+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6hyd | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Rea1 Wild type ADP state (tail part) | ||||||
要素 | Midasin,Midasin,Midasin | ||||||
キーワード | MOTOR PROTEIN / Rea1 / Mdn1 / Midasin / AAA+ protein / ribosome maturation / molecular machine | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 protein-RNA complex remodeling / regulation of ribosomal subunit export from nucleus / preribosome, large subunit precursor / ribosomal large subunit export from nucleus / rRNA processing / ribosomal large subunit assembly / nucleolus / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / nucleoplasm ...protein-RNA complex remodeling / regulation of ribosomal subunit export from nucleus / preribosome, large subunit precursor / ribosomal large subunit export from nucleus / rRNA processing / ribosomal large subunit assembly / nucleolus / ATP hydrolysis activity / mitochondrion / nucleoplasm / ATP binding / nucleus 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | ||||||
データ登録者 | Sosnowski, P. / Urnavicius, L. / Boland, A. / Fagiewicz, R. / Busselez, J. / Papai, G. / Schmidt, H. | ||||||
資金援助 | フランス, 1件
| ||||||
引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2018 タイトル: The CryoEM structure of the ribosome maturation factor Rea1. 著者: Piotr Sosnowski / Linas Urnavicius / Andreas Boland / Robert Fagiewicz / Johan Busselez / Gabor Papai / Helgo Schmidt / 要旨: The biogenesis of 60S ribosomal subunits is initiated in the nucleus where rRNAs and proteins form pre-60S particles. These pre-60S particles mature by transiently interacting with various assembly ...The biogenesis of 60S ribosomal subunits is initiated in the nucleus where rRNAs and proteins form pre-60S particles. These pre-60S particles mature by transiently interacting with various assembly factors. The ~5000 amino-acid AAA+ ATPase Rea1 (or Midasin) generates force to mechanically remove assembly factors from pre-60S particles, which promotes their export to the cytosol. Here we present three Rea1 cryoEM structures. We visualise the Rea1 engine, a hexameric ring of AAA+ domains, and identify an α-helical bundle of AAA2 as a major ATPase activity regulator. The α-helical bundle interferes with nucleotide-induced conformational changes that create a docking site for the substrate binding MIDAS domain on the AAA +ring. Furthermore, we reveal the architecture of the Rea1 linker, which is involved in force generation and extends from the AAA+ ring. The data presented here provide insights into the mechanism of one of the most complex ribosome maturation factors. | ||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6hyd.cif.gz | 288.8 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | pdb6hyd.ent.gz | 222.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6hyd.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6hyd_validation.pdf.gz | 644.7 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | 6hyd_full_validation.pdf.gz | 650.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6hyd_validation.xml.gz | 49.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6hyd_validation.cif.gz | 77.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/hy/6hyd ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/hy/6hyd | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
|
---|---|
1 |
|
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 192045.828 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) 株: ATCC 204508 / S288c / 遺伝子: MDN1, REA1, YLR106C, L2901, L8004.13 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q12019 |
---|
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Rea1 (MIDASIN) tail with ADP / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT | ||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) | ||||||||||||||||||||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.2 / 詳細: ADP was added 5 minute before the plunging | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 105000 X / 倍率(補正後): 105000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3400 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1800 nm / Cs: 0.01 mm / アライメント法: ZEMLIN TABLEAU |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER Residual tilt: 12 mradians |
撮影 | 平均露光時間: 0.2 sec. / 電子線照射量: 46.2 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 14 / 実像数: 23230 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Quantum LS / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV / 球面収差補正装置: Titan Krios Cs Corrector |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 5 µm / 横: 3712 / 縦: 3840 / 動画フレーム数/画像: 35 / 利用したフレーム数/画像: 2-35 |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.13_2998: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
EMソフトウェア |
| ||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 432556 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
|