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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-11491 | ||||||||||||
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タイトル | Human mTOR complex 2 with additional density close to the mLST8 | ||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||
試料 |
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生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 8.5 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Scaiola A / Mangia F / Imseng S / Boehringer D / Ban N / Maier T | ||||||||||||
資金援助 | スイス, 3件
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引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2020 タイトル: The 3.2-Å resolution structure of human mTORC2. 著者: Alain Scaiola / Francesca Mangia / Stefan Imseng / Daniel Boehringer / Karolin Berneiser / Mitsugu Shimobayashi / Edward Stuttfeld / Michael N Hall / Nenad Ban / Timm Maier / 要旨: The protein kinase mammalian target of rapamycin (mTOR) is the central regulator of cell growth. Aberrant mTOR signaling is linked to cancer, diabetes, and neurological disorders. mTOR exerts its ...The protein kinase mammalian target of rapamycin (mTOR) is the central regulator of cell growth. Aberrant mTOR signaling is linked to cancer, diabetes, and neurological disorders. mTOR exerts its functions in two distinct multiprotein complexes, mTORC1 and mTORC2. Here, we report a 3.2-Å resolution cryo-EM reconstruction of mTORC2. It reveals entangled folds of the defining Rictor and the substrate-binding SIN1 subunits, identifies the carboxyl-terminal domain of Rictor as the source of the rapamycin insensitivity of mTORC2, and resolves mechanisms for mTORC2 regulation by complex destabilization. Two previously uncharacterized small-molecule binding sites are visualized, an inositol hexakisphosphate (InsP6) pocket in mTOR and an mTORC2-specific nucleotide binding site in Rictor, which also forms a zinc finger. Structural and biochemical analyses suggest that InsP6 and nucleotide binding do not control mTORC2 activity directly but rather have roles in folding or ternary interactions. These insights provide a firm basis for studying mTORC2 signaling and for developing mTORC2-specific inhibitors. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_11491.map.gz | 117.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-11491-v30.xml emd-11491.xml | 22 KB 22 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_11491.png | 40.9 KB | ||
マスクデータ | emd_11491_msk_1.map | 125 MB | マスクマップ | |
