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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-28735 | |||||||||
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タイトル | DNAPKcs-Ku-LigIV(BRCT)-PAXX-DNA subcomplex in PAXX-LR complex | |||||||||
マップデータ | DKB in PAXX-LR | |||||||||
試料 |
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キーワード | Complex / Kinase / NHEJ / DNA BINDING PROTEIN | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Chen S / He Y | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2023 タイトル: Cryo-EM visualization of DNA-PKcs structural intermediates in NHEJ. 著者: Siyu Chen / Alex Vogt / Linda Lee / Tasmin Naila / Ryan McKeown / Alan E Tomkinson / Susan P Lees-Miller / Yuan He / 要旨: DNA double-strand breaks (DSBs), one of the most cytotoxic forms of DNA damage, can be repaired by the tightly regulated nonhomologous end joining (NHEJ) machinery (Stinson and Loparo and Zhao ). ...DNA double-strand breaks (DSBs), one of the most cytotoxic forms of DNA damage, can be repaired by the tightly regulated nonhomologous end joining (NHEJ) machinery (Stinson and Loparo and Zhao ). Core NHEJ factors form an initial long-range (LR) synaptic complex that transitions into a DNA-PKcs (DNA-dependent protein kinase, catalytic subunit)-free, short-range state to align the DSB ends (Chen ). Using single-particle cryo-electron microscopy, we have visualized three additional key NHEJ complexes representing different transition states, with DNA-PKcs adopting distinct dimeric conformations within each of them. Upon DNA-PKcs autophosphorylation, the LR complex undergoes a substantial conformational change, with both Ku and DNA-PKcs rotating outward to promote DNA break exposure and DNA-PKcs dissociation. We also captured a dimeric state of catalytically inactive DNA-PKcs, which resembles structures of other PIKK (Phosphatidylinositol 3-kinase-related kinase) family kinases, revealing a model of the full regulatory cycle of DNA-PKcs during NHEJ. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_28735.map.gz | 395.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-28735-v30.xml emd-28735.xml | 28.2 KB 28.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_28735_fsc.xml | 20.3 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_28735.png | 59.8 KB | ||
その他 | emd_28735_half_map_1.map.gz emd_28735_half_map_2.map.gz | 339.4 MB 337.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28735 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28735 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_28735_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_28735_full_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_28735_validation.xml.gz | 26.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_28735_validation.cif.gz | 35.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-28735 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-28735 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_28735.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 421.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | DKB in PAXX-LR | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.079 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: half1
ファイル | emd_28735_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half2
ファイル | emd_28735_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : NHEJ Long-range complex with PAXX
全体 | 名称: NHEJ Long-range complex with PAXX |
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要素 |
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-超分子 #1: NHEJ Long-range complex with PAXX
超分子 | 名称: NHEJ Long-range complex with PAXX / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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分子量 | 理論値: 1.75 MDa |
-分子 #1: XRCC6_HUMAN
分子 | 名称: XRCC6_HUMAN / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO EC番号: 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: unidentified baculovirus (ウイルス) |
配列 | 文字列: MSGWESYYKT EGDEEAEEEQ EENLEASGDY KYSGRDSLIF LVDASKAMFE SQSEDELTPF DMSIQCIQSV YISKIISSDR DLLAVVFYGT EKDKNSVNFK NIYVLQELDN PGAKRILELD QFKGQQGQKR FQDMMGHGSD YSLSEVLWVC ANLFSDVQFK MSHKRIMLFT ...文字列: MSGWESYYKT EGDEEAEEEQ EENLEASGDY KYSGRDSLIF LVDASKAMFE SQSEDELTPF DMSIQCIQSV YISKIISSDR DLLAVVFYGT EKDKNSVNFK NIYVLQELDN PGAKRILELD QFKGQQGQKR FQDMMGHGSD YSLSEVLWVC ANLFSDVQFK MSHKRIMLFT NEDNPHGNDS AKASRARTKA GDLRDTGIFL DLMHLKKPGG FDISLFYRDI ISIAEDEDLR VHFEESSKLE DLLRKVRAKE TRKRALSRLK LKLNKDIVIS VGIYNLVQKA LKPPPIKLYR ETNEPVKTKT RTFNTSTGGL LLPSDTKRSQ IYGSRQIILE KEETEELKRF DDPGLMLMGF KPLVLLKKHH YLRPSLFVYP EESLVIGSST LFSALLIKCL EKEVAALCRY TPRRNIPPYF VALVPQEEEL DDQKIQVTPP GFQLVFLPFA DDKRKMPFTE KIMATPEQVG KMKAIVEKLR FTYRSDSFEN PVLQQHFRNL EALALDLMEP EQAVDLTLPK VEAMNKRLGS LVDEFKELVY PPDYNPEGKV TKRKHDNEGS GSKRPKVEYS EEELKTHISK GTLGKFTVPM LKEACRAYGL KSGLKKQELL EALTKHFQD |
-分子 #2: XRCC5_HUMAN X-ray repair cross complementing protein 5
分子 | 名称: XRCC5_HUMAN X-ray repair cross complementing protein 5 タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO EC番号: 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: unidentified baculovirus (ウイルス) |
配列 | 文字列: MVRSGNKAAV VLCMDVGFTM SNSIPGIESP FEQAKKVITM FVQRQVFAEN KDEIALVLFG TDGTDNPLSG GDQYQNITVH RHLMLPDFDL LEDIESKIQP GSQQADFLDA LIVSMDVIQH ETIGKKFEKR HIEIFTDLSS RFSKSQLDII IHSLKKCDIS LQFFLPFSLG ...文字列: MVRSGNKAAV VLCMDVGFTM SNSIPGIESP FEQAKKVITM FVQRQVFAEN KDEIALVLFG TDGTDNPLSG GDQYQNITVH RHLMLPDFDL LEDIESKIQP GSQQADFLDA LIVSMDVIQH ETIGKKFEKR HIEIFTDLSS RFSKSQLDII IHSLKKCDIS LQFFLPFSLG KEDGSGDRGD GPFRLGGHGP SFPLKGITEQ QKEGLEIVKM VMISLEGEDG LDEIYSFSES LRKLCVFKKI ERHSIHWPCR LTIGSNLSIR IAAYKSILQE RVKKTWTVVD AKTLKKEDIQ KETVYCLNDD DETEVLKEDI IQGFRYGSDI VPFSKVDEEQ MKYKSEGKCF SVLGFCKSSQ VQRRFFMGNQ VLKVFAARDD EAAAVALSSL IHALDDLDMV AIVRYAYDKR ANPQVGVAFP HIKHNYECLV YVQLPFMEDL RQYMFSSLKN SKKYAPTEAQ LNAVDALIDS MSLAKKDEKT DTLEDLFPTT KIPNPRFQRL FQCLLHRALH PREPLPPIQQ HIWNMLNPPA EVTTKSQIPL SKIKTLFPLI EAKKKDQVTA QEIFQDNHED GPTAKKLKTE QGGAHFSVSS LAEGSVTSVG SVNPAENFRV LVKQKKASFE EASNQLINHI EQFLDTNETP YFMKSIDCIR AFREEAIKFS EEQRFNNFLK ALQEKVEIKQ LNHFWEIVVQ DGITLITKEE ASGSSVTAEE AKKFLAPKDK PSGDTAAVFE EGGDVDDLLD MI |
-分子 #3: PRKDC_HUMAN DNA-dependent protein kinase catalytic subunit
分子 | 名称: PRKDC_HUMAN DNA-dependent protein kinase catalytic subunit タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 光学異性体: LEVO / EC番号: non-specific serine/threonine protein kinase |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MAGSGAGVRC SLLRLQETLS AADRCGAALA GHQLIRGLGQ ECVLSSSPAV LALQTSLVFS RDFGLLVFVR KSLNSIEFRE CREEILKFLC IFLEKMGQKI APYSVEIKNT CTSVYTKDRA AKCKIPALDL LIKLLQTFRS SRLMDEFKIG ELFSKFYGEL ALKKKIPDTV ...文字列: MAGSGAGVRC SLLRLQETLS AADRCGAALA GHQLIRGLGQ ECVLSSSPAV LALQTSLVFS RDFGLLVFVR KSLNSIEFRE CREEILKFLC IFLEKMGQKI APYSVEIKNT CTSVYTKDRA AKCKIPALDL LIKLLQTFRS SRLMDEFKIG ELFSKFYGEL ALKKKIPDTV LEKVYELLGL LGEVHPSEMI NNAENLFRAF LGELKTQMTS AVREPKLPVL AGCLKGLSSL LCNFTKSMEE DPQTSREIFN FVLKAIRPQI DLKRYAVPSA GLRLFALHAS QFSTCLLDNY VSLFEVLLKW CAHTNVELKK AALSALESFL KQVSNMVAKN AEMHKNKLQY FMEQFYGIIR NVDSNNKELS IAIRGYGLFA GPCKVINAKD VDFMYVELIQ RCKQMFLTQT DTGDDRVYQM PSFLQSVASV LLYLDTVPEV YTPVLEHLVV MQIDSFPQYS PKMQLVCCRA IVKVFLALAA KGPVLRNCIS TVVHQGLIRI CSKPVVLPKG PESESEDHRA SGEVRTGKWK VPTYKDYVDL FRHLLSSDQM MDSILADEAF FSVNSSSESL NHLLYDEFVK SVLKIVEKLD LTLEIQTVGE QENGDEAPGV WMIPTSDPAA NLHPAKPKDF SAFINLVEFC REILPEKQAE FFEPWVYSFS YELILQSTRL PLISGFYKLL SITVRNAKKI KYFEGVSPKS LKHSPEDPEK YSCFALFVKF GKEVAVKMKQ YKDELLASCL TFLLSLPHNI IELDVRAYVP ALQMAFKLGL SYTPLAEVGL NALEEWSIYI DRHVMQPYYK DILPCLDGYL KTSALSDETK NNWEVSALSR AAQKGFNKVV LKHLKKTKNL SSNEAISLEE IRIRVVQMLG SLGGQINKNL LTVTSSDEMM KSYVAWDREK RLSFAVPFRE MKPVIFLDVF LPRVTELALT ASDRQTKVAA CELLHSMVMF MLGKATQMPE GGQGAPPMYQ LYKRTFPVLL RLACDVDQVT RQLYEPLVMQ LIHWFTNNKK FESQDTVALL EAILDGIVDP VDSTLRDFCG RCIREFLKWS IKQITPQQQE KSPVNTKSLF KRLYSLALHP NAFKRLGASL AFNNIYREFR EEESLVEQFV FEALVIYMES LALAHADEKS LGTIQQCCDA IDHLCRIIEK KHVSLNKAKK RRLPRGFPPS ASLCLLDLVK WLLAHCGRPQ TECRHKSIEL FYKFVPLLPG NRSPNLWLKD VLKEEGVSFL INTFEGGGCG QPSGILAQPT LLYLRGPFSL QATLCWLDLL LAALECYNTF IGERTVGALQ VLGTEAQSSL LKAVAFFLES IAMHDIIAAE KCFGTGAAGN RTSPQEGERY NYSKCTVVVR IMEFTTTLLN TSPEGWKLLK KDLCNTHLMR VLVQTLCEPA SIGFNIGDVQ VMAHLPDVCV NLMKALKMSP YKDILETHLR EKITAQSIEE LCAVNLYGPD AQVDRSRLAA VVSACKQLHR AGLLHNILPS QSTDLHHSVG TELLSLVYKG IAPGDERQCL PSLDLSCKQL ASGLLELAFA FGGLCERLVS LLLNPAVLST ASLGSSQGSV IHFSHGEYFY SLFSETINTE LLKNLDLAVL ELMQSSVDNT KMVSAVLNGM LDQSFRERAN QKHQGLKLAT TILQHWKKCD SWWAKDSPLE TKMAVLALLA KILQIDSSVS FNTSHGSFPE VFTTYISLLA DTKLDLHLKG QAVTLLPFFT SLTGGSLEEL RRVLEQLIVA HFPMQSREFP PGTPRFNNYV DCMKKFLDAL ELSQSPMLLE LMTEVLCREQ QHVMEELFQS SFRRIARRGS CVTQVGLLES VYEMFRKDDP RLSFTRQSFV DRSLLTLLWH CSLDALREFF STIVVDAIDV LKSRFTKLNE STFDTQITKK MGYYKILDVM