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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-4913 | ||||||||||||
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タイトル | CryoEM structure of the complete E. coli DNA Gyrase complex bound to a 130 bp DNA duplex | ||||||||||||
マップデータ | The complete E. coli DNA Gyrase complex | ||||||||||||
試料 |
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キーワード | Isomerase / Complex / DNA Gyrase / Inhibitor / DNA BINDING PROTEIN | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of DNA-templated DNA replication / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) complex / DNA negative supercoiling activity / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) activity / DNA topoisomerase (ATP-hydrolysing) / DNA topological change / ATP-dependent activity, acting on DNA / DNA-templated DNA replication / chromosome / response to xenobiotic stimulus ...negative regulation of DNA-templated DNA replication / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) complex / DNA negative supercoiling activity / DNA topoisomerase type II (double strand cut, ATP-hydrolyzing) activity / DNA topoisomerase (ATP-hydrolysing) / DNA topological change / ATP-dependent activity, acting on DNA / DNA-templated DNA replication / chromosome / response to xenobiotic stimulus / response to antibiotic / DNA-templated transcription / DNA binding / ATP binding / identical protein binding / membrane / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) / Escherichia coli (大腸菌) / Escherichia coli (strain K12) (大腸菌) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.6 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Vanden Broeck A / Lamour V | ||||||||||||
資金援助 | フランス, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2019 タイトル: Cryo-EM structure of the complete E. coli DNA gyrase nucleoprotein complex. 著者: Arnaud Vanden Broeck / Christophe Lotz / Julio Ortiz / Valérie Lamour / 要旨: DNA gyrase is an essential enzyme involved in the homeostatic control of DNA supercoiling and the target of successful antibacterial compounds. Despite extensive studies, a detailed architecture of ...DNA gyrase is an essential enzyme involved in the homeostatic control of DNA supercoiling and the target of successful antibacterial compounds. Despite extensive studies, a detailed architecture of the full-length DNA gyrase from the model organism E. coli is still missing. Herein, we report the complete structure of the E. coli DNA gyrase nucleoprotein complex trapped by the antibiotic gepotidacin, using phase-plate single-particle cryo-electron microscopy. Our data unveil the structural and spatial organization of the functional domains, their connections and the position of the conserved GyrA-box motif. The deconvolution of two states of the DNA-binding/cleavage domain provides a better understanding of the allosteric movements of the enzyme complex. The local atomic resolution in the DNA-bound area reaching up to 3.0 Å enables the identification of the antibiotic density. Altogether, this study paves the way for the cryo-EM determination of gyrase complexes with antibiotics and opens perspectives for targeting conformational intermediates. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_4913.map.gz | 16.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-4913-v30.xml emd-4913.xml | 21.1 KB 21.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_4913_fsc.xml | 12.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_4913.png | 53.7 KB | ||
マスクデータ | emd_4913_msk_1.map | 178 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-4913.cif.gz | 7.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4913 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4913 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_4913_validation.pdf.gz | 409.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_4913_full_validation.pdf.gz | 408.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_4913_validation.xml.gz | 13 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_4913_validation.cif.gz | 17.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4913 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4913 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_4913.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | The complete E. coli DNA Gyrase complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.88 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_4913_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : The complete E. coli DNA Gyrase complex bound to 130bp DNA duplex
+超分子 #1: The complete E. coli DNA Gyrase complex bound to 130bp DNA duplex
+超分子 #2: DNA gyrase subunit A
+超分子 #3: DNA gyrase subunit B
+超分子 #4: DNA
+分子 #1: DNA gyrase subunit A
+分子 #2: DNA gyrase subunit B
+分子 #3: DNA (58-MER)
+分子 #4: DNA (62-MER)
+分子 #5: PHOSPHOAMINOPHOSPHONIC ACID-ADENYLATE ESTER
+分子 #6: (3~{R})-3-[[4-(3,4-dihydro-2~{H}-pyrano[2,3-c]pyridin-6-ylmethyla...
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | 位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 3-40 / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.3 µm / 倍率(公称値): 130000 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
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精密化 | 空間: REAL | ||||||||||||||||
得られたモデル | PDB-6rkw: |