WRIQRMLAIT ANTLRQQLTN TEVRRLEKN VKEVLEDFAE DGEKKIKLLT GKRVQLAEDL KKVREIQEKL DAFIEALHQE K |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | helical array |
-試料調製
濃度 | 1 mg/mL | ||||||||
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緩衝液 | pH: 8 / 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: OTHER | ||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 289 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV 詳細: The grid was blotted for 3.5s with force 1 before plunging.. | ||||||||
詳細 | 1mg/ml full length S-OPA1 was incubated with 1mg/ml liposome at room temperature for 30 min. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - サイズ - 横: 3838 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3710 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-12 / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 1.0 sec. / 平均電子線量: 3.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 4.0 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: Chain - Chain ID: A |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |