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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6sml | ||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Structure of the RagAB peptide importer in the 'open-open' state | ||||||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN / Beta-barrel / OMP / TonB-dependent / transporter | ||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | ||||||||||||||||||||||||
生物種 | Porphyromonas gingivalis W83 (バクテリア) | ||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | ||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | White, J.B.R. / Ranson, N.A. / van den Berg, B. | ||||||||||||||||||||||||
資金援助 | 英国, ポーランド, 7件
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引用 | ジャーナル: Nat Microbiol / 年: 2020 タイトル: Structural and functional insights into oligopeptide acquisition by the RagAB transporter from Porphyromonas gingivalis. 著者: Mariusz Madej / Joshua B R White / Zuzanna Nowakowska / Shaun Rawson / Carsten Scavenius / Jan J Enghild / Grzegorz P Bereta / Karunakar Pothula / Ulrich Kleinekathoefer / Arnaud Baslé / ...著者: Mariusz Madej / Joshua B R White / Zuzanna Nowakowska / Shaun Rawson / Carsten Scavenius / Jan J Enghild / Grzegorz P Bereta / Karunakar Pothula / Ulrich Kleinekathoefer / Arnaud Baslé / Neil A Ranson / Jan Potempa / Bert van den Berg / 要旨: Porphyromonas gingivalis, an asaccharolytic member of the Bacteroidetes, is a keystone pathogen in human periodontitis that may also contribute to the development of other chronic inflammatory ...Porphyromonas gingivalis, an asaccharolytic member of the Bacteroidetes, is a keystone pathogen in human periodontitis that may also contribute to the development of other chronic inflammatory diseases. P. gingivalis utilizes protease-generated peptides derived from extracellular proteins for growth, but how these peptides enter the cell is not clear. Here, we identify RagAB as the outer-membrane importer for these peptides. X-ray crystal structures show that the transporter forms a dimeric RagAB complex, with the RagB substrate-binding surface-anchored lipoprotein forming a closed lid on the RagA TonB-dependent transporter. Cryo-electron microscopy structures reveal the opening of the RagB lid and thus provide direct evidence for a 'pedal bin' mechanism of nutrient uptake. Together with mutagenesis, peptide-binding studies and RagAB peptidomics, our work identifies RagAB as a dynamic, selective outer-membrane oligopeptide-acquisition machine that is essential for the efficient utilization of proteinaceous nutrients by P. gingivalis. | ||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6sml.cif.gz | 340.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6sml.ent.gz | 267.9 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6sml.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6sml_validation.pdf.gz | 907 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6sml_full_validation.pdf.gz | 913.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6sml_validation.xml.gz | 45 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6sml_validation.cif.gz | 68.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/sm/6sml ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/sm/6sml | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 10243MC 6sliC 6sljC 6slnC 6sm3C 6smqC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10543 (タイトル: Cryo electron microscopy of RagAB from P. gingivalis solubilised in DDM Data size: 9.0 TB Data #1: Raw micrograph movies of the RagAB complex solubilised in DDM [micrographs - multiframe]) |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 54430.863 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Porphyromonas gingivalis W83 (バクテリア) 株: KRAB / 参照: UniProt: F5H948 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 101582.398 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Porphyromonas gingivalis W83 (バクテリア) 株: KRAB / 参照: UniProt: Q7MXJ7 |
#3: タンパク質・ペプチド | 分子量: 952.923 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: Putative peptide substrate 由来: (天然) Porphyromonas gingivalis W83 (バクテリア) 株: KRAB |
#4: 化合物 | ChemComp-5PL / ( |
#5: 化合物 | ChemComp-PLM / |
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: RagAB with putative peptide substrate / タイプ: COMPLEX 詳細: Putative peptide substrate co-purified with the complex Entity ID: #1-#3 / 由来: NATURAL | ||||||||||||||||||||
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分子量 | 実験値: NO | ||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Porphyromonas gingivalis W83 (バクテリア) / 株: KRAB | ||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 1.75 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 279.15 K / 詳細: 6 second blot time, blot force 6 |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 77.88 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: (1.14_3260: phenix.real_space_refine) / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C2 (2回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 51849 / 対称性のタイプ: POINT |