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万見
- PDB-8tjo: Crosslinked 6-deoxyerythronolide B synthase (DEBS) Module 1 in co... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8tjo
タイトルCrosslinked 6-deoxyerythronolide B synthase (DEBS) Module 1 in complex with antibody fragment 1B2: Crosslinked Intra-State 1
要素
  • Antibody Fragment 1B2, Heavy Chain
  • Antibody Fragment 1B2, Light Chain
  • EryAI,6-deoxyerythronolide-B synthase EryA3, modules 5 and 6
キーワードBIOSYNTHETIC PROTEIN/IMMUNE SYSTEM / polyketide synthase / antibody / BIOSYNTHETIC PROTEIN-IMMUNE SYSTEM complex
生物種Saccharopolyspora erythraea (バクテリア)
Homo sapiens (ヒト)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.61 Å
データ登録者Cogan, D.P. / Soohoo, A.M. / Chen, M. / Brodsky, K.L. / Liu, Y. / Khosla, C.
資金援助 米国, 4件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM141799 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM136039 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM129541 米国
National Science Foundation (NSF, United States)DGE-1656518 米国
引用ジャーナル: Nat Chem Biol / 年: 2024
タイトル: Structural basis for intermodular communication in assembly-line polyketide biosynthesis.
著者: Dillon P Cogan / Alexander M Soohoo / Muyuan Chen / Yan Liu / Krystal L Brodsky / Chaitan Khosla /
要旨: Assembly-line polyketide synthases (PKSs) are modular multi-enzyme systems with considerable potential for genetic reprogramming. Understanding how they selectively transport biosynthetic ...Assembly-line polyketide synthases (PKSs) are modular multi-enzyme systems with considerable potential for genetic reprogramming. Understanding how they selectively transport biosynthetic intermediates along a defined sequence of active sites could be harnessed to rationally alter PKS product structures. To investigate functional interactions between PKS catalytic and substrate acyl carrier protein (ACP) domains, we employed a bifunctional reagent to crosslink transient domain-domain interfaces of a prototypical assembly line, the 6-deoxyerythronolide B synthase, and resolved their structures by single-particle cryogenic electron microscopy (cryo-EM). Together with statistical per-particle image analysis of cryo-EM data, we uncovered interactions between ketosynthase (KS) and ACP domains that discriminate between intra-modular and inter-modular communication while reinforcing the relevance of conformational asymmetry during the catalytic cycle. Our findings provide a foundation for the structure-based design of hybrid PKSs comprising biosynthetic modules from different naturally occurring assembly lines.
履歴
登録2023年7月23日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02024年7月24日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年9月4日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation / citation_author / em_admin
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year / _citation_author.identifier_ORCID / _em_admin.last_update

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

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集合体

登録構造単位
A: EryAI,6-deoxyerythronolide-B synthase EryA3, modules 5 and 6
B: EryAI,6-deoxyerythronolide-B synthase EryA3, modules 5 and 6
C: Antibody Fragment 1B2, Heavy Chain
D: Antibody Fragment 1B2, Light Chain
E: Antibody Fragment 1B2, Heavy Chain
F: Antibody Fragment 1B2, Light Chain


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)482,1096
ポリマ－482,1096
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質 EryAI,6-deoxyerythronolide-B synthase EryA3, modules 5 and 6


分子量: 188891.219 Da / 分子数: 2
断片: DEBS Module 1, Subunit A (UNP residues 557-2015) + EryA3 (UNP residues 2896-3172),DEBS Module 1, Subunit A (UNP residues 557-2015) + EryA3 (UNP residues 2896-3172),DEBS Module 1, Subunit A ...断片: DEBS Module 1, Subunit A (UNP residues 557-2015) + EryA3 (UNP residues 2896-3172),DEBS Module 1, Subunit A (UNP residues 557-2015) + EryA3 (UNP residues 2896-3172),DEBS Module 1, Subunit A (UNP residues 557-2015) + EryA3 (UNP residues 2896-3172),DEBS Module 1, Subunit A (UNP residues 557-2015) + EryA3 (UNP residues 2896-3172),DEBS Module 1, Subunit A (UNP residues 557-2015) + EryA3 (UNP residues 2896-3172),DEBS Module 1, Subunit A (UNP residues 557-2015) + EryA3 (UNP residues 2896-3172),DEBS Module 1, Subunit A (UNP residues 557-2015) + EryA3 (UNP residues 2896-3172),DEBS Module 1, Subunit A (UNP residues 557-2015) + EryA3 (UNP residues 2896-3172)
由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharopolyspora erythraea (バクテリア)
遺伝子: eryAI, eryA / プラスミド: pDC1 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 株 (発現宿主): BAP1 / 参照: 6-deoxyerythronolide-B synthase
#2: 抗体 Antibody Fragment 1B2, Heavy Chain


分子量: 26447.611 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
#3: 抗体 Antibody Fragment 1B2, Light Chain


分子量: 25715.832 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Crosslinked DEBS Module 1 in complex with Antibody Fragment 1B2
タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: MULTIPLE SOURCES
分子量値: 0.48 MDa / 実験値: YES
由来(天然)生物種: Saccharopolyspora erythraea (バクテリア)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 株: BAP1 / プラスミド: pDC1
緩衝液pH: 7.2
緩衝液成分
ID濃度名称式Buffer-ID
1100 mMcitric acidC6H8O71
2100 mMsodium chlorideNaCl1
310 mMHEPESC8H18N2O4S1
試料濃度: 8 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 倍率（公称値）: 81000 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 2500 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1000 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 150 µm
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影平均露光時間: 3.76 sec. / 電子線照射量: 50 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 9523

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解析

EMソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.21.1_5286 / カテゴリ: モデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 434136
対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度: 3.61 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 92037 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL
原子モデル構築PDB-ID: 7M7F

7m7f


Accession code: 7M7F / Source name: PDB / タイプ: experimental model

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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