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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8bz1 | |||||||||
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タイトル | RNA polymerase II core pre-initiation complex with the proximal +1 nucleosome (cPIC-Nuc10W) | |||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / Mammalian PIC / +1 nucleosome / transcription initiation | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 : / positive regulation of core promoter binding / RNA polymerase II core complex assembly / meiotic sister chromatid cohesion / RNA polymerase transcription factor SL1 complex / phosphatase activator activity / RNA polymerase III general transcription initiation factor activity / TFIIF-class transcription factor complex binding / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / RNA Polymerase I Transcription Initiation ...: / positive regulation of core promoter binding / RNA polymerase II core complex assembly / meiotic sister chromatid cohesion / RNA polymerase transcription factor SL1 complex / phosphatase activator activity / RNA polymerase III general transcription initiation factor activity / TFIIF-class transcription factor complex binding / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / RNA Polymerase I Transcription Initiation / RNA Polymerase I Promoter Escape / RNA Polymerase I Transcription Termination / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 1 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 3 Promoter / RNA polymerase I core promoter sequence-specific DNA binding / transcriptional start site selection at RNA polymerase II promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 1 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 3 Promoter / Formation of RNA Pol II elongation complex / Formation of the Early Elongation Complex / Transcriptional regulation by small RNAs / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / FGFR2 alternative splicing / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / mRNA Capping / mRNA Splicing - Minor Pathway / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Elongation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Estrogen-dependent gene expression / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / mRNA Splicing - Major Pathway / transcription factor TFIIF complex / RNA Polymerase III Abortive And Retractive Initiation / transcription factor TFIIA complex / female germ cell nucleus / male pronucleus / female pronucleus / Abortive elongation of HIV-1 transcript in the absence of Tat / RNA polymerase II general transcription initiation factor binding / germinal vesicle / transcription preinitiation complex / RNA Polymerase I Transcription Termination / FGFR2 alternative splicing / nuclear thyroid hormone receptor binding / Signaling by FGFR2 IIIa TM / Viral Messenger RNA Synthesis / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE during HIV infection / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / transcription factor TFIID complex / RNA polymerase II general transcription initiation factor activity / Formation of the Early Elongation Complex / Formation of the HIV-1 Early Elongation Complex / organelle membrane / mRNA Capping / protein acetylation / cell division site / HIV Transcription Initiation / RNA Polymerase II HIV Promoter Escape / Transcription of the HIV genome / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / RNA polymerase III activity / RNA polymerase II complex binding / mRNA Splicing - Minor Pathway / acetyltransferase activity / RNA Polymerase I Transcription Initiation / Pausing and recovery of Tat-mediated HIV elongation / Tat-mediated HIV elongation arrest and recovery / viral transcription / aryl hydrocarbon receptor binding / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / transcription by RNA polymerase III / HIV elongation arrest and recovery / Pausing and recovery of HIV elongation / TFIIB-class transcription factor binding / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / RNA polymerase II activity / Tat-mediated elongation of the HIV-1 transcript / transcription elongation by RNA polymerase I / transcription-coupled nucleotide-excision repair / positive regulation of transcription initiation by RNA polymerase II / RNA polymerase II core promoter sequence-specific DNA binding / tRNA transcription by RNA polymerase III / Formation of HIV-1 elongation complex containing HIV-1 Tat / RNA polymerase I activity / RNA polymerase I complex 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) Sus scrofa (ブタ) unidentified adenovirus (ウイルス) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Abril-Garrido, J. / Dienemann, C. / Grabbe, F. / Velychko, T. / Lidschreiber, M. / Wang, H. / Cramer, P. | |||||||||
資金援助 | ドイツ, European Union, 2件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2023 タイトル: Structural basis of transcription reduction by a promoter-proximal +1 nucleosome. 著者: Julio Abril-Garrido / Christian Dienemann / Frauke Grabbe / Taras Velychko / Michael Lidschreiber / Haibo Wang / Patrick Cramer / 要旨: At active human genes, the +1 nucleosome is located downstream of the RNA polymerase II (RNA Pol II) pre-initiation complex (PIC). However, at inactive genes, the +1 nucleosome is found further ...At active human genes, the +1 nucleosome is located downstream of the RNA polymerase II (RNA Pol II) pre-initiation complex (PIC). However, at inactive genes, the +1 nucleosome is found further upstream, at a promoter-proximal location. Here, we establish a model system to show that a promoter-proximal +1 nucleosome can reduce RNA synthesis in vivo and in vitro, and we analyze its structural basis. We find that the PIC assembles normally when the edge of the +1 nucleosome is located 18 base pairs (bp) downstream of the transcription start site (TSS). However, when the nucleosome edge is located further upstream, only 10 bp downstream of the TSS, the PIC adopts an inhibited state. The transcription factor IIH (TFIIH) shows a closed conformation and its subunit XPB contacts DNA with only one of its two ATPase lobes, inconsistent with DNA opening. These results provide a mechanism for nucleosome-dependent regulation of transcription initiation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8bz1.cif.gz | 2.2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8bz1.