その他 | emd_11491_half_map_1.map.gz emd_11491_half_map_2.map.gz | 116.1 MB 116.1 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11491 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-11491 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_11491_validation.pdf.gz | 652.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_11491_full_validation.pdf.gz | 651.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_11491_validation.xml.gz | 12.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11491 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-11491 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_11491.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.344 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_11491_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_11491_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_11491_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : human mTOR complex 2
全体 | 名称: human mTOR complex 2 |
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要素 |
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-超分子 #1: human mTOR complex 2
超分子 | 名称: human mTOR complex 2 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
分子量 | 理論値: 1.15 MDa |
-分子 #1: Target of rapamycin complex 2 subunit MAPKAP1
分子 | 名称: Target of rapamycin complex 2 subunit MAPKAP1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: (ACE)AFLDNPTII LAHIRQSHVT SDDTGMCEMV LIDHDVDLEK IHPPSMPGDS GSEIQGSNGE TQGYVYAQS VDITSSWDFG IRRRSNTAQR LERLRKERQN QIKCKNIQWK ERNSKQSAQE L KSLFEKKS LKEKPPISGK QSILSVRLEQ CPLQLNNPFN ...文字列: (ACE)AFLDNPTII LAHIRQSHVT SDDTGMCEMV LIDHDVDLEK IHPPSMPGDS GSEIQGSNGE TQGYVYAQS VDITSSWDFG IRRRSNTAQR LERLRKERQN QIKCKNIQWK ERNSKQSAQE L KSLFEKKS LKEKPPISGK QSILSVRLEQ CPLQLNNPFN EYSKFDGKGH VGTTATKKID VY LPLHSSQ DRLLPMTVVT MASARVQDLI GLICWQYTSE GREPKLNDNV SAYCLHIAED DGE VDTDFP PLDSNEPIHK FGFSTLALVE KYSSPGLTSK ESLFVRINAA HGFSLIQVDN TKVT MKEIL LKAVKRRKGS QKVSGPQYRL EKQSEPNVAV DLDSTLESQS AWEFCLVREN SSRAD GVFE EDSQIDIATV QDMLSSHHYK SFKVSMIHRL RFTTDVQLGI SGDKVEIDPV TNQKAS TKF WIKQKPISID SDLLCACDLA EEKSPSHAIF KLTYLSNHDY KHLYFESDAA TVNEIVL KV NYILESRAST ARADYFAQKQ RKLNRRTSFS FQKEKKSGQQ |
-分子 #2: Rapamycin-insensitive companion of mTOR
分子 | 名称: Rapamycin-insensitive companion of mTOR / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MAAIGRGRSL KNLRVRGRND SGEENVPLDL TREPSDNLRE ILQNVARLQG VSNMRKLGHL NNFTKLLCD IGHSEEKLGF HYEDIIICLR LALLNEAKEV RAAGLRALRY LIQDSSILQK V LKLKVDYL IARCIDIQQS NEVERTQALR LVRKMITVNA SLFPSSVTNS ...文字列: MAAIGRGRSL KNLRVRGRND SGEENVPLDL TREPSDNLRE ILQNVARLQG VSNMRKLGHL NNFTKLLCD IGHSEEKLGF HYEDIIICLR LALLNEAKEV RAAGLRALRY LIQDSSILQK V LKLKVDYL IARCIDIQQS NEVERTQALR LVRKMITVNA SLFPSSVTNS LIAVGNDGLQ ER DRMVRAC IAIICELALQ NPEVVALRGG LNTILKNVID CQLSRINEAL ITTILHLLNH PKT RQYVRA DVELERILAP YTDFHYRHSP DTAEGQLKED REARFLASKM GIIATFRSWA GIIN LCKPG NSGIQSLIGV LCIPNMEIRR GLLEVLYDIF RLPLPVVTEE FIEALLSVDP GRFQD SWRL SDGFVAAEAK TILPHRARSR PDLMDNYLAL ILSAFIRNGL LEGLVEVITN SDDHIS VRA TILLGELLHM ANTILPHSHS HHLHCLPTLM NMAASFDIPK EKRLRASAAL NCLKRFH EM KKRGPKPYSL HLDHIIQKAI ATHQKRDQYL RVQKDIFILK DTEEALLINL RDSQVLQH K ENLEWNWNLI GTILKWPNVN LRNYKDEQLH RFVRRLLYFY KPSSKLYANL DLDFAKAKQ LTVVGCQFTE FLLESEEDGQ GYLEDLVKDI VQWLNASSGM KPERSLQNNG LLTTLSQHYF LFIGTLSCH PHGVKMLEKC SVFQCLLNLC SLKNQDHLLK LTVSSLDYSR DGLARVILSK I LTAATDAC RLYATKHLRV LLRANVEFFN NWGIELLVTQ LHDKNKTISS EALDILDEAC ED KANLHAL IQMKPALSHL GDKGLLLLLR FLSIPKGFSY LNERGYVAKQ LEKWHREYNS KYV DLIEEQ LNEALTTYRK PVDGDNYVRR SNQRLQRPHV YLPIHLYGQL VHHKTGCHLL EVQN IITEL CRNVRTPDLD KWEEIKKLKA SLWALGNIGS SNWGLNLLQE ENVIPDILKL AKQCE VLSI RGTCVYVLGL IAKTKQGCDI LKCHNWDAVR HSRKHLWPVV PDDVEQLCNE LSSIPS TLS LNSESTSSRH NSESESVPSS MFILEDDRFG SSSTSTFFLD INEDTEPTFY DRSGPIK DK NSFPFFASSK LVKNRILNSL TLPNKKHRSS SDPKGGKLSS ESKTSNRRIR TLTEPSVD F NHSDDFTPIS TVQKTLQLET SFMGNKHIED TGSTPSIGEN DLKFTKNFGT ENHRENTSR ERLVVESSTS SHMKIRSQSF NTDTTTSGIS SMSSSPSRET VGVDATTMDT DCGSMSTVVS TKTIKTSHY LTPQSNHLSL SKSNSVSLVP PGSSHTLPRR AQSLKAPSIA TIKSLADCNF S YTSSRDAF GYATLKRLQQ QRMHPSLSHS EALASPAKDV LFTDTITMKA NSFESRLTPS RF MKALSYA SLDKEDLLSP INQNTLQRSS SVRSMVSSAT YGGSDDYIGL ALPVDINDIF QVK DIPYFQ TKNIPPHDDR GARAFAHDAG GLPSGTGGLV KNSFHLLRQQ MSLTEIMNSI HSDA SLFLE STEDTGLQEH TDDNCLYCVC IEILGFQPSN QLSAICSHSD FQDIPYSDWC EQTIH NPLE VVPSKFSGIS GCSDGVSQEG SASSTKSTEL LLGVKTIPDD TPMCRILLRK EVLRLV INL SSSVSTKCHE TGLLTIKEKY PQTFDDICLY SEVSHLLSHC TFRLPCRRFI QELFQDV QF LQMHEEAEAV LATPPKQPIV DTSAES |
-分子 #3: Target of rapamycin complex subunit LST8
分子 | 名称: Target of rapamycin complex subunit LST8 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MNTSPGTVGS DPVILATAGY DHTVRFWQAH SGICTRTVQH QDSQVNALEV TPDRSMIAAA GYQHIRMYD LNSNNPNPII SYDGVNKNIA SVGFHEDGRW MYTGGEDCTA RIWDLRSRNL Q CQRIFQVN APINCVCLHP NQAELIVGDQ SGAIHIWDLK TDHNEQLIPE ...文字列: MNTSPGTVGS DPVILATAGY DHTVRFWQAH SGICTRTVQH QDSQVNALEV TPDRSMIAAA GYQHIRMYD LNSNNPNPII SYDGVNKNIA SVGFHEDGRW MYTGGEDCTA RIWDLRSRNL Q CQRIFQVN APINCVCLHP NQAELIVGDQ SGAIHIWDLK TDHNEQLIPE PEVSITSAHI DP DASYMAA VNSTGNCYVW NLTGGIGDEV TQLIPKTKIP AHTRYALQCR FSPDSTLLAT CSA DQTCKI WRTSNFSLMT ELSIKSGNPG ESSRGWMWGC AFSGDSQYIV TASSDNLARL WCVE TGEIK REYGGHQKAV VCLAFNDSVL G |
-分子 #4: Serine/threonine-protein kinase mTOR
分子 | 名称: Serine/threonine-protein kinase mTOR / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MLGTGPAAAT TAATTSSNVS VLQQFASGLK SRNEETRAKA AKELQHYVTM ELREMSQEES TRFYDQLNH HIFELVSSSD ANERKGGILA IASLIGVEGG NATRIGRFAN YLRNLLPSND P VVMEMASK AIGRLAMAGD TFTAEYVEFE VKRALEWLGA DRNEGRRHAA ...文字列: MLGTGPAAAT TAATTSSNVS VLQQFASGLK SRNEETRAKA AKELQHYVTM ELREMSQEES TRFYDQLNH HIFELVSSSD ANERKGGILA IASLIGVEGG NATRIGRFAN YLRNLLPSND P VVMEMASK AIGRLAMAGD TFTAEYVEFE VKRALEWLGA DRNEGRRHAA VLVLRELAIS VP TFFFQQV QPFFDNIFVA VWDPKQAIRE GAVAALRACL ILTTQREPKE MQKPQWYRHT FEE AEKGFD ETLAKEKGMN RDDRIHGALL ILNELVRISS MEGERLREEM EEITQQQLVH DKYC KDLMG FGTKPRHITP FTSFQAVQPQ QSNALVGLLG YSSHQGLMGF GTSPSPAKST LVESR CCRD LMEEKFDQVC QWVLKCRNSK NSLIQMTILN LLPRLAAFRP SAFTDTQYLQ DTMNHV LSC VKKEKERTAA FQALGLLSVA VRSEFKVYLP RVLDIIRAAL PPKDFAHKRQ KAMQVDA TV FTCISMLARA MGPGIQQDIK ELLEPMLAVG LSPALTAVLY DLSRQIPQLK KDIQDGLL K