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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7w8g | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of MCM double hexamer | ||||||
要素 |
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キーワード | REPLICATION / DNA replication initiation / Complex / Replicative helicase | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 MCM core complex / Assembly of the pre-replicative complex / Switching of origins to a post-replicative state / MCM complex binding / nuclear DNA replication / premeiotic DNA replication / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / mitotic DNA replication / Activation of the pre-replicative complex / CMG complex ...MCM core complex / Assembly of the pre-replicative complex / Switching of origins to a post-replicative state / MCM complex binding / nuclear DNA replication / premeiotic DNA replication / pre-replicative complex assembly involved in nuclear cell cycle DNA replication / mitotic DNA replication / Activation of the pre-replicative complex / CMG complex / nuclear pre-replicative complex / Activation of ATR in response to replication stress / DNA replication preinitiation complex / MCM complex / replication fork protection complex / double-strand break repair via break-induced replication / mitotic DNA replication initiation / single-stranded DNA helicase activity / regulation of DNA-templated DNA replication initiation / DNA strand elongation involved in DNA replication / silent mating-type cassette heterochromatin formation / DNA unwinding involved in DNA replication / nuclear replication fork / DNA replication origin binding / DNA replication initiation / subtelomeric heterochromatin formation / DNA helicase activity / helicase activity / transcription elongation by RNA polymerase II / heterochromatin formation / single-stranded DNA binding / DNA helicase / chromosome, telomeric region / DNA damage response / chromatin binding / ATP hydrolysis activity / nucleoplasm / ATP binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.52 Å | ||||||
データ登録者 | Cheng, J. / Li, N. / Tye, B. / Zhai, Y. / Gao, N. | ||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Structural Insight into the MCM double hexamer activation by Dbf4-Cdc7 kinase. 著者: Jiaxuan Cheng / Ningning Li / Yunjing Huo / Shangyu Dang / Bik-Kwoon Tye / Ning Gao / Yuanliang Zhai / 要旨: The Dbf4-dependent kinase Cdc7 (DDK) regulates DNA replication initiation by phosphorylation of the MCM double hexamer (MCM-DH) to promote helicase activation. Here, we determine a series of cryo ...The Dbf4-dependent kinase Cdc7 (DDK) regulates DNA replication initiation by phosphorylation of the MCM double hexamer (MCM-DH) to promote helicase activation. Here, we determine a series of cryo electron microscopy (cryo-EM) structures of yeast DDK bound to the MCM-DH. These structures, occupied by one or two DDKs, differ primarily in the conformations of the kinase core. The interactions of DDK with the MCM-DH are mediated exclusively by subunit Dbf4 straddling across the hexamer interface on the three N-terminal domains (NTDs) of subunits Mcm2, Mcm6, and Mcm4. This arrangement brings Cdc7 close to its only essential substrate, the N-terminal serine/threonine-rich domain (NSD) of Mcm4. Dbf4 further displaces the NSD from its binding site on Mcm4-NTD, facilitating an immediate targeting of this motif by Cdc7. Moreover, the active center of Cdc7 is occupied by a unique Dbf4 inhibitory loop, which is disengaged when the kinase core assumes wobbling conformations. This study elucidates the versatility of Dbf4 in regulating the ordered multisite phosphorylation of the MCM-DH by Cdc7 kinase during helicase activation. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7w8g.cif.gz | 1.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7w8g.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7w8g.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7w8g_validation.pdf.gz | 1.6 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7w8g_full_validation.pdf.gz | 1.7 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7w8g_validation.xml.gz | 191.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7w8g_validation.cif.gz | 288.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/w8/7w8g ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/w8/7w8g | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 32355MC 7v3uC 7v3vC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA replication licensing factor ... , 5種, 10分子 2B3C4D6F7G
#1: タンパク質 | 分子量: 98911.539 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P29469, DNA helicase #2: タンパク質 | 分子量: 107653.508 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P24279, DNA helicase #3: タンパク質 | 分子量: 105138.375 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P30665, DNA helicase #5: タンパク質 | 分子量: 113110.211 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P53091, DNA helicase #6: タンパク質 | 分子量: 95049.875 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P38132, DNA helicase |
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-タンパク質 , 1種, 2分子 5E
#4: タンパク質 | 分子量: 86505.734 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) 株: S288c / 参照: UniProt: P29496, DNA helicase |
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-非ポリマー , 4種, 34分子
#7: 化合物 | ChemComp-AGS / #8: 化合物 | ChemComp-MG / #9: 化合物 | ChemComp-ZN / #10: 化合物 | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: MCM double hexamer (DH) / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#6 / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae S288c (パン酵母) / 株: S288c |
緩衝液 | pH: 7.6 |
試料 | 包埋: YES / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
EM embedding | Material: Ice |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 3500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm |
撮影 | 電子線照射量: 46 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.19.2_4158: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.52 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 94859 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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