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基本情報
| 登録情報 | ![]() | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| タイトル | NHEJ Long-range complex with PAXX | |||||||||
マップデータ | Apo | |||||||||
試料 |
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キーワード | Complex / Kinase / NHEJ / DNA BINDING PROTEIN / DNA BINDING PROTEIN-DNA complex | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報FHA domain binding / positive regulation of chromosome organization / DN2 thymocyte differentiation / positive regulation of ligase activity / DNA ligase IV complex / positive regulation of platelet formation / DNA ligase activity / DNA double-strand break attachment to nuclear envelope / Ku70:Ku80 complex / T cell receptor V(D)J recombination ...FHA domain binding / positive regulation of chromosome organization / DN2 thymocyte differentiation / positive regulation of ligase activity / DNA ligase IV complex / positive regulation of platelet formation / DNA ligase activity / DNA double-strand break attachment to nuclear envelope / Ku70:Ku80 complex / T cell receptor V(D)J recombination / DNA ligase (ATP) / negative regulation of t-circle formation / pro-B cell differentiation / DNA end binding / DNA-dependent protein kinase activity / small-subunit processome assembly / DNA ligase (ATP) activity / positive regulation of lymphocyte differentiation / histone H2AXS139 kinase activity / DNA-dependent protein kinase complex / DNA-dependent protein kinase-DNA ligase 4 complex / immunoglobulin V(D)J recombination / nonhomologous end joining complex / nucleotide-excision repair, DNA gap filling / single strand break repair / immature B cell differentiation / V(D)J recombination / regulation of smooth muscle cell proliferation / cellular response to X-ray / regulation of epithelial cell proliferation / double-strand break repair via classical nonhomologous end joining / double-strand break repair via alternative nonhomologous end joining / isotype switching / nuclear telomere cap complex / Cytosolic sensors of pathogen-associated DNA / protein localization to site of double-strand break / telomere capping / IRF3-mediated induction of type I IFN / regulation of hematopoietic stem cell differentiation / recombinational repair / regulation of telomere maintenance / protein localization to chromosome, telomeric region / U3 snoRNA binding / peptidyl-threonine phosphorylation / positive regulation of neurogenesis / maturation of 5.8S rRNA / T cell lineage commitment / cellular response to lithium ion / cellular hyperosmotic salinity response / DNA biosynthetic process / positive regulation of double-strand break repair via nonhomologous end joining / 2-LTR circle formation / B cell lineage commitment / negative regulation of cGAS/STING signaling pathway / hematopoietic stem cell proliferation / AMP binding / response to ionizing radiation / telomeric repeat DNA binding / ligase activity / negative regulation of protein phosphorylation / DNA 3'-5' helicase / T cell differentiation / somatic stem cell population maintenance / 5'-deoxyribose-5-phosphate lyase activity / chromosome organization / hematopoietic stem cell differentiation / response to X-ray / ectopic germ cell programmed cell death / ATP-dependent activity, acting on DNA / somitogenesis / telomere maintenance via telomerase / SUMOylation of DNA damage response and repair proteins / site of DNA damage / condensed chromosome / mitotic G1 DNA damage checkpoint signaling / DNA polymerase binding / activation of innate immune response / neurogenesis / positive regulation of erythrocyte differentiation / B cell differentiation / telomere maintenance / cyclin binding / stem cell proliferation / DNA-(apurinic or apyrimidinic site) lyase / protein modification process / DNA helicase activity / peptidyl-serine phosphorylation / central nervous system development / cellular response to leukemia inhibitory factor / cellular response to ionizing radiation / response to gamma radiation / positive regulation of translation / Nonhomologous End-Joining (NHEJ) / small-subunit processome / cellular response to gamma radiation / protein-DNA complex / regulation of circadian rhythm / brain development / base-excision repair / establishment of integrated proviral latency 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.39 Å | |||||||||
データ登録者 | Chen S / He Y | |||||||||