YSRLPKDDVH AKESKINQVF HGSCITEGNE LTKTLIKLCY DAFTENMAGE NQLLERRRLY HCAAYNCAIS VICCVFNELK FYQGFLFSEK PEKNLLIFEN LIDLKRRYNF PVEVEVPMER KKKYIEIRKE AREAANGDSD GPSYMSSLSY LADSTLSEEM SQFDFSTGVQ SYSYSSQDPR PATGRFRRRE QRDPTVHDDV LELEMDELNR HECMAPLTAL VKHMHRSLGP PQGEEDSVPR DLPSWMKFLH GKLGNPIVPL NIRLFLAKLV INTEEVFRPY AKHWLSPLLQ LAASENNGGE GIHYMVVEIV ATILSWTGLA TPTGVPKDEV LANRLLNFLM KHVFHPKRAV FRHNLEIIKT LVECWKDCLS IPYRLIFEKF SGKDPNSKDN SVGIQLLGIV MANDLPPYDP QCGIQSSEYF QALVNNMSFV RYKEVYAAAA EVLGLILRYV MERKNILEES LCELVAKQLK QHQNTMEDKF IVCLNKVTKS FPPLADRFMN AVFFLLPKFH GVLKTLCLEV VLCRVEGMTE LYFQLKSKDF VQVMRHRDDE RQKVCLDIIY KMMPKLKPVE LRELLNPVVE FVSHPSTTCR EQMYNILMWI HDNYRDPESE TDNDSQEIFK LAKDVLIQGL IDENPGLQLI IRNFWSHETR LPSNTLDRLL ALNSLYSPKI EVHFLSLATN FLLEMTSMSP DYPNPMFEHP LSECEFQEYT IDSDWRFRST VLTPMFVETQ ASQGTLQTRT QEGSLSARWP VAGQIRATQQ QHDFTLTQTA DGRSSFDWLT GSSTDPLVDH TSPSSDSLLF AHKRSERLQR APLKSVGPDF GKKRLGLPGD EVDNKVKGAA GRTDLLRLRR RFMRDQEKLS LMYARKGVAE QKREKEIKSE LKMKQDAQVV LYRSYRHGDL PDIQIKHSSL ITPLQAVAQR DPIIAKQLFS SLFSGILKEM DKFKTLSEKN NITQKLLQDF NRFLNTTFSF FPPFVSCIQD ISCQHAALLS LDPAAVSAGC LASLQQPVGI RLLEEALLRL LPAELPAKRV RGKARLPPDV LRWVELAKLY RSIGEYDVLR GIFTSEIGTK QITQSALLAE ARSDYSEAAK QYDEALNKQD WVDGEPTEAE KDFWELASLD CYNHLAEWKS LEYCSTASID SENPPDLNKI WSEPFYQETY LPYMIRSKLK LLLQGEADQS LLTFIDKAMH GELQKAILEL HYSQELSLLY LLQDDVDRAK YYIQNGIQSF MQNYSSIDVL LHQSRLTKLQ SVQALTEIQE FISFISKQGN LSSQVPLKRL LNTWTNRYPD AKMDPMNIWD DIITNRCFFL SKIEEKLTPL PEDNSMNVDQ DGDPSDRMEV QEQEEDISSL IRSCKFSMKM KMIDSARKQN NFSLAMKLLK ELHKESKTRD DWLVSWVQSY CRLSHCRSRS QGCSEQVLTV LKTVSLLDEN NVSSYLSKNI LAFRDQNILL GTTYRIIANA LSSEPACLAE IEEDKARRIL ELSGSSSEDS EKVIAGLYQR AFQHLSEAVQ AAEEEAQPPS WSCGPAAGVI DAYMTLADFC DQQLRKEEEN ASVIDSAELQ AYPALVVEKM LKALKLNSNE ARLKFPRLLQ IIERYPEETL SLMTKEISSV PCWQFISWIS HMVALLDKDQ AVAVQHSVEE ITDNYPQAIV YPFIISSESY SFKDTSTGHK NKEFVARIKS KLDQGGVIQD FINALDQLSN PELLFKDWSN DVRAELAKTP VNKKNIEKMY ERMYAALGDP KAPGLGAFRR KFIQTFGKEF DKHFGKGGSK LLRMKLSDFN DITNMLLLKM NKDSKPPGNL KECSPWMSDF KVEFLRNELE IPGQYDGRGK PLPEYHVRIA GFDERVTVMA SLRRPKRIII RGHDEREHPF LVKGGEDLRQ DQRVEQLFQV MNGILAQDSA CSQRALQLRT YSVVPMTSRL GLIEWLENTV TLKDLLLNTM SQEEKAAYLS DPRAPPCEYK DWLTKMSGKH DVGAYMLMYK GANRTETVTS FRKRESKVPA DLLKRAFVRM STSPEAFLAL RSHFASSHAL ICISHWILGI GDRHLNNFMV AMETGGVIGI DFGHAFGSAT QFLPVPELMP FRLTRQFINL MLPMKETGLM YSIMVHALRA FRSDPGLLTN TMDVFVKEPS FDWKNFEQKM LKKGGSWIQE INVAEKNWYP RQKICYAKRK LAGANPAVIT CDELLLGHEK APAFRDYVAV ARGSKDHNIR AQEPESGLSE ETQVKCLMDQ ATDPNILGRT WEGWEPWM |
-分子 #4: PAXX_HUMAN protein PAXX
分子 | 名称: PAXX_HUMAN protein PAXX / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MDPLSPPLCT LPPGPEPPRF VCYCEGEESG EGDRGGFNLY VTDAAELWST CFTPDSLAAL KARFGLSAAE DITPRFRAAC EQQAVALTLQ EDRASLTLSG GPSALAFDLS KVPGPEAAPR LRALTLGLAK RVWSLERRLA AAEETAVSPR KSPRPAGPQL FLPDPDPQRG ...文字列: MDPLSPPLCT LPPGPEPPRF VCYCEGEESG EGDRGGFNLY VTDAAELWST CFTPDSLAAL KARFGLSAAE DITPRFRAAC EQQAVALTLQ EDRASLTLSG GPSALAFDLS KVPGPEAAPR LRALTLGLAK RVWSLERRLA AAEETAVSPR KSPRPAGPQL FLPDPDPQRG GPGPGVRRRC PGESLINPGF KSKKPAGGVD FDET |
