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万見
- PDB-8yee: Cryo-EM structure of in vitro reconstituted Light-harvesting comp... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8yee
タイトルCryo-EM structure of in vitro reconstituted Light-harvesting complex II trimer
要素Chlorophyll a-b binding protein, chloroplastic
キーワードPHOTOSYNTHESIS / Complex / light-harvesting / membrane protein
機能・相同性
機能・相同性情報


photosynthesis, light harvesting in photosystem I / photosystem I / photosystem II / chlorophyll binding / chloroplast thylakoid membrane / response to light stimulus / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
Chlorophyll A-B binding protein, plant and chromista / Chlorophyll A-B binding protein / Chlorophyll A-B binding protein
類似検索 - ドメイン・相同性
: / CHLOROPHYLL B / CHLOROPHYLL A / 1,2-DIPALMITOYL-PHOSPHATIDYL-GLYCEROLE / Chem-NEX / Chlorophyll a-b binding protein, chloroplastic
類似検索 - 構成要素
生物種Spinacia oleracea (ホウレンソウ)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.37 Å
データ登録者Seki, S. / Miyata, T. / Tanaka, H. / Namba, K. / Kurisu, G. / Fujii, R.
資金援助 日本, 5件
組織認可番号国
Japan Society for the Promotion of Science (JSPS)K23KJ1834 日本
Japan Agency for Medical Research and Development (AMED)JP23ama121003 日本
Japan Science and TechnologyJPMJFS2138 日本
Japan Science and TechnologyJPMJCR20E1 日本
Japan Society for the Promotion of Science (JSPS)23H04958 日本
引用ジャーナル: PNAS Nexus / 年: 2024
タイトル: Structure-based validation of recombinant light-harvesting complex II.
著者: Soichiro Seki / Tomoko Miyata / Naoko Norioka / Hideaki Tanaka / Genji Kurisu / Keiichi Namba / Ritsuko Fujii /
要旨: Light-harvesting complex II (LHCII) captures sunlight and dissipates excess energy to drive photosynthesis. To elucidate this mechanism, the individual optical properties of pigments in the LHCII ...Light-harvesting complex II (LHCII) captures sunlight and dissipates excess energy to drive photosynthesis. To elucidate this mechanism, the individual optical properties of pigments in the LHCII protein must be identified. In vitro reconstitution with apoproteins synthesized by and pigment-lipid mixtures from natural sources is an effective approach; however, the local environment surrounding each pigment within reconstituted LHCII (rLHCII) has only been indirectly estimated using spectroscopic and biochemical methods. Here, we used cryo-electron microscopy to determine the 3D structure of the rLHCII trimer and found that rLHCII exhibited a structure that was virtually identical to that of native LHCII, with a few exceptions: some C-terminal amino acids were not visible, likely due to aggregation of the His-tags; a carotenoid at the V1 site was not visible; and at site 614 showed mixed occupancy by both chlorophyll and molecules. Our observations confirmed the applicability of the in vitro reconstitution technique.
履歴
登録2024年2月22日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBJ
改定 1.02024年11月20日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年12月11日Group: Data collection / Derived calculations / Structure summary
カテゴリ: chem_comp / em_admin ...chem_comp / em_admin / entity / pdbx_entity_nonpoly / pdbx_struct_conn_angle / struct_conn
Item: _chem_comp.name / _chem_comp.pdbx_synonyms ..._chem_comp.name / _chem_comp.pdbx_synonyms / _em_admin.last_update / _entity.pdbx_description / _pdbx_entity_nonpoly.name

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Chlorophyll a-b binding protein, chloroplastic
B: Chlorophyll a-b binding protein, chloroplastic
C: Chlorophyll a-b binding protein, chloroplastic
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)118,53057
ポリマ－73,3673
非ポリマー45,16354
水2,270126
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

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タンパク質 , 1種, 3分子 ABC

#1: タンパク質 Chlorophyll a-b binding protein, chloroplastic / Light-harvesting complex II / LHCII type I CAB / LHCP


分子量: 24455.611 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Spinacia oleracea (ホウレンソウ)
発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P12333