| 資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2023タイトル: Cryo-EM visualization of DNA-PKcs structural intermediates in NHEJ. 著者: Siyu Chen / Alex Vogt / Linda Lee / Tasmin Naila / Ryan McKeown / Alan E Tomkinson / Susan P Lees-Miller / Yuan He / ![]() 要旨: DNA double-strand breaks (DSBs), one of the most cytotoxic forms of DNA damage, can be repaired by the tightly regulated nonhomologous end joining (NHEJ) machinery (Stinson and Loparo and Zhao ). ...DNA double-strand breaks (DSBs), one of the most cytotoxic forms of DNA damage, can be repaired by the tightly regulated nonhomologous end joining (NHEJ) machinery (Stinson and Loparo and Zhao ). Core NHEJ factors form an initial long-range (LR) synaptic complex that transitions into a DNA-PKcs (DNA-dependent protein kinase, catalytic subunit)-free, short-range state to align the DSB ends (Chen ). Using single-particle cryo-electron microscopy, we have visualized three additional key NHEJ complexes representing different transition states, with DNA-PKcs adopting distinct dimeric conformations within each of them. Upon DNA-PKcs autophosphorylation, the LR complex undergoes a substantial conformational change, with both Ku and DNA-PKcs rotating outward to promote DNA break exposure and DNA-PKcs dissociation. We also captured a dimeric state of catalytically inactive DNA-PKcs, which resembles structures of other PIKK (Phosphatidylinositol 3-kinase-related kinase) family kinases, revealing a model of the full regulatory cycle of DNA-PKcs during NHEJ. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_28732.map.gz | 233.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-28732-v30.xml emd-28732.xml | 34.5 KB 34.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_28732_fsc.xml | 17 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_28732.png | 49.1 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-28732.cif.gz | 11.6 KB | ||
| その他 | emd_28732_half_map_1.map.gz emd_28732_half_map_2.map.gz | 336.1 MB 336.4 MB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28732 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-28732 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 8ezaMC ![]() 8ez9C ![]() 8ezbC C: 同じ文献を引用 ( M: このマップから作成された原子モデル |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_28732.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 421.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Apo | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.079 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: half1
| ファイル | emd_28732_half_map_1.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | half1 | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half2
| ファイル | emd_28732_half_map_2.map | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | half2 | ||||||||||||
| 投影像・断面図 |
| ||||||||||||
| 密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
+全体 : NHEJ Long-range complex with PAXX
+超分子 #1: NHEJ Long-range complex with PAXX
+分子 #1: Protein PAXX
+分子 #2: X-ray repair cross-complementing protein 6
+分子 #3: X-ray repair cross-complementing protein 5
+分子 #4: DNA-dependent protein kinase catalytic subunit
+分子 #5: PRKDC_HUMAN DNA-dependent protein kinase catalytic subunit -- Unk...
+分子 #8: Non-homologous end-joining factor 1
+分子 #9: DNA repair protein XRCC4
+分子 #10: DNA ligase 4
+分子 #6: DNA (31-MER)
+分子 #7: DNA (30-MER)
+分子 #11: ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
| 濃度 | 2 mg/mL |
|---|---|
| 緩衝液 | pH: 7.9 |
| グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: GRAPHENE OXIDE / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 10 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR |
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 302 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-
電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 温度 | 最低: 70.0 K / 最高: 70.0 K |
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / デジタル化 - サイズ - 横: 5760 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 11006 / 平均露光時間: 4.0 sec. / 平均電子線量: 65.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 2.0 µm / 倍率(補正後): 60000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 倍率(公称値): 60000 |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
| 精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT 当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient |
|---|---|
| 得られたモデル | ![]() PDB-8eza: |
ムービー
コントローラー
万見について




キーワード
Homo sapiens (ヒト)
データ登録者
米国, 2件
引用
























Z (Sec.)
Y (Row.)
X (Col.)





































unidentified baculovirus (ウイルス)
FIELD EMISSION GUN