-分子 #5: DNLI4_HUAMN DNA ligase 4
分子 | 名称: DNLI4_HUAMN DNA ligase 4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA ligase (ATP) |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MAASQTSQTV ASHVPFADLC STLERIQKSK GRAEKIRHFR EFLDSWRKFH DALHKNHKDV TDSFYPAMRL ILPQLERERM AYGIKETMLA KLYIELLNLP RDGKDALKLL NYRTPTGTHG DAGDFAMIAY FVLKPRCLQK GSLTIQQVND LLDSIASNNS AKRKDLIKKS ...文字列: MAASQTSQTV ASHVPFADLC STLERIQKSK GRAEKIRHFR EFLDSWRKFH DALHKNHKDV TDSFYPAMRL ILPQLERERM AYGIKETMLA KLYIELLNLP RDGKDALKLL NYRTPTGTHG DAGDFAMIAY FVLKPRCLQK GSLTIQQVND LLDSIASNNS AKRKDLIKKS LLQLITQSSA LEQKWLIRMI IKDLKLGVSQ QTIFSVFHND AAELHNVTTD LEKVCRQLHD PSVGLSDISI TLFSAFKPML AAIADIEHIE KDMKHQSFYI ETKLDGERMQ MHKDGDVYKY FSRNGYNYTD QFGASPTEGS LTPFIHNAFK ADIQICILDG EMMAYNPNTQ TFMQKGTKFD IKRMVEDSDL QTCYCVFDVL MVNNKKLGHE TLRKRYEILS SIFTPIPGRI EIVQKTQAHT KNEVIDALNE AIDKREEGIM VKQPLSIYKP DKRGEGWLKI KPEYVSGLMD ELDILIVGGY WGKGSRGGMM SHFLCAVAEK PPPGEKPSVF HTLSRVGSGC TMKELYDLGL KLAKYWKPFH RKAPPSSILC GTEKPEVYIE PCNSVIVQIK AAEIVPSDMY KTGCTLRFPR IEKIRDDKEW HECMTLDDLE QLRGKASGKL ASKHLYIGGD DEPQEKKRKA APKMKKVIGI IEHLKAPNLT NVNKISNIFE DVEFCVMSGT DSQPKPDLEN RIAEFGGYIV QNPGPDTYCV IAGSENIRVK NIILSNKHDV VKPAWLLECF KTKSFVPWQP RFMIHMCPST KEHFAREYDC YGDSYFIDTD LNQLKEVFSG IKNSNEQTPE EMASLIADLE YRYSWDCSPL SMFRRHTVYL DSYAVINDLS TKNEGTRLAI KALELRFHGA KVVSCLAEGV SHVIIGEDHS RVADFKAFRR TFKRKFKILK ESWVTDSIDK CELQEENQYL I |
-分子 #6: DNA(31-MER)
分子 | 名称: DNA(31-MER) / タイプ: dna / ID: 6 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: (DT)(DC)(DT)(DA)(DA)(DG)(DA)(DA)(DC)(DT) (DC)(DT)(DG)(DA)(DT)(DG)(DT)(DC)(DA)(DG) (DT)(DA)(DG)(DA)(DT)(DT)(DA)(DC)(DA)(DC) (DT) |
-分子 #7: DNA(30-MER)
分子 | 名称: DNA(30-MER) / タイプ: dna / ID: 7 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: (DG)(DT)(DG)(DT)(DA)(DA)(DT)(DC)(DT)(DA) (DC)(DT)(DG)(DA)(DC)(DA)(DT)(DC)(DA)(DG) (DA)(DG)(DT)(DT)(DC)(DT)(DT)(DA)(DG) (DA) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 2 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.9 |
グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: GRAPHENE OXIDE / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 10 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 302 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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温度 | 最低: 70.0 K / 最高: 70.0 K |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / デジタル化 - サイズ - 横: 5760 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 11006 / 平均露光時間: 4.0 sec. / 平均電子線量: 65.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 2.0 µm / 倍率(補正後): 60000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 倍率(公称値): 60000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT 当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient |
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