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 8bz1.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8bz1_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8bz1_full_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8bz1_validation.xml.gz | 152.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8bz1_validation.cif.gz | 240.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bz/8bz1 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bz/8bz1 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 16335MC 8bvwC 8byqC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA-directed RNA polymerase ... , 8種, 8分子 ABCEFGIK
#1: タンパク質 | 分子量: 217450.078 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A8D1DPV6, DNA-directed RNA polymerase |
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#2: タンパク質 | 分子量: 134041.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LGP4, DNA-directed RNA polymerase |
#3: タンパク質 | 分子量: 31439.074 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LCH3 |
#5: タンパク質 | 分子量: 24644.318 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LSI7 |
#6: タンパク質 | 分子量: 14477.001 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: F1SKN8 |
#7: タンパク質 | 分子量: 19314.283 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LJZ9 |
#9: タンパク質 | 分子量: 14541.221 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: P60899 |
#11: タンパク質 | 分子量: 13310.284 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: F1RKE4 |
-RNA polymerase II subunit ... , 2種, 2分子 DL
#4: タンパク質 | 分子量: 16331.255 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A287ADR4 |
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#12: タンパク質 | 分子量: 7018.244 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LN51 |
-DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit ... , 2種, 2分子 HJ
#8: タンパク質 | 分子量: 17162.273 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LCB2 |
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#10: タンパク質 | 分子量: 7655.123 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1VYD0 |
-タンパク質 , 6種, 10分子 MOaebfcgdh
#13: タンパク質 | 分子量: 34877.949 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2B, TF2B, TFIIB / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q00403, histone acetyltransferase | ||||||
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#15: タンパク質 | 分子量: 37729.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: TBP, GTF2D1, TF2D, TFIID / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: P20226 | ||||||
#21: タンパク質 | 分子量: 15435.126 Da / 分子数: 2 / Mutation: G103A / 由来タイプ: 組換発現 詳細: The mutation reported is found to occur spontaneous when expressing histones in E. coli. 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P84233 #22: タンパク質 | 分子量: 11394.426 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P62799 #23: タンパク質 | 分子量: 14093.436 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: The mutation reported is found to occur spontaneous when expressing histones in E. coli. 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P06897 #24: タンパク質 | 分子量: 13965.265 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Xenopus laevis (アフリカツメガエル) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P02281 |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 NT
#14: DNA鎖 | 分子量: 64775.164 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) unidentified adenovirus (ウイルス) |
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#18: DNA鎖 | 分子量: 64909.281 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) unidentified adenovirus (ウイルス) |
-General transcription factor IIF subunit ... , 2種, 2分子 QR
#16: タンパク質 | 分子量: 58343.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2F1, RAP74 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P35269 |
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#17: タンパク質 | 分子量: 28427.309 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2F2, RAP30 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P13984, DNA helicase |
-Transcription initiation factor IIA subunit ... , 2種, 2分子 UV
#19: タンパク質 | 分子量: 41544.551 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2A1, TF2A1 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: P52655 |
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#20: タンパク質 | 分子量: 12469.091 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2A2, TF2A2 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: P52657 |
-非ポリマー , 2種, 10分子
#25: 化合物 | ChemComp-ZN / #26: 化合物 | ChemComp-MG / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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分子量 | 値: 1.04 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R3.5/1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 81000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 1300 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 600 nm / Cs: 2.7 mm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 3 sec. / 電子線照射量: 50.45 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 実像数: 36478 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Quantum SE / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 4606320 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 214161 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL |