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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7oky | |||||||||||||||
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タイトル | Structure of active transcription elongation complex Pol II-DSIF-ELL2-EAF1(composite structure) | |||||||||||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / Pol II / Super elongation complex / ELL2 / EAF1 | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 super elongation complex / negative regulation of DNA-templated transcription, elongation / : / DSIF complex / snRNA transcription by RNA polymerase II / regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / RNA Polymerase I Transcription Initiation / RNA Polymerase I Promoter Escape / RNA Polymerase I Transcription Termination ...super elongation complex / negative regulation of DNA-templated transcription, elongation / : / DSIF complex / snRNA transcription by RNA polymerase II / regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / RNA Polymerase I Transcription Initiation / RNA Polymerase I Promoter Escape / RNA Polymerase I Transcription Termination / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 1 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 3 Promoter / Formation of RNA Pol II elongation complex / Formation of the Early Elongation Complex / Transcriptional regulation by small RNAs / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / FGFR2 alternative splicing / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / mRNA Capping / mRNA Splicing - Minor Pathway / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Elongation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Estrogen-dependent gene expression / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / mRNA Splicing - Major Pathway / transcription elongation factor activity / positive regulation of DNA-templated transcription, elongation / Abortive elongation of HIV-1 transcript in the absence of Tat / transcription elongation-coupled chromatin remodeling / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE during HIV infection / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / intercellular bridge / Formation of the Early Elongation Complex / Formation of the HIV-1 Early Elongation Complex / mRNA Capping / organelle membrane / RNA polymerase III activity / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / RNA polymerase II complex binding / negative regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / Pausing and recovery of Tat-mediated HIV elongation / Tat-mediated HIV elongation arrest and recovery / positive regulation of macroautophagy / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / HIV elongation arrest and recovery / Pausing and recovery of HIV elongation / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / RNA polymerase II activity / Tat-mediated elongation of the HIV-1 transcript / transcription elongation by RNA polymerase I / Formation of HIV-1 elongation complex containing HIV-1 Tat / transcription-coupled nucleotide-excision repair / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase I activity / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / positive regulation of translational initiation / Formation of HIV elongation complex in the absence of HIV Tat / cis-regulatory region sequence-specific DNA binding / RNA polymerase II, core complex / RNA Polymerase II Transcription Elongation / Cajal body / Formation of RNA Pol II elongation complex / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / translation initiation factor binding / positive regulation of RNA splicing / transcription elongation factor complex / promoter-specific chromatin binding / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / positive regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / transcription elongation by RNA polymerase II / P-body / ribonucleoside binding / fibrillar center / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / single-stranded DNA binding / chromosome / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素; 5'-リン酸モノエステル産生エキソリボヌクレアーゼ / transcription by RNA polymerase II / nucleic acid binding / chromosome, telomeric region / single-stranded RNA binding / nuclear body / protein dimerization activity / hydrolase activity / nuclear speck / protein heterodimerization activity / RNA-directed RNA polymerase / intracellular membrane-bounded organelle 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) HIV whole-genome vector AA1305#18 (その他) Sus scrofa (ブタ) | |||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.14 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Chen, Y. / Vos, S.M. / Dienemann, C. / Ninov, M. / Urlaub, H. / Cramer, P. | |||||||||||||||
資金援助 | ドイツ, 4件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2021 タイトル: Allosteric transcription stimulation by RNA polymerase II super elongation complex. 著者: Ying Chen / Seychelle M Vos / Christian Dienemann / Momchil Ninov / Henning Urlaub / Patrick Cramer / 要旨: The super elongation complex (SEC) contains the positive transcription elongation factor b (P-TEFb) and the subcomplex ELL2-EAF1, which stimulates RNA polymerase II (RNA Pol II) elongation. Here, we ...The super elongation complex (SEC) contains the positive transcription elongation factor b (P-TEFb) and the subcomplex ELL2-EAF1, which stimulates RNA polymerase II (RNA Pol II) elongation. Here, we report the cryoelectron microscopy (cryo-EM) structure of ELL2-EAF1 bound to a RNA Pol II elongation complex at 2.8 Å resolution. The ELL2-EAF1 dimerization module directly binds the RNA Pol II lobe domain, explaining how SEC delivers P-TEFb to RNA Pol II. The same site on the lobe also binds the initiation factor TFIIF, consistent with SEC binding only after the transition from transcription initiation to elongation. Structure-guided functional analysis shows that the stimulation of RNA elongation requires the dimerization module and the ELL2 linker that tethers the module to the RNA Pol II protrusion. Our results show that SEC stimulates elongation allosterically and indicate that this stimulation involves stabilization of a closed conformation of the RNA Pol II active center cleft. | |||||||||||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
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PDBx/mmCIF形式 | 7oky.cif.gz | 911.1 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7oky.ent.gz | 702.6 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7oky.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7oky_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7oky_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7oky_validation.xml.gz | 112.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7oky_validation.cif.gz | 178.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ok/7oky ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ok/7oky | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-DNA-directed RNA polymerase II subunit ... , 6種, 6分子 ACEFGI
#1: タンパク質 | 分子量: 217450.078 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: P11414, DNA-directed RNA polymerase |
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#3: タンパク質 | 分子量: 31439.074 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LCH3 |
#5: タンパク質 | 分子量: 24644.318 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LSI7 |
#6: タンパク質 | 分子量: 14477.001 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: F1SKN8 |
#7: タンパク質 | 分子量: 19314.283 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LJZ9 |
#9: タンパク質 | 分子量: 14541.221 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: P60899 |
-タンパク質 , 4種, 4分子 BKMO
#2: タンパク質 | 分子量: 142426.125 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LGP4, DNA-directed RNA polymerase |
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#11: タンパク質 | 分子量: 13310.284 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1UK25 |
#13: タンパク質 | 分子量: 72435.391 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ELL2 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: O00472 |
#15: タンパク質 | 分子量: 29075.945 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: EAF1 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q96JC9 |
-RNA polymerase II subunit ... , 2種, 2分子 DL
#4: タンパク質 | 分子量: 20962.621 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A287ADR4 |
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#12: タンパク質 | 分子量: 7018.244 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LN51 |
-DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit ... , 2種, 2分子 HJ
#8: タンパク質 | 分子量: 17162.273 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1ULF2 |
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#10: タンパク質 | 分子量: 7655.123 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1VYD0 |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 NT
#14: DNA鎖 | 分子量: 14672.441 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) HIV whole-genome vector AA1305#18 (その他) 発現宿主: HIV whole-genome vector AA1305#18 (その他) |
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#17: DNA鎖 | 分子量: 14934.580 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) HIV whole-genome vector AA1305#18 (その他) 発現宿主: synthetic construct |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 P
#16: RNA鎖 | 分子量: 15076.017 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: The nucleotide A47 in the structure was not in the original RNA scaffold (46-mer) and was extended by Pol II during complex formation in the presence of ATP. 由来: (組換発現) HIV whole-genome vector AA1305#18 (その他) 発現宿主: synthetic construct |
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-Transcription elongation factor ... , 2種, 2分子 ZY
#18: タンパク質 | 分子量: 121145.477 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: SUPT5H, SPT5, SPT5H / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: O00267 |
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#19: タンパク質 | 分子量: 13210.201 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: SUPT4H1, SPT4H, SUPT4H / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P63272 |
-非ポリマー , 2種, 10分子
#20: 化合物 | ChemComp-MG / |
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#21: 化合物 | ChemComp-ZN / |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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分子量 | 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.4 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 43.21 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: dev_3942: / 分類: 精密化 |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
3次元再構成 | 解像度: 4.14 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 31910 詳細: This is a composite map of map 9 and 10. The particle number reported is the sum of particles from both reconstructions. 対称性のタイプ: POINT |
原子モデル構築 | 空間: REAL |