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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7nt6
タイトルCryoEM structure of the Nipah virus nucleocapsid spiral clam-shaped assembly
要素
  • Nucleoprotein
  • RNA (42-MER)
  • RNA (48-MER)
キーワードVIRAL PROTEIN / Protein-RNA complex / Nucleocapsid
機能・相同性
機能・相同性情報


negative stranded viral RNA transcription / negative stranded viral RNA replication / helical viral capsid / viral nucleocapsid / host cell cytoplasm / molecular adaptor activity / ribonucleoprotein complex / structural molecule activity / RNA binding
類似検索 - 分子機能
Paramyxovirus nucleocapsid protein / Paramyxovirus nucleocapsid protein
類似検索 - ドメイン・相同性
RNA / RNA (> 10) / Nucleoprotein
類似検索 - 構成要素
生物種Nipah virus (ウイルス)
Escherichia coli BL21 (大腸菌)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.3 Å
データ登録者Ker, D.S. / Jenkins, H.T. / Greive, S.J. / Antson, A.A.
資金援助 英国, 1件
組織認可番号
Wellcome Trust 英国
引用ジャーナル: PLoS Pathog / : 2021
タイトル: CryoEM structure of the Nipah virus nucleocapsid assembly.
著者: De-Sheng Ker / Huw T Jenkins / Sandra J Greive / Alfred A Antson /
要旨: Nipah and its close relative Hendra are highly pathogenic zoonotic viruses, storing their ssRNA genome in a helical nucleocapsid assembly formed by the N protein, a major viral immunogen. Here, we ...Nipah and its close relative Hendra are highly pathogenic zoonotic viruses, storing their ssRNA genome in a helical nucleocapsid assembly formed by the N protein, a major viral immunogen. Here, we report the first cryoEM structure for a Henipavirus RNA-bound nucleocapsid assembly, at 3.5 Å resolution. The helical assembly is stabilised by previously undefined N- and C-terminal segments, contributing to subunit-subunit interactions. RNA is wrapped around the nucleocapsid protein assembly with a periodicity of six nucleotides per protomer, in the "3-bases-in, 3-bases-out" conformation, with protein plasticity enabling non-sequence specific interactions. The structure reveals commonalities in RNA binding pockets and in the conformation of bound RNA, not only with members of the Paramyxoviridae family, but also with the evolutionarily distant Filoviridae Ebola virus. Significant structural differences with other Paramyxoviridae members are also observed, particularly in the position and length of the exposed α-helix, residues 123-139, which may serve as a valuable epitope for surveillance and diagnostics.
履歴
登録2021年3月9日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02021年7月7日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12021年7月28日Group: Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year
改定 1.22024年7月10日Group: Data collection / Database references / Refinement description
カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond ...chem_comp_atom / chem_comp_bond / database_2 / em_3d_fitting_list / em_admin / pdbx_initial_refinement_model
Item: _database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession ..._database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession / _em_3d_fitting_list.accession_code / _em_3d_fitting_list.initial_refinement_model_id / _em_3d_fitting_list.source_name / _em_3d_fitting_list.type / _em_admin.last_update

-
構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • マップデータ: EMDB-12584
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-12584
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

-
集合体

登録構造単位
A: Nucleoprotein
B: Nucleoprotein
C: Nucleoprotein
D: Nucleoprotein
E: Nucleoprotein
F: Nucleoprotein
G: Nucleoprotein
H: Nucleoprotein
I: Nucleoprotein
J: Nucleoprotein
K: Nucleoprotein
L: Nucleoprotein
M: Nucleoprotein
N: Nucleoprotein
O: Nucleoprotein
X: RNA (48-MER)
Z: RNA (42-MER)


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)936,60717
ポリマ-936,60717
非ポリマー00
00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551
非結晶学的対称性 (NCS)NCSドメイン:
IDEns-ID詳細
11X
21Z
12A
22B
13A
23C
14A
24D
15A
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26F
17A
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18A
28H
19A
29I
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2106O

NCSドメイン領域:
Dom-IDComponent-IDEns-IDRefine codeAuth asym-IDAuth seq-ID
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201040N4 - 368
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201050O4 - 366
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201060O4 - 366

NCSアンサンブル:
ID
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
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105
106

-
要素

#1: タンパク質
Nucleoprotein / Protein N / Nucleocapsid protein


分子量: 60609.484 Da / 分子数: 15 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Nipah virus (ウイルス) / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: Q9IK92
#2: RNA鎖 RNA (48-MER)


分子量: 14650.994 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
#3: RNA鎖 RNA (42-MER)


分子量: 12814.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)

-
実験情報

-
実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

-
試料調製

構成要素
ID名称タイプEntity IDParent-ID由来
1Nipah virus nucleocapsid Protein-RNA complexCOMPLEXall0RECOMBINANT
2NucleoproteinCOMPLEX#11RECOMBINANT
3RNA (48-MER)COMPLEX#21RECOMBINANT
4RNA (42-MER)COMPLEX#31RECOMBINANT
分子量: 1 MDa / 実験値: NO
由来(天然)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID
12Nipah virus (ウイルス)121791
23Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)469008
34Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)469008
由来(組換発現)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID
12Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)469008
23Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)469008
34Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)469008
緩衝液pH: 8
緩衝液成分
ID濃度名称Buffer-ID
120 mMTrisC4H11NO31
2300 mMsodium chlorideNaCl1
試料濃度: 0.4 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K

-
電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2100 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影電子線照射量: 41 e/Å2 / 検出モード: COUNTING
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
画像スキャン動画フレーム数/画像: 40 / 利用したフレーム数/画像: 1-40

-
解析

ソフトウェア名称: REFMAC / バージョン: 5.8.0267 / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
1RELION3粒子像選択
2EPU画像取得
4CTFFIND4CTF補正
7UCSF Chimera1.13モデルフィッティング
11RELION3.1beta分類
12RELION3.1beta3次元再構成
19REFMAC5.8.0267モデル精密化
20PHENIX1.17モデル精密化
21ERRASER2モデル精密化
22ISOLDE0.9モデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 217522
対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度: 4.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 23029 / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: RIGID BODY FIT
原子モデル構築PDB-ID: 7NT5
PDB chain-ID: H / Accession code: 7NT5 / Pdb chain residue range: 4-397 / Source name: PDB / タイプ: experimental model
精密化解像度: 4.3→201.22 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.983 / SU B: 81.568 / SU ML: 0.79 / ESU R: 0.757
立体化学のターゲット値: MAXIMUM LIKELIHOOD WITH PHASES
Rfactor反射数%反射
Rwork0.27534 --
obs0.27534 155589 100 %
溶媒の処理溶媒モデル: PARAMETERS FOR MASK CACLULATION
原子変位パラメータBiso mean: 113.558 Å2
Baniso -1Baniso -2Baniso -3
1--3.36 Å22.6 Å20.4 Å2
2--5.19 Å2-7.1 Å2
3----1.82 Å2
精密化ステップサイクル: 1 / 合計: 24128
拘束条件
Refine-IDタイプDev idealDev ideal target
ELECTRON MICROSCOPYr_bond_refined_d0.0110.01124281
ELECTRON MICROSCOPYr_bond_other_d
ELECTRON MICROSCOPYr_angle_refined_deg1.961.53830887
ELECTRON MICROSCOPYr_angle_other_deg
ELECTRON MICROSCOPYr_dihedral_angle_1_deg8.13855557
ELECTRON MICROSCOPYr_dihedral_angle_2_deg
ELECTRON MICROSCOPYr_dihedral_angle_3_deg
ELECTRON MICROSCOPYr_dihedral_angle_4_deg
ELECTRON MICROSCOPYr_chiral_restr0.1230.2360
ELECTRON MICROSCOPYr_gen_planes_refined0.010.0223038
ELECTRON MICROSCOPYr_gen_planes_other
ELECTRON MICROSCOPYr_nbd_refined
ELECTRON MICROSCOPYr_nbd_other
ELECTRON MICROSCOPYr_nbtor_refined
ELECTRON MICROSCOPYr_nbtor_other
ELECTRON MICROSCOPYr_xyhbond_nbd_refined
ELECTRON MICROSCOPYr_xyhbond_nbd_other
ELECTRON MICROSCOPYr_metal_ion_refined
ELECTRON MICROSCOPYr_metal_ion_other
ELECTRON MICROSCOPYr_symmetry_vdw_refined
ELECTRON MICROSCOPYr_symmetry_vdw_other
ELECTRON MICROSCOPYr_symmetry_hbond_refined
ELECTRON MICROSCOPYr_symmetry_hbond_other
ELECTRON MICROSCOPYr_symmetry_metal_ion_refined
ELECTRON MICROSCOPYr_symmetry_metal_ion_other
ELECTRON MICROSCOPYr_mcbond_it19.20621.25922303
ELECTRON MICROSCOPYr_mcbond_other
ELECTRON MICROSCOPYr_mcangle_it28.66331.77827835
ELECTRON MICROSCOPYr_mcangle_other
ELECTRON MICROSCOPYr_scbond_it14.1123.1731978
ELECTRON MICROSCOPYr_scbond_other
ELECTRON MICROSCOPYr_scangle_it
ELECTRON MICROSCOPYr_scangle_other
ELECTRON MICROSCOPYr_long_range_B_refined35.2488366
ELECTRON MICROSCOPYr_long_range_B_other
ELECTRON MICROSCOPYr_rigid_bond_restr
ELECTRON MICROSCOPYr_sphericity_free
ELECTRON MICROSCOPYr_sphericity_bonded
Refine LS restraints NCS

