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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-0690 | |||||||||
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タイトル | The reconstruction of apo-state streptavidin at 3.3 Angstrom resolution | |||||||||
マップデータ | apo-state streptavidin | |||||||||
試料 |
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キーワード | streptavidin / CYTOSOLIC PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | |||||||||
生物種 | Streptomyces avidinii (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Fan X / Wang J / Lei JL / Wang HW | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2019 タイトル: Single particle cryo-EM reconstruction of 52 kDa streptavidin at 3.2 Angstrom resolution. 著者: Xiao Fan / Jia Wang / Xing Zhang / Zi Yang / Jin-Can Zhang / Lingyun Zhao / Hai-Lin Peng / Jianlin Lei / Hong-Wei Wang / 要旨: The fast development of single-particle cryogenic electron microscopy (cryo-EM) has made it more feasible to obtain the 3D structure of well-behaved macromolecules with a molecular weight higher than ...The fast development of single-particle cryogenic electron microscopy (cryo-EM) has made it more feasible to obtain the 3D structure of well-behaved macromolecules with a molecular weight higher than 300 kDa at ~3 Å resolution. However, it remains a challenge to obtain the high-resolution structures of molecules smaller than 200 kDa using single-particle cryo-EM. In this work, we apply the Cs-corrector-VPP-coupled cryo-EM to study the 52 kDa streptavidin (SA) protein supported on a thin layer of graphene and embedded in vitreous ice. We are able to solve both the apo-SA and biotin-bound SA structures at near-atomic resolution using single-particle cryo-EM. We demonstrate that the method has the potential to determine the structures of molecules as small as 39 kDa. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_0690.map.gz | 916.9 KB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-0690-v30.xml emd-0690.xml | 12.9 KB 12.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_0690_fsc.xml | 4.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_0690.png | 68.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-0690.cif.gz | 5.3 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0690 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0690 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_0690_validation.pdf.gz | 391.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_0690_full_validation.pdf.gz | 390.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_0690_validation.xml.gz | 7.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_0690_validation.cif.gz | 9.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0690 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0690 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 6j6kMC 0689C 6j6jC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10269 (タイトル: Single particle reconstruction of 52 kDa apo-state streptavidin at 3.3 Angstrom resolution Data size: 2.4 TB Data #1: Uncorrected apo-state streptavidin movie stacks, binning 2 from super-resolution stacks. [micrographs - multiframe]) |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_0690.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | apo-state streptavidin | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.053 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Streptavidin
全体 | 名称: Streptavidin |
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要素 |
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-超分子 #1: Streptavidin
超分子 | 名称: Streptavidin / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Streptomyces avidinii (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 52 KDa |
-分子 #1: Streptavidin
分子 | 名称: Streptavidin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Streptomyces avidinii (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 12.596641 KDa |
配列 | 文字列: GITGTWYNQL GSTFIVTAGA DGALTGTYES AVGNAESRYV LTGRYDSAPA TDGSGTALGW TVAWKNNYRN AHSATTWSGQ YVGGAEARI NTQWLLTSGT TEANAWKSTL VGHDTFTKVK UniProtKB: Streptavidin |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.2 mg/mL | |||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 285 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | 位相板: VOLTA PHASE PLATE / 球面収差補正装置: spherical aberration corrector |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - サイズ - 横: 3838 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3710 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-32 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1450 / 平均露光時間: 2.56 sec. / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス(公称値): -0.8 µm / 最小 デフォーカス(公称値): -0.8 µm / 倍率(公称値): 215000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |