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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6z3z | ||||||
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タイトル | CryoEM structure of horse sodium/proton exchanger NHE9 without C-terminal regulatory domain in an inward-facing conformation | ||||||
要素 | Sodium/hydrogen exchanger | ||||||
キーワード | MEMBRANE PROTEIN / TRANSPORT PROTEIN | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 potassium:proton antiporter activity / sodium:proton antiporter activity / sodium ion import across plasma membrane / sodium ion transmembrane transport / potassium ion transmembrane transport / proton transmembrane transport / regulation of intracellular pH / recycling endosome / recycling endosome membrane / phagocytic vesicle membrane ...potassium:proton antiporter activity / sodium:proton antiporter activity / sodium ion import across plasma membrane / sodium ion transmembrane transport / potassium ion transmembrane transport / proton transmembrane transport / regulation of intracellular pH / recycling endosome / recycling endosome membrane / phagocytic vesicle membrane / late endosome membrane / early endosome membrane / protein homodimerization activity / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Equus caballus (ウマ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.19 Å | ||||||
データ登録者 | Winkelmann, I. / Matsuoka, R. / Meier, P. / Drew, D. | ||||||
引用 | ジャーナル: EMBO J / 年: 2020 タイトル: Structure and elevator mechanism of the mammalian sodium/proton exchanger NHE9. 著者: Iven Winklemann / Rei Matsuoka / Pascal F Meier / Denis Shutin / Chenou Zhang / Laura Orellana / Ricky Sexton / Michael Landreh / Carol V Robinson / Oliver Beckstein / David Drew / 要旨: Na /H exchangers (NHEs) are ancient membrane-bound nanomachines that work to regulate intracellular pH, sodium levels and cell volume. NHE activities contribute to the control of the cell cycle, cell ...Na /H exchangers (NHEs) are ancient membrane-bound nanomachines that work to regulate intracellular pH, sodium levels and cell volume. NHE activities contribute to the control of the cell cycle, cell proliferation, cell migration and vesicle trafficking. NHE dysfunction has been linked to many diseases, and they are targets of pharmaceutical drugs. Despite their fundamental importance to cell homeostasis and human physiology, structural information for the mammalian NHE was lacking. Here, we report the cryogenic electron microscopy structure of NHE isoform 9 (SLC9A9) from Equus caballus at 3.2 Å resolution, an endosomal isoform highly expressed in the brain and associated with autism spectrum (ASD) and attention deficit hyperactivity (ADHD) disorders. Despite low sequence identity, the NHE9 architecture and ion-binding site are remarkably similar to distantly related bacterial Na /H antiporters with 13 transmembrane segments. Collectively, we reveal the conserved architecture of the NHE ion-binding site, their elevator-like structural transitions, the functional implications of autism disease mutations and the role of phosphoinositide lipids to promote homodimerization that, together, have important physiological ramifications. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6z3z.cif.gz | 145 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6z3z.ent.gz | 112.3 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6z3z.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6z3z_validation.pdf.gz | 928.1 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6z3z_full_validation.pdf.gz | 936 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6z3z_validation.xml.gz | 33.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6z3z_validation.cif.gz | 51.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/z3/6z3z ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/z3/6z3z | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 52572.227 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: 'GENLYFQ' in C terminal comes from Tag / 由来: (組換発現) Equus caballus (ウマ) / 遺伝子: SLC9A9 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: F7B113 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Sodium proton antiporter / タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT | ||||||||||||||||||||
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由来(天然) | 生物種: Equus caballus (ウマ) | ||||||||||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | ||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 | ||||||||||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: HELIUM |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 165000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 700 nm / Cs: 2.7 mm / アライメント法: BASIC |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 10 sec. / 電子線照射量: 80 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV / 位相板: ZERNIKE PHASE PLATE / 球面収差補正装置: Nothing |
画像スキャン | 横: 3710 / 縦: 3838 / 動画フレーム数/画像: 40 / 利用したフレーム数/画像: 1-40 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.18.2_3874: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.19 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 595024 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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