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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7k11 | ||||||
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タイトル | CryoEM structure of inactivated-form FATKIN domain of DNA-PK | ||||||
要素 | DNA-dependent protein kinase catalytic subunit | ||||||
キーワード | DNA BINDING PROTEIN/DNA / NHEJ / PIKK kinase / V(D)J recombination / DNA BINDING PROTEIN / DNA BINDING PROTEIN-DNA complex | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 MHC class II antigen presentation / Neutrophil degranulation / entry into host cell by a symbiont-containing vacuole / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; アスパラギン酸プロテアーゼ / protein autoprocessing / transport vesicle / protein processing / aspartic-type endopeptidase activity / proteolysis 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.21 Å | ||||||
データ登録者 | Chen, X. / Gellert, M. / Yang, W. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2021 タイトル: Structure of an activated DNA-PK and its implications for NHEJ. 著者: Xuemin Chen / Xiang Xu / Yun Chen / Joyce C Cheung / Huaibin Wang / Jiansen Jiang / Natalia de Val / Tara Fox / Martin Gellert / Wei Yang / 要旨: DNA-dependent protein kinase (DNA-PK), like all phosphatidylinositol 3-kinase-related kinases (PIKKs), is composed of conserved FAT and kinase domains (FATKINs) along with solenoid structures made of ...DNA-dependent protein kinase (DNA-PK), like all phosphatidylinositol 3-kinase-related kinases (PIKKs), is composed of conserved FAT and kinase domains (FATKINs) along with solenoid structures made of HEAT repeats. These kinases are activated in response to cellular stress signals, but the mechanisms governing activation and regulation remain unresolved. For DNA-PK, all existing structures represent inactive states with resolution limited to 4.3 Å at best. Here, we report the cryoelectron microscopy (cryo-EM) structures of DNA-PKcs (DNA-PK catalytic subunit) bound to a DNA end or complexed with Ku70/80 and DNA in both inactive and activated forms at resolutions of 3.7 Å overall and 3.2 Å for FATKINs. These structures reveal the sequential transition of DNA-PK from inactive to activated forms. Most notably, activation of the kinase involves previously unknown stretching and twisting within individual solenoid segments and loosens DNA-end binding. This unprecedented structural plasticity of helical repeats may be a general regulatory mechanism of HEAT-repeat proteins. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7k11.cif.gz | 287.2 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7k11.ent.gz | 196.7 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7k11.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7k11_validation.pdf.gz | 701 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7k11_full_validation.pdf.gz | 708.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | 7k11_validation.xml.gz | 36.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7k11_validation.cif.gz | 57 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k1/7k11 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k1/7k11 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 22620MC 7k0yC 7k10C 7k17C 7k19C 7k1bC 7k1jC 7k1kC 7k1nC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このデータのモデリングに利用したマップデータ |
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類似構造データ |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 469673.219 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Homo sapiens (ヒト) 参照: UniProt: P78527, non-specific serine/threonine protein kinase |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: FATKIN / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
緩衝液 | pH: 7.9 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 45 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.14_3260: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.21 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 367072 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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