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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-23869 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of cortical microtubule from Toxoplasma gondii (with TrxL2) | |||||||||
![]() | Composite map of T. gondii cortical microtubule (with TrxL2) | |||||||||
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機能・相同性 | ![]() microtubule-based process / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / structural constituent of cytoskeleton / microtubule cytoskeleton organization / mitotic cell cycle / microtubule / hydrolase activity / GTPase activity / GTP binding / metal ion binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | |||||||||
![]() | Wang X / Brown A / Sibley LD / Zhang R | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cryo-EM structure of cortical microtubules from human parasite Toxoplasma gondii identifies their microtubule inner proteins. 著者: Xiangli Wang / Yong Fu / Wandy L Beatty / Meisheng Ma / Alan Brown / L David Sibley / Rui Zhang / ![]() 要旨: In living cells, microtubules (MTs) play pleiotropic roles, which require very different mechanical properties. Unlike the dynamic MTs found in the cytoplasm of metazoan cells, the specialized ...In living cells, microtubules (MTs) play pleiotropic roles, which require very different mechanical properties. Unlike the dynamic MTs found in the cytoplasm of metazoan cells, the specialized cortical MTs from Toxoplasma gondii, a prevalent human pathogen, are extraordinarily stable and resistant to detergent and cold treatments. Using single-particle cryo-EM, we determine their ex vivo structure and identify three proteins (TrxL1, TrxL2 and SPM1) as bona fide microtubule inner proteins (MIPs). These three MIPs form a mesh on the luminal surface and simultaneously stabilize the tubulin lattice in both longitudinal and lateral directions. Consistent with previous observations, deletion of the identified MIPs compromises MT stability and integrity under challenges by chemical treatments. We also visualize a small molecule like density at the Taxol-binding site of β-tubulin. Our results provide the structural basis to understand the stability of cortical MTs and suggest an evolutionarily conserved mechanism of MT stabilization from the inside. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 64.4 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 25.6 KB 25.6 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 145.9 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 49.9 MB 229.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 449.5 KB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 449.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Composite map of T. gondii cortical microtubule (with TrxL2) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.096 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: Unsharpened composite map of T. gondii cortical microtubule...
ファイル | emd_23869_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Unsharpened composite map of T. gondii cortical microtubule (with TrxL2) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-追加マップ: B-factor sharpened composite map of T. gondii cortical...
ファイル | emd_23869_additional_2.map | ||||||||||||
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注釈 | B-factor sharpened composite map of T. gondii cortical microtubule (with TrxL2) | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : cortical microtubule with associated MIPs
全体 | 名称: cortical microtubule with associated MIPs |
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要素 |
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-超分子 #1: cortical microtubule with associated MIPs
超分子 | 名称: cortical microtubule with associated MIPs / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#5 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
-分子 #1: Microtubule associated protein SPM1
分子 | 名称: Microtubule associated protein SPM1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 24 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 38.84575 KDa |
配列 | 文字列: MSGGNSNTPK KLPSEEGSDY GYPQKPQKYL PKSEQAEPDY SACCKGNDAY KGASHGTVQF SHPEEAQKYA GAAAGAETIQ RGRERVAAD RQPRAAGDVP ARRLHLSDVD EAHRGQSPSR HPGYCVEELC TCGMHKCIPS RAPVPFTGST QYRQEFVPKP L PPPTQVSQ ...文字列: MSGGNSNTPK KLPSEEGSDY GYPQKPQKYL PKSEQAEPDY SACCKGNDAY KGASHGTVQF SHPEEAQKYA GAAAGAETIQ RGRERVAAD RQPRAAGDVP ARRLHLSDVD EAHRGQSPSR HPGYCVEELC TCGMHKCIPS RAPVPFTGST QYRQEFVPKP L PPPTQVSQ VTLPPSLPFE AESSYRTEFV AKPLPPPAKF SEVKLPPTLP FHGESAYRTD YVPKPLPEVA KPVEVKLPPT LP FNAQSCY RSEYVAKPLP PPVQTVEVKL PPSLPFEGST HYRDEFQVKP LPPATKVTEV KLPPSLPFDA TSMYRSDYVA KSN PICPVS KLPQYPAATY PQNHVFWDPD TKQWY |
-分子 #2: Tubulin alpha chain