MLSLVLMHKP LRHPGMPKGL AHQLASPGLT TLPEASDVGS ITLALRTLGS FEFEGHSLT QFVRHCADHF LNSEHKEIRM EAARTCSRLL TPSIHLISGH AHVVSQTAVQ VVADVLSKLL VVGITDPDP DIRYCVLASL DERFDAHLAQ AENLQALFVA LNDQVFEIRE LAICTVGRLS S MNPAFVMP FLRKMLIQIL TELEHSGIGR IKEQSARMLG HLVSNAPRLI RPYMEPILKA LI LKLKDPD PDPNPGVINN VLATIGELAQ VSGLEMRKWV DELFIIIMDM LQDSSLLAKR QVA LWTLGQ LVASTGYVVE PYRKYPTLLE VLLNFLKTEQ NQGTRREAIR VLGLLGALDP YKHK VNIGM IDQSRDASAV SLSESKSSQD SSDYSTSEML VNMGNLPLDE FYPAVSMVAL MRIFR DQSL SHHHTMVVQA ITFIFKSLGL KCVQFLPQVM PTFLNVIRVC DGAIREFLFQ QLGMLV SFV KSHIRPYMDE IVTLMREFWV MNTSIQSTII LLIEQIVVAL GGEFKLYLPQ LIPHMLR VF MHDNSPGRIV SIKLLAAIQL FGANLDDYLH LLLPPIVKLF DAPEAPLPSR KAALETVD R LTESLDFTDY ASRIIHPIVR TLDQSPELRS TAMDTLSSLV FQLGKKYQIF IPMVNKVLV RHRINHQRYD VLICRIVKGY TLADEEEDPL IYQHRMLRSG QGDALASGPV ETGPMKKLHV STINLQKAW GAARRVSKDD WLEWLRRLSL ELLKDSSSPS LRSCWALAQA YNPMARDLFN A AFVSCWSE LNEDQQDELI RSIELALTSQ DIAEVTQTLL NLAEFMEHSD KGPLPLRDDN GI VLLGERA AKCRAYAKAL HYKELEFQKG PTPAILESLI SINNKLQQPE AAAGVLEYAM KHF GELEIQ ATWYEKLHEW EDALVAYDKK MDTNKDDPEL MLGRMRCLEA LGEWGQLHQQ CCEK WTLVN DETQAKMARM AAAAAWGLGQ WDSMEEYTCM IPRDTHDGAF YRAVLALHQD LFSLA QQCI DKARDLLDAE LTAMAGESYS RAYGAMVSCH MLSELEEVIQ YKLVPERREI IRQIWW ERL QGCQRIVEDW QKILMVRSLV VSPHEDMRTW LKYASLCGKS GRLALAHKTL VLLLGVD PS RQLDHPLPTV HPQVTYAYMK NMWKSARKID AFQHMQHFVQ TMQQQAQHAI ATEDQQHK Q ELHKLMARCF LKLGEWQLNL QGINESTIPK VLQYYSAATE HDRSWYKAWH AWAVMNFEA VLHYKHQNQA RDEKKKLRHA SGANITNATT AATTAATATT TASTEGSNSE SEAESTENSP TPSPLQKKV TEDLSKTLLM YTVPAVQGFF RSISLSRGNN LQDTLRVLTL WFDYGHWPDV N EALVEGVK AIQIDTWLQV IPQLIARIDT PRPLVGRLIH QLLTDIGRYH PQALIYPLTV AS KSTTTAR HNAANKILKN MCEHSNTLVQ QAMMVSEELI RVAILWHEMW HEGLEEASRL YFG ERNVKG MFEVLEPLHA MMERGPQTLK ETSFNQAYGR DLMEAQEWCR KYMKSGNVKD LTQA WDLYY HVFRRISKQL PQLTSLELQY VSPKLLMCRD LELAVPGTYD PNQPIIRIQS IAPSL QVIT SKQRPRKLTL MGSNGHEFVF LLKGHEDLRQ DERVMQLFGL VNTLLANDPT SLRKNL SIQ RYAVIPLSTN SGLIGWVPHC DTLHALIRDY REKKKILLNI EHRIMLRMAP DYDHLTL MQ KVEVFEHAVN NTAGDDLAKL LWLKSPSSEV WFDRRTNYTR SLAVMSMVGY ILGLGDRH P SNLMLDRLSG KILHIDFGDC FEVAMTREKF PEKIPFRLTR MLTNAMEVTG LDGNYRITC HTVMEVLREH KDSVMAVLEA FVYDPLLNWR LMDTNTKGNK RSRTRTDSYS AGQSVEILDG VELGEPAHK KTGTTVPESI HSFIGDGLVK PEALNKKAIQ IINRVRDKLT GRDFSHDDTL D VPTQVELL IKQATSHENL CQCYIGWCPF W |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.37 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8.5 |
グリッド | モデル: Quantifoil / 支持フィルム - #0 - Film type ID: 1 / 支持フィルム - #0 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #0 - トポロジー: HOLEY / 支持フィルム - #1 - Film type ID: 2 / 支持フィルム - #1 - 材質: CARBON / 支持フィルム - #1 - トポロジー: CONTINUOUS |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 70.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 8.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 7300 |
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初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |