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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8av2 | ||||||
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タイトル | Crystal structure for the FnIII module of mouse LEP-R in complex with the anti-LEP-R nanobody VHH-4.80 | ||||||
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![]() | CYTOKINE / leptin / LEP-R / obesity / metabolism / energy balance | ||||||
機能・相同性 | ![]() leptin receptor activity / regulation of transport / bone growth / leptin-mediated signaling pathway / regulation of bone remodeling / response to leptin / sexual reproduction / regulation of feeding behavior / regulation of metabolic process / glycogen metabolic process ...leptin receptor activity / regulation of transport / bone growth / leptin-mediated signaling pathway / regulation of bone remodeling / response to leptin / sexual reproduction / regulation of feeding behavior / regulation of metabolic process / glycogen metabolic process / T cell differentiation / negative regulation of gluconeogenesis / phagocytosis / glial cell proliferation / energy homeostasis / negative regulation of autophagy / cholesterol metabolic process / gluconeogenesis / transmembrane signaling receptor activity / glucose homeostasis / positive regulation of cold-induced thermogenesis / basolateral plasma membrane / angiogenesis / receptor complex / signal transduction / extracellular region / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() | ||||||
手法 | ![]() ![]() ![]() | ||||||
![]() | Verstraete, K. / Savvides, S.N. / Verschueren, K.G. / Tsirigotaki, A. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Mechanism of receptor assembly via the pleiotropic adipokine Leptin. 著者: Alexandra Tsirigotaki / Ann Dansercoer / Koen H G Verschueren / Iva Marković / Christoph Pollmann / Maximillian Hafer / Jan Felix / Catherine Birck / Wouter Van Putte / Dominiek Catteeuw / ...著者: Alexandra Tsirigotaki / Ann Dansercoer / Koen H G Verschueren / Iva Marković / Christoph Pollmann / Maximillian Hafer / Jan Felix / Catherine Birck / Wouter Van Putte / Dominiek Catteeuw / Jan Tavernier / J Fernando Bazan / Jacob Piehler / Savvas N Savvides / Kenneth Verstraete / ![]() ![]() ![]() ![]() 要旨: The adipokine Leptin activates its receptor LEP-R in the hypothalamus to regulate body weight and exerts additional pleiotropic functions in immunity, fertility and cancer. However, the structure and ...The adipokine Leptin activates its receptor LEP-R in the hypothalamus to regulate body weight and exerts additional pleiotropic functions in immunity, fertility and cancer. However, the structure and mechanism of Leptin-mediated LEP-R assemblies has remained unclear. Intriguingly, the signaling-competent isoform of LEP-R is only lowly abundant amid several inactive short LEP-R isoforms contributing to a mechanistic conundrum. Here we show by X-ray crystallography and cryo-EM that, in contrast to long-standing paradigms, Leptin induces type I cytokine receptor assemblies featuring 3:3 stoichiometry and demonstrate such Leptin-induced trimerization of LEP-R on living cells via single-molecule microscopy. In mediating these assemblies, Leptin undergoes drastic restructuring that activates its site III for binding to the Ig domain of an adjacent LEP-R. These interactions are abolished by mutations linked to obesity. Collectively, our study provides the structural and mechanistic framework for how evolutionarily conserved Leptin:LEP-R assemblies with 3:3 stoichiometry can engage distinct LEP-R isoforms to achieve signaling. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 295.8 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 240.4 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 7z3pC ![]() 7z3qC ![]() 7z3rC ![]() 8avbC ![]() 8avcC ![]() 8avdC ![]() 8aveC ![]() 8avfC ![]() 8avoC ![]() 8b7qC ![]() 1ohqS C: 同じ文献を引用 ( S: 精密化の開始モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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単位格子 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 22779.152 Da / 分子数: 2 / 変異: N668Q, N698Q, N726Q / 由来タイプ: 組換発現 詳細: This sequence corresponds to the membrane proximal FnIII module of the mouse leptin receptor (mLEP-R, residues 633 to 827). To facilitate crystallization, three Asn residues were mutated ...詳細: This sequence corresponds to the membrane proximal FnIII module of the mouse leptin receptor (mLEP-R, residues 633 to 827). To facilitate crystallization, three Asn residues were mutated (N668Q, N698Q, N726Q). This FnIII module was co-expressed and co-purified with a His-tagged anti-mLEP-R nanobody (VHH 4.11). Prior to crystallisation experiments, the protein complex was deglycosylated with EndoH. Cys751 of mLEP-R was found to be oxidized and modelled as hydroxycysteine residue (CSO). 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() #2: 抗体 | 分子量: 15583.163 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: ETGQVQLQESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTLDDYGIAWFRQAPGKEREGVSCISTSDDSTYYADSVKGRFTISRDTAKNTVYLQMNSLKPEDTAVYYCAAERAPMCYSRSYYLVDYGMDYWGKGTQVTVSSGTKHHHHHH 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() #3: 糖 | ChemComp-NAG / #4: 化合物 | ChemComp-SO4 / #5: 水 | ChemComp-HOH / | 研究の焦点であるリガンドがあるか | N | Has protein modification | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: ![]() |
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試料調製
結晶 | マシュー密度: 2.15 Å3/Da / 溶媒含有率: 42.89 % |
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結晶化 | 温度: 293 K / 手法: 蒸気拡散法, シッティングドロップ法 / pH: 5.6 詳細: 0.2 M ammonium sulphate 0.1 M Na cacodylate pH 5.6 30% PEG Smear Medium Temp details: Temperature-controlled cabinet |
-データ収集
回折 | 平均測定温度: 100 K / Ambient temp details: Cryostream 800 series / Serial crystal experiment: N |
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放射光源 | 由来: ![]() ![]() ![]() |
検出器 | タイプ: DECTRIS EIGER X 16M / 検出器: PIXEL / 日付: 2022年5月12日 / 詳細: adaptive KB-mirrors |
放射 | モノクロメーター: Si(111) or Si(311); both crystals LN2 cooled プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
放射波長 | 波長: 0.972418 Å / 相対比: 1 |
反射 | 解像度: 1.75→90 Å / Num. obs: 67680 / % possible obs: 100 % / Observed criterion σ(I): -3 / 冗長度: 11.9 % / Biso Wilson estimate: 32.147 Å2 / CC1/2: 0.998 / Rrim(I) all: 0.164 / Net I/av σ(I): 10.48 / Net I/σ(I): 10.48 |
反射 シェル | 解像度: 1.75→1.86 Å / 冗長度: 11.5 % / Mean I/σ(I) obs: 0.86 / Num. unique obs: 10778 / CC1/2: 0.326 / Rrim(I) all: 2.066 / % possible all: 99.9 |
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解析
ソフトウェア |
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精密化 | 構造決定の手法: ![]() 開始モデル: 1OHQ, AF-P48356-F1-model_v1 解像度: 1.75→25.42 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.961 / Cor.coef. Fo:Fc free: 0.943 / SU R Cruickshank DPI: 0.123 / 交差検証法: THROUGHOUT / SU R Blow DPI: 0.131 / SU Rfree Blow DPI: 0.124 / SU Rfree Cruickshank DPI: 0.12
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原子変位パラメータ | Biso mean: 38.46 Å2
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Refine analyze | Luzzati coordinate error obs: 0.24 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 解像度: 1.75→25.42 Å
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拘束条件 |
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LS精密化 シェル | 解像度: 1.75→1.76 Å
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精密化 TLS | Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION
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精密化 TLSグループ |
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