Refine-ID: ELECTRON MICROSCOPY / タイプ: interatomic distance / Weight position: 0.05

Ens-IDDom-IDAuth asym-IDRms dev position (Å)
11X57200.16
12Z57200.16
21A95200.04
22B95200.04
31A95400.04
32C95400.04
41A95160.04
42D95160.04
51A94900.04
52E94900.04
61A94980.05
62F94980.05
71A94700.04
72G94700.04
81A95360.04
82H95360.04
91A95060.04
92I95060.04
101A94820.04
102J94820.04
111A95240.04
112K95240.04
121A95240.04
122L95240.04
131A95260.03
132M95260.03
141A94980.04
142N94980.04
151A94640.04
152O94640.04
161B104680.04
162C104680.04
171B104820.03
172D104820.03
181B104540.04
182E104540.04
191B104280.04
192F104280.04
201B102720.05
202G102720.05
211B104900.04
212H104900.04
221B105080.03
222I105080.03
231B104300.05
232J104300.05
241B105100.04
242K105100.04
251B104940.04
252L104940.04
261B105240.03
262M105240.03
271B104680.04
272N104680.04
281B103580.05
282O103580.05
291C105420.04
292D105420.04
301C104880.05
302E104880.05
311C104760.04
312F104760.04
321C103340.04
322G103340.04
331C105120.05
332H105120.05
341C105200.04
342I105200.04
351C104780.05
352J104780.05
361C105300.04
362K105300.04
371C104940.05
372L104940.05
381C104860.03
382M104860.03
391C105040.05
392N105040.05
401C103600.04
402O103600.04
411D105180.04
412E105180.04
421D104880.04
422F104880.04
431D103180.04
432G103180.04
441D105300.04
442H105300.04
451D105300.04
452I105300.04
461D104880.05
462J104880.05
471D105540.04
472K105540.04
481D105200.04
482L105200.04
491D105060.03
492M105060.03
501D105180.04
502N105180.04
511D103680.05
512O103680.05
521E106960.05
522F106960.05
531E103300.04
532G103300.04
541E106780.04
542H106780.04
551E107520.03
552I107520.03
561E107040.06
562J107040.06
571E107700.04
572K107700.04
581E106000.04
582L106000.04
591E104700.04
592M104700.04
601E105520.04
602N105520.04
611E103480.04
612O103480.04
621F103340.05
622G103340.05
631F106520.05
632H106520.05
641F107600.06
642I107600.06
651F107340.06
652J107340.06
661F107280.06
662K107280.06
671F105620.05
672L105620.05
681F104460.04
682M104460.04
691F105120.05
692N105120.05
701F103500.05
702O103500.05
711G103300.04
712H103300.04
721G103360.03
722I103360.03
731G102940.05
732J102940.05
741G103580.04
742K103580.04
751G103380.04
752L103380.04
761G102880.04
762M102880.04
771G103600.04
772N103600.04
781G102300.04
782O102300.04
791H107240.04
792I107240.04
801H106820.06
802J106820.06
811H107520.04
812K107520.04
821H106460.03
822L106460.03
831H104980.04
832M104980.04
841H105540.03
842N105540.03
851H103860.04
852O103860.04
861I107920.06
862J107920.06
871I108260.03
872K108260.03
881I106280.03
882L106280.03
891I105020.03
892M105020.03
901I105600.03
902N105600.03
911I103620.03
912O103620.03
921J108620.06
922K108620.06
931J105200.06
932L105200.06
941J104400.04
942M104400.04
951J104900.06
952N104900.06
961J103200.05
962O103200.05
971K106180.03
972L106180.03
981K105240.03
982M105240.03
991K105880.03
992N105880.03
1001K103820.03
1002O103820.03
1011L105220.03
1012M105220.03
1021L105500.03
1022N105500.03
1031L103880.03
1032O103880.03
1041M104920.04
1042N104920.04
1051M103740.04
1052O103740.04
1061N103980.04
1062O103980.04
LS精密化 シェル解像度: 4.3→4.412 Å / Total num. of bins used: 20
Rfactor反射数%反射
Rfree0 0 -
Rwork0.576 11513 -
obs--100 %

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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