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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7aqd | |||||||||
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タイトル | Structure of the bacterial RQC complex (Translocating State) | |||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / rqch / rqc / rqc2 / hsp15 / fibronectin-binding protein / NEMF / ribosome-associated quality control / ribosome-associated / 50s / Alanine-tailing | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RQC complex / positive regulation of rRNA processing / nucleoid / ribosomal large subunit binding / rescue of stalled ribosome / rRNA processing / large ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity ...RQC complex / positive regulation of rRNA processing / nucleoid / ribosomal large subunit binding / rescue of stalled ribosome / rRNA processing / large ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / response to antibiotic / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Filbeck, S. / Pfeffer, S. | |||||||||
資金援助 | ドイツ, 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2021 タイトル: Mimicry of Canonical Translation Elongation Underlies Alanine Tail Synthesis in RQC. 著者: Sebastian Filbeck / Federico Cerullo / Helge Paternoga / George Tsaprailis / Claudio A P Joazeiro / Stefan Pfeffer / 要旨: Aborted translation produces large ribosomal subunits obstructed with tRNA-linked nascent chains, which are substrates of ribosome-associated quality control (RQC). Bacterial RqcH, a widely conserved ...Aborted translation produces large ribosomal subunits obstructed with tRNA-linked nascent chains, which are substrates of ribosome-associated quality control (RQC). Bacterial RqcH, a widely conserved RQC factor, senses the obstruction and recruits tRNA to modify nascent-chain C termini with a polyalanine degron. However, how RqcH and its eukaryotic homologs (Rqc2 and NEMF), despite their relatively simple architecture, synthesize such C-terminal tails in the absence of a small ribosomal subunit and mRNA has remained unknown. Here, we present cryoelectron microscopy (cryo-EM) structures of Bacillus subtilis RQC complexes representing different Ala tail synthesis steps. The structures explain how tRNA is selected via anticodon reading during recruitment to the A-site and uncover striking hinge-like movements in RqcH leading tRNA into a hybrid A/P-state associated with peptidyl-transfer. Finally, we provide structural, biochemical, and molecular genetic evidence identifying the Hsp15 homolog (encoded by rqcP) as a novel RQC component that completes the cycle by stabilizing the P-site tRNA conformation. Ala tailing thus follows mechanistic principles surprisingly similar to canonical translation elongation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7aqd.cif.gz | 2 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7aqd.ent.gz | 1.6 MB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7aqd.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7aqd_validation.pdf.gz | 1001 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7aqd_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7aqd_validation.xml.gz | 128.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7aqd_validation.cif.gz | 229.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/aq/7aqd ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/aq/7aqd | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 3種, 3分子 ABT
#2: RNA鎖 | 分子量: 946399.250 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
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#3: RNA鎖 | 分子量: 36157.520 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: GenBank: 1150402534 |
#18: RNA鎖 | 分子量: 24491.547 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
+50S ribosomal protein ... , 27種, 27分子 CDEFGIJKLMNOQSUVXZabcdefghi
-タンパク質 / タンパク質・ペプチド , 2種, 2分子 RW
#1: タンパク質 | 分子量: 65307.398 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: O34693 |
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#21: タンパク質・ペプチド | 分子量: 515.560 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Bacterial RQC complex / タイプ: RIBOSOME / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN |
撮影 | 電子線照射量: 45 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
電子光学装置 | エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 5869410 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 24348 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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