+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-26439 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Transcription antitermination complex: NusA-containing "engaged" Qlambda-loading complex | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | RNA polymerase / DNA Binding / transcription / Q-dependent antitermination / Q antitermination factor / GENE REGULATION / TRANSFERASE-DNA-RNA complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / translation elongation factor activity / nitrate assimilation / DNA-directed RNA polymerase complex ...submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / translation elongation factor activity / nitrate assimilation / DNA-directed RNA polymerase complex / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA-templated transcription initiation / transcription antitermination / cell motility / DNA-templated transcription termination / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat / intracellular iron ion homeostasis / protein dimerization activity / DNA-binding transcription factor activity / response to antibiotic / nucleotide binding / DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) / Escherichia phage Lambda (λファージ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.36 Å | |||||||||
データ登録者 | Yin Z / Ebright RH | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2022 タイトル: In transcription antitermination by Qλ, NusA induces refolding of Qλ to form a nozzle that extends the RNA polymerase RNA-exit channel. 著者: Zhou Yin / Jeremy G Bird / Jason T Kaelber / Bryce E Nickels / Richard H Ebright / 要旨: Lambdoid bacteriophage Q proteins are transcription antipausing and antitermination factors that enable RNA polymerase (RNAP) to read through pause and termination sites. Q proteins load onto RNAP ...Lambdoid bacteriophage Q proteins are transcription antipausing and antitermination factors that enable RNA polymerase (RNAP) to read through pause and termination sites. Q proteins load onto RNAP engaged in promoter-proximal pausing at a Q binding element (QBE) and adjacent sigma-dependent pause element to yield a Q-loading complex, and they translocate with RNAP as a pausing-deficient, termination-deficient Q-loaded complex. In previous work, we showed that the Q protein of bacteriophage 21 (Q21) functions by forming a nozzle that narrows and extends the RNAP RNA-exit channel, preventing formation of pause and termination RNA hairpins. Here, we report atomic structures of four states on the pathway of antitermination by the Q protein of bacteriophage λ (Qλ), a Q protein that shows no sequence similarity to Q21 and that, unlike Q21, requires the transcription elongation factor NusA for efficient antipausing and antitermination. We report structures of Qλ, the Qλ-QBE complex, the NusA-free pre-engaged Qλ-loading complex, and the NusA-containing engaged Qλ-loading complex. The results show that Qλ, like Q21, forms a nozzle that narrows and extends the RNAP RNA-exit channel, preventing formation of RNA hairpins. However, the results show that Qλ has no three-dimensional structural similarity to Q21, employs a different mechanism of QBE recognition than Q21, and employs a more complex process for loading onto RNAP than Q21, involving recruitment of Qλ to form a pre-engaged loading complex, followed by NusA-facilitated refolding of Qλ to form an engaged loading complex. The results establish that Qλ and Q21 are not structural homologs and are solely functional analogs. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
添付画像 |
---|
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_26439.map.gz | 39.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-26439-v30.xml emd-26439.xml | 32.7 KB 32.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_26439_fsc.xml | 9.1 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_26439.png | 147.1 KB | ||
Filedesc metadata | emd-26439.cif.gz | 10 KB | ||
その他 | emd_26439_half_map_1.map.gz emd_26439_half_map_2.map.gz | 49.7 MB 49.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-26439 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-26439 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_26439_validation.pdf.gz | 993.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_26439_full_validation.pdf.gz | 993.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_26439_validation.xml.gz | 16.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_26439_validation.cif.gz | 21.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-26439 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-26439 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_26439.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.024 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_26439_half_map_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_26439_half_map_2.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Transcription antitermination complex: NusA-containing "engaged" ...
+超分子 #1: Transcription antitermination complex: NusA-containing "engaged" ...
+分子 #1: DNA (53-MER)
+分子 #2: DNA (52-MER)
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
+分子 #5: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
+分子 #6: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
+分子 #7: RNA polymerase sigma factor RpoD
+分子 #8: Transcription termination/antitermination protein NusA
+分子 #9: Antitermination protein
+分子 #10: RNA (5'-R(*UP*GP*GP*GP*AP*GP*AP*GP*GP*UP*A)-3')
+分子 #11: ZINC ION
+分子 #12: MAGNESIUM ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 9 mg/mL | |||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
緩衝液 | pH: 7.9 構成要素:
| |||||||||||||||
グリッド | モデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 300 sec. | |||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 292 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1643 / 平均露光時間: 5.0 sec. / 平均電子線量: 1.1 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル |
| ||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 100 / 当てはまり具合の基準: Correlation coefficient | ||||||||||
得られたモデル | PDB-7ubn: |