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非ポリマー , 6種, 180分子

#2: 化合物
ChemComp-CHL / CHLOROPHYLL B


分子量: 907.472 Da / 分子数: 18 / 由来タイプ: 合成 / 式: C55H70MgN4O6 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#3: 化合物...
ChemComp-CLA / CHLOROPHYLL A


分子量: 893.489 Da / 分子数: 24 / 由来タイプ: 合成 / 式: C55H72MgN4O5 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#4: 化合物
ChemComp-A1LXP / Lutein / (3R,3'R,6'R)-beta,epsilon-Carotene-3,3'-diol / (1~{R})-3,5,5-trimethyl-4-[(1~{E},3~{E},5~{E},7~{E},9~{E},11~{E},13~{E},15~{E},17~{E})-3,7,12,16-tetramethyl-18-[(1~{R},4~{R})-2,6,6-trimethyl-4-oxidanyl-cyclohex-2-en-1-yl]octadeca-1,3,5,7,9,11,13,15,17-nonaenyl]cyclohex-3-en-1-ol


分子量: 568.871 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 合成 / 式: C40H56O2 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#5: 化合物 ChemComp-NEX / (1R,3R)-6-{(3E,5E,7E,9E,11E,13E,15E,17E)-18-[(1S,4R,6R)-4-HYDROXY-2,2,6-TRIMETHYL-7-OXABICYCLO[4.1.0]HEPT-1-YL]-3,7,12,16-TETRAMETHYLOCTADECA-1,3,5,7,9,11,13,15,17-NONAENYLIDENE}-1,5,5-TRIMETHYLCYCLOHEXANE-1,3-DIOL / (3S,5R,6R,3'S,5'R,6'S)-5',6'-EPOXY-6,7-DIDEHYDRO- 5,6,5',6'-TETRAHYDRO-BETA,BETA-CAROTENE-3,5,3'-TRIOL / 9'-CIS-NEOXANTHIN


分子量: 600.870 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 合成 / 式: C40H56O4
#6: 化合物 ChemComp-LHG / 1,2-DIPALMITOYL-PHOSPHATIDYL-GLYCEROLE / ジパルミトイルホスファチジルグリセロ-ル


分子量: 722.970 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 合成 / 式: C38H75O10P / コメント: リン脂質*YM
#7: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 126 / 由来タイプ: 天然 / 式: H2O

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかY
Has protein modificationN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: In vitro reconstituted Light-harvesting complex II / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT
分子量値: 0.12 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Spinacia oleracea (ホウレンソウ)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
緩衝液pH: 7.5 / 詳細: 0.03 % n-Dodexyl-alpha-D-maltoside
緩衝液成分濃度: 25 mM / 名称: HEPES / 式: C8H18N2O4S
試料濃度: 5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K

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電子顕微鏡撮影

顕微鏡モデル: JEOL CRYO ARM 300
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 倍率（公称値）: 60000 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 2200 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 700 nm / Cs: 2.7 mm
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN / 試料ホルダーモデル: JEOL CRYOSPECPORTER
撮影平均露光時間: 3 sec. / 電子線照射量: 80 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 6145
電子光学装置エネルギーフィルター名称: In-column Omega Filter
エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV

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解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
1cryoSPARC4.2.1粒子像選択
2SerialEM4.1.0beta画像取得
4cryoSPARC4.2.1CTF補正
7UCSF Chimera1.17.1モデルフィッティング
9Coot0.9.4.1モデル精密化
10PHENIX1.19.2モデル精密化
11cryoSPARC4.2.1初期オイラー角割当
12cryoSPARC4.2.1最終オイラー角割当
14cryoSPARC4.2.1３次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 4734387
対称性点対称性: C3 (3回回転対称)
3次元再構成解像度: 2.37 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 179318 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築空間: REAL
原子モデル構築PDB-ID: 1RWT

1rwt


PDB chain-ID: B / Accession code: 1RWT / Chain residue range: 14-229 / Pdb chain residue range: 14-229 / Source name: PDB / タイプ: experimental model
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.0098142
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d1.00911709
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d7.9293237
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.048933
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0062778

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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