分子 | 名称: Tubulin alpha chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 26 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 50.166645 KDa |
配列 | 文字列: MREVISIHVG QAGIQIGNAC WELFCLEHGI QPDGQMPSDK TIGGGDDAFN TFFSETGAGK HVPRCVFLDL EPTVVDEVRT GTYRHLFHP EQLISGKEDA ANNFARGHYT IGKEIVDLSL DRIRKLADNC TGLQGFLMFN AVGGGTGSGL GCLLLERLSV D YGKKSKLN ...文字列: MREVISIHVG QAGIQIGNAC WELFCLEHGI QPDGQMPSDK TIGGGDDAFN TFFSETGAGK HVPRCVFLDL EPTVVDEVRT GTYRHLFHP EQLISGKEDA ANNFARGHYT IGKEIVDLSL DRIRKLADNC TGLQGFLMFN AVGGGTGSGL GCLLLERLSV D YGKKSKLN FCSWPSPQVS TAVVEPYNSV LSTHSLLEHT DVAVMLDNEA IYDICRRNLD IERPTYTNLN RLIAQVISSL TA SLRFDGA LNVDVTEFQT NLVPYPRIHF MLSSYAPIIS AEKAYHEQLS VAEITNSAFE PASMMAKCDP RHGKYMACCL MYR GDVVPK DVNAAVATIK TKRTIQFVDW CPTGFKCGIN YQPPTVVPGG DLAKVMRAVC MISNSTAIAE VFSRMDHKFD LMYA KRAFV HWYVGEGMEE GEFSEAREDL AALEKDYEEV GIETAEGEGE EEGYGDEY |
-分子 #3: Tubulin beta chain
分子 | 名称: Tubulin beta chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 26 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 50.119121 KDa |
配列 | 文字列: MREIVHVQGG QCGNQIGAKF WEVISDEHGI DPTGTYCGDS DLQLERINVF YNEATGGRFV PRAILMDLEP GTMDSVRAGP FGQLFRPDN FVFGQTGAGN NWAKGHYTEG AELIDSVLDV VRKEAEGCDC LQGFQITHSL GGGTGSGMGT LLISKVREEY P DRIMETFS ...文字列: MREIVHVQGG QCGNQIGAKF WEVISDEHGI DPTGTYCGDS DLQLERINVF YNEATGGRFV PRAILMDLEP GTMDSVRAGP FGQLFRPDN FVFGQTGAGN NWAKGHYTEG AELIDSVLDV VRKEAEGCDC LQGFQITHSL GGGTGSGMGT LLISKVREEY P DRIMETFS VFPSPKVSDT VVEPYNATLS VHQLVENADE VQVIDNEALY DICFRTLKLT TPTYGDLNHL VSAAMSGVTC CL RFPGQLN SDLRKLAVNL IPFPRLHFFL IGFAPLTSRG SQQYRALSVP ELTQQMFDAK NMMCASDPRH GRYLTASAMF RGR MSTKEV DEQMLNVQNK NSSYFVEWIP NNMKSSVCDI PPKGLKMSVT FVGNSTAIQE MFKRVSDQFT AMFRRKAFLH WYTG EGMDE MEFTEAESNM NDLVSEYQQY QDATAEEEGE FDEEEGEMGA EEGA |
-分子 #4: PDI family protein
分子 | 名称: PDI family protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 20 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 24.939332 KDa |
配列 | 文字列: MSQPVFASPL NVEKRRLNEE RALMQAQKAG GEGVNIQLPP NYGDMDLILF PEGSLKNSNN TVIPQSHLKG KSVALYFADG ADPKCASLL PFLLNYYRTM NEGGANQKIE IIFVSLDRDR EAFESHRAHM PWLSIDLENP LTEILKRHFR VMKEYEVPTY G YGSRTGVP ...文字列: MSQPVFASPL NVEKRRLNEE RALMQAQKAG GEGVNIQLPP NYGDMDLILF PEGSLKNSNN TVIPQSHLKG KSVALYFADG ADPKCASLL PFLLNYYRTM NEGGANQKIE IIFVSLDRDR EAFESHRAHM PWLSIDLENP LTEILKRHFR VMKEYEVPTY G YGSRTGVP SVIVIGSDGR EAQFLPICSG LEEGDRALLR WDWRNTKFAS DQFHVRPTLL EQ |
-分子 #5: PDI family protein
分子 | 名称: PDI family protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 21.687934 KDa |
配列 | 文字列: MLAADCFFGP DVVKRTQQGN YVPVRPDHFA GVSVALFFAK AGHSKCAQIV PVVRQFYKTT NFSGEKAVIE IIYVSLDKDE QDFERVRAL MPWCSVEYKS CLRKKLIERY RVPNGELAFG TVRIPSTAIP LLIVIGPNGE EAGRMNFQQS DEFVLQRWDY R FNKWPGSA ...文字列: MLAADCFFGP DVVKRTQQGN YVPVRPDHFA GVSVALFFAK AGHSKCAQIV PVVRQFYKTT NFSGEKAVIE IIYVSLDKDE QDFERVRAL MPWCSVEYKS CLRKKLIERY RVPNGELAFG TVRIPSTAIP LLIVIGPNGE EAGRMNFQQS DEFVLQRWDY R FNKWPGSA QRLRTLNDAT DPWKKRLPQN V |
-分子 #6: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
分子 | 名称: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 26 / 式: GTP |
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分子量 | 理論値: 523.18 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-GTP: |
-分子 #7: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 26 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-分子 #8: GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE
分子 | 名称: GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE / タイプ: ligand / ID: 8 / コピー数: 26 / 式: GDP |
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分子量 | 理論値: 443.201 Da |
Chemical component information | ![]() ChemComp-GDP: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | filament |
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試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 289 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blot for 4 seconds with a blot force of -15. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 3838 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3710 pixel / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 9231 / 平均露光時間: 9.0 sec. / 平均電子線量: 63.7 e/Å2 詳細: Images were collected in counting mode, with an exposure rate of 8.5 electrons/pixel/s on the detector camera. |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 最小 デフォーカス(補正後): 1.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.5 µm / 倍率(公称値): 105000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | (PDB ID: , , ) |
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詳細 | Secondary structure, Ramachandran, and rotamer restraints were applied during refinement. The nonbonded_weight value was set to 500 to reduce the clashes between atoms. |
精密化 | プロトコル: AB INITIO MODEL |
得られたモデル | ![]() PDB-7miz: |