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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8s5n | ||||||
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タイトル | RNA polymerase II core initially transcribing complex with an ordered RNA of 12 nt | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / RNA polymerase II / promoter escape / de novo transcription | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 positive regulation of core promoter binding / RNA polymerase II core complex assembly / meiotic sister chromatid cohesion / RNA polymerase transcription factor SL1 complex / transcription factor TFIIE complex / phosphatase activator activity / RNA polymerase III general transcription initiation factor activity / transcription open complex formation at RNA polymerase II promoter / RNA polymerase I core promoter sequence-specific DNA binding / TFIIF-class transcription factor complex binding ...positive regulation of core promoter binding / RNA polymerase II core complex assembly / meiotic sister chromatid cohesion / RNA polymerase transcription factor SL1 complex / transcription factor TFIIE complex / phosphatase activator activity / RNA polymerase III general transcription initiation factor activity / transcription open complex formation at RNA polymerase II promoter / RNA polymerase I core promoter sequence-specific DNA binding / TFIIF-class transcription factor complex binding / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 1 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / transcriptional start site selection at RNA polymerase II promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 3 Promoter / Formation of RNA Pol II elongation complex / Formation of the Early Elongation Complex / Transcriptional regulation by small RNAs / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / FGFR2 alternative splicing / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / mRNA Capping / mRNA Splicing - Minor Pathway / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Elongation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Estrogen-dependent gene expression / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / mRNA Splicing - Major Pathway / transcription factor TFIIF complex / RNA Polymerase III Abortive And Retractive Initiation / transcription factor TFIIA complex / female germ cell nucleus / male pronucleus / female pronucleus / Abortive elongation of HIV-1 transcript in the absence of Tat / RNA polymerase II general transcription initiation factor binding / germinal vesicle / RNA Polymerase I Transcription Termination / transcription preinitiation complex / FGFR2 alternative splicing / nuclear thyroid hormone receptor binding / Signaling by FGFR2 IIIa TM / Viral Messenger RNA Synthesis / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE during HIV infection / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / transcription factor TFIID complex / Formation of the Early Elongation Complex / Formation of the HIV-1 Early Elongation Complex / RNA polymerase II general transcription initiation factor activity / cell division site / mRNA Capping / protein acetylation / HIV Transcription Initiation / RNA Polymerase II HIV Promoter Escape / Transcription of the HIV genome / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA polymerase III activity / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / mRNA Splicing - Minor Pathway / RNA polymerase II complex binding / acetyltransferase activity / RNA Polymerase I Transcription Initiation / viral transcription / Pausing and recovery of Tat-mediated HIV elongation / Tat-mediated HIV elongation arrest and recovery / aryl hydrocarbon receptor binding / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / HIV elongation arrest and recovery / Pausing and recovery of HIV elongation / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / TFIIB-class transcription factor binding / transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / RNA polymerase II activity / Tat-mediated elongation of the HIV-1 transcript / transcription elongation by RNA polymerase I / positive regulation of transcription initiation by RNA polymerase II / Formation of HIV-1 elongation complex containing HIV-1 Tat / transcription-coupled nucleotide-excision repair / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase II core promoter sequence-specific DNA binding / spindle assembly / RNA polymerase I activity / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / positive regulation of translational initiation / Formation of HIV elongation complex in the absence of HIV Tat / RNA polymerase II, core complex / RNA Polymerase II Transcription Elongation / core promoter sequence-specific DNA binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) Sus scrofa (ブタ) unidentified adenovirus (ウイルス) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | ||||||
データ登録者 | Zhan, Y. / Grabbe, F. / Oberbeckmann, E. / Dienemann, C. / Cramer, P. | ||||||
資金援助 | ドイツ, 1件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2024 タイトル: Three-step mechanism of promoter escape by RNA polymerase II. 著者: Yumeng Zhan / Frauke Grabbe / Elisa Oberbeckmann / Christian Dienemann / Patrick Cramer / 要旨: The transition from transcription initiation to elongation is highly regulated in human cells but remains incompletely understood at the structural level. In particular, it is unclear how ...The transition from transcription initiation to elongation is highly regulated in human cells but remains incompletely understood at the structural level. In particular, it is unclear how interactions between RNA polymerase II (RNA Pol II) and initiation factors are broken to enable promoter escape. Here, we reconstitute RNA Pol II promoter escape in vitro and determine high-resolution structures of initially transcribing complexes containing 8-, 10-, and 12-nt ordered RNAs and two elongation complexes containing 14-nt RNAs. We suggest that promoter escape occurs in three major steps. First, the growing RNA displaces the B-reader element of the initiation factor TFIIB without evicting TFIIB. Second, the rewinding of the transcription bubble coincides with the eviction of TFIIA, TFIIB, and TBP. Third, the binding of DSIF and NELF facilitates TFIIE and TFIIH dissociation, establishing the paused elongation complex. This three-step model for promoter escape fills a gap in our understanding of the initiation-elongation transition of RNA Pol II transcription. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
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PDBx/mmCIF形式 | 8s5n.cif.gz | 1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8s5n.ent.gz | 817.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8s5n.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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-検証レポート
文書・要旨 | 8s5n_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8s5n_full_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8s5n_validation.xml.gz | 136.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8s5n_validation.cif.gz | 216 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/s5/8s5n ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/s5/8s5n | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 19743MC 8s51C 8s52C 8s54C 8s55C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA-directed RNA polymerase ... , 7種, 7分子 ABCEGIK
#1: タンパク質 | 分子量: 218889.547 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A7M4DUC2 |
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#2: タンパク質 | 分子量: 147938.594 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LGP4, DNA-directed RNA polymerase |
#3: タンパク質 | 分子量: 31439.074 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LCH3 |
#5: タンパク質 | 分子量: 24644.318 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LSI7 |
#7: タンパク質 | 分子量: 19314.283 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1VKG7 |
#9: タンパク質 | 分子量: 14541.221 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: P60899 |
#11: タンパク質 | 分子量: 13310.284 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: F1RKE4 |
-RNA polymerase II subunit ... , 2種, 2分子 DL
#4: タンパク質 | 分子量: 20962.621 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A287ADR4 |
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#12: タンパク質 | 分子量: 7018.244 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A8D0JYF1 |
-DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit ... , 3種, 3分子 FHJ
#6: タンパク質 | 分子量: 14477.001 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A8D1KNW4 |
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#8: タンパク質 | 分子量: 17162.273 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LCB2 |
#10: タンパク質 | 分子量: 7655.123 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1VYD0 |
-Transcription initiation factor ... , 4種, 4分子 MUVX
#13: タンパク質 | 分子量: 34877.949 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2B, TF2B, TFIIB / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q00403, histone acetyltransferase |
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#20: タンパク質 | 分子量: 41544.551 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2A1, TF2A1 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: P52655 |
#21: タンパク質 | 分子量: 12469.091 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2A2, TF2A2 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: P52657 |
#23: タンパク質 | 分子量: 33106.824 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2E2, TF2E2 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P29084 |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 NT
#14: DNA鎖 | 分子量: 43236.555 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) unidentified adenovirus (ウイルス) |
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#19: DNA鎖 | 分子量: 42569.098 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) unidentified adenovirus (ウイルス) |
-タンパク質 , 2種, 2分子 OW
#15: タンパク質 | 分子量: 37729.938 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: TBP, GTF2D1, TF2D, TFIID / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P20226 |
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#22: タンパク質 | 分子量: 49516.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2E1, TF2E1 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P29083 |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 P
#16: RNA鎖 | 分子量: 3769.344 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) unidentified adenovirus (ウイルス) |
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-General transcription factor IIF subunit ... , 2種, 2分子 QR
#17: タンパク質 | 分子量: 58343.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2F1, RAP74 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P35269 |
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#18: タンパク質 | 分子量: 28427.309 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: GTF2F2, RAP30 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P13984, DNA helicase |
-非ポリマー , 2種, 11分子
#24: 化合物 | ChemComp-ZN / #25: 化合物 | ChemComp-MG / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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由来(天然) |
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緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1700 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 700 nm |
撮影 | 電子線照射量: 40 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
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3次元再構成 | 解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 18827 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 142